E.Ala-Gly-Lys
5.[ ]测定小肽氨基酸顺序的最好方法是 A.2，4-二硝基氟苯法(FDNB法) B.二甲氨基萘磺酰氯法(DNS-Cl法) C.氨肽酶法
D.苯异硫氰酸法(PITC法) E.羧肽酶法
6.[ ]用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键? A.双缩脲反应 B.克氏定氮 C.紫外吸收 D.茚三酮反应 E.奈氏试剂
7.[ ]下列有关α-螺旋的叙述哪个是错误的?
A.分子内的氢键使α-螺旋稳定减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定
B.减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定 C.疏水作用使α-螺旋稳定
D.在某些蛋白质中，α-螺旋是二级结构中的一种类型 E.脯氨酸和甘氨酸残基使α-螺旋中断 8.[ ]下列哪种方法可得到蛋白质的?指纹?图谱? A.酸水解，然后凝胶过滤
B.彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸的组成 C.用氨肽酶降解并测定被释放的氨基酸的组成 D.用胰蛋白酶降解，然后进行纸层析和纸电泳 E.用2，4-二硝基氟苯处理蛋白质 9.[ ]血红蛋白别构作用的本质是其中的铁离子 A.价态发生变化 B.自旋状态发生变化
C.与卟啉环氮原子连接的键长发生变化 D.以上说法都对 E.以上说法都不对
10.[ ]若用电泳分离Gly-Lys、Asp-Val和Ala-His三种二肽，在下列哪个pH条件下电泳最为合适？ A.pH2以下 B.pH2～4 C.pH7～9 D.pH10～12 E.pH12以上
11.[ ]进行疏水吸附层析时，以下哪种条件比较合理 A.在有机溶剂存在时上柱，低盐溶液洗脱 B.在有机溶剂存在时上柱，高盐溶液洗脱 C.低盐条件下上柱，高盐溶液洗脱
D.高盐溶液上柱，按低盐，水和有机溶剂顺序洗脱。
6
E.低盐缓冲液上柱，低盐洗脱
12.[ ]人工合肽时，采用下列哪种方法可以活化氨基？ A.加入三乙胺 B.甲酰化 C.乙酰化 D.烷基化 E.酸化
13.[ ]下列氨基酸中哪些具有分支的碳氢侧链? (1).缬氨酸 (2).组氨酸 (3).异亮氨酸 (4).色氨酸
A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4
14.[ ]下列关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键的叙述，哪些是正确的? (1).具有部分双键的性质 (2).比通常的C-N单键短 (3).通常有一个反式构型 (4).能自由旋转
A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4 15.[ ]下列关于蛋白质结构的叙述哪些是正确的? (1).二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用 (2).当蛋白质放入水中时，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面
(3).蛋白质的一级结构决定高级结构
(4).氨塞酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部
A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4 16.[ ]下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的？
(1).四个血红素基各自独立地与氧结合，彼此之间并无联系 (2).以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图，曲线呈S形 (3).氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳强
(4).氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4 四、问答与计算
1.蛋白质换算系数6.25是如何产生的？什么情况下可以不用6.25？
2.组成蛋白质的常见氨基酸有哪些？它们的分子结构有哪些共同点？写出各种常见氨基酸的名称、结构和三字母符号。
3. 什么是氨基酸的等电点，如何进行计算？写出His的解离反应式，并计算其等电点。
4.向1L浓度为1mol/L的，处于等电点的Gly溶液中加入0.3mol的HCl（体积忽略不计），问溶液PH为多少？并用计算结果说明氨基酸的PH缓冲作用。
5.再PH4的溶液中，Glu、Ile、Arg的带电情况如何？它们在直流电场中的泳动方向如何？
6.在PH3.0的柠檬酸缓冲溶液中有Asp、Gly、Thr、Leu和Lys，将此溶液加到732阳离子的交换柱上（此柱先用同样缓冲液平衡）。然后用适当的PH梯度
7
（低－高）缓冲液洗脱，并分部收集。试问五种氨基酸洗脱下来的顺序如何？
7.在作氨基酸纸上层析时，用正丁醇：甲酸：水＝15：3：2的溶剂系统作展层析剂，样品溶液中有Val、Ile、Arg、Ala，试分析它们在层析图谱上的排列顺序如何？为什么？
8. 蛋白质是由哪些元素组成的？其基本结构单元是什么？写出其结构通式。蛋白质如何分类？蛋白质在生命活动中有何重要意义？
9.试述蛋白质的一、二、三、四级结构的涵义？三级结构的构象有什么特点？三级结构与生理功能关系如何？
10. 为什么说蛋白质的水溶液是一种稳定的亲水胶体？试述蛋白质的胶体性质及其与实践的关系？
11.蛋白质为何具有两性解离性质？同一PH条件下，等电点不同的蛋白质带电状况如何？
12.何谓蛋白质变性作用？简述蛋白质复性的机理，并概要说明变性蛋白质的特点,举例说明与实践的关系。
13.试述蛋白质沉淀的类型、方法及其与实践的关系？ 14.何谓双缩脲反应？有何用途？
15.简述几种蛋白质相对分子质量测定方法的原理？
16.解释下列名词：蛋白质、肽键、酰胺平面、肽链、末端、构象、疏水相互作用、
α－螺旋、β－折迭、β-转角、变构蛋白、亚基、辅基、沉降系数S、GSH、蛋白质系数、无规则卷曲、盐析、分段盐析、透析、超滤、稀有氨基酸、非蛋白质氨基酸、Sanger反应、Edman反应、茚三酮反应。
17.总结蛋白质定量、定性分析的常用方法有那些？ 18.分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽，如能，则指出其水解部位。
肽 酶 (1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶 (2)Phe-Met-Leu 羧肽酶B
(3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶 (4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶
19.假定有1mmol的五肽，酸水解生成2mmol谷氨酸，1mmol赖氨酸，没有能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段，在pH7.0进行电泳，一个肽段移向阳极，另一个则移向阴极。用FDNB处理胰蛋白酶水解的一个肽段，再用酸水解，生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸顺序。
20.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。
(1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序 (2)鉴定小于10-7克肽的N-端氨基酸
(3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫键，应加何种试剂？ (4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键 (5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键 (6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键
21.扼要解释为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质。
8
(1)在低pH时沉淀。
(2)当离子强度从零逐渐增加时，其溶解度开始增加，然后下降，最后出现沉淀。
(3)在一定的离子强度下，达到等电点pH值时，表现出最小的溶解度。 (4)加热时沉淀。
(5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数，而导致溶解度的减小。
(6)如果加入一种非极性强的溶剂，使介电常数大大地下降会导致变性。 22.0.1mo1/L的谷氨酸溶液处于它的等电点: (1)计算主要等电形式的的谷氨酸的近似浓度。 (2)计算完全质于化形式的谷氨酸的近似浓度。
(3)在溶液中甚至浓度小到几乎没有的，共有多少种形式?
23.某一蛋白质的多肽链在一些区段为α-螺旋构象，在另一些区段为β-构象。该蛋白质的相对分子质量为240000，多肽链外形的长度为 5.06×10-5cm。试计算α-螺旋体占分子的百分之多少?
24.何谓谷胱甘肽？简述其结构特点和生物学作用？ 25.什么是构型和构象？它们有何区别？
26.蛋白质有哪些结构层次？分别解释它们的含义。
27.维系蛋白质结构的化学键有哪些？它们分别在哪一级结构中起作用？ 28.碳氢链R基在蛋白质构象中如何取向？
29.多肽的骨架是什么原子的重复顺序，写出一个三肽的通式，并指明肽单位和氨基酸残基。
30.一个三肽有多少NH 2 和COOH端？牛胰岛素呢？ 31.利用哪些化学反应可以鉴定蛋白质的N-端和C-端？
第二章 核酸
一、填空题
1.核酸的基本结构单位是________________。
2.DNA双螺旋中只存在________________种不同碱基对。T总是与________________配对，C总是与________________配对。
3.两类核酸在细胞中的分布不同，DNA主要位于________________中，RNA主要位于________________中。
4.核酸在260nm附近有强吸收，这是由于________________。 5.变性DNA的复性与许多因素有关，包括________________，
________________，________________，________________，________________等。
6.DNA复性过程符合二级反应动力学，其值与DNA的复杂程度成________________比。
7.A.Rich在研究d(CGCGCG)寡聚体的结构时发现它为________________螺旋，称为________________形DNA，外型较为________________。 8.常用二苯胺法测定________________含量，用苔黑酚法测
9
________________含量。
9.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是________________，其次，大量存在于DNA分子中的弱作用力如________________，________________和________________也起一定作用。
10.tRNA的三级结构为________________形，其一端为________________，另一端为________________。
11.测定DNA一级结构的方法主要有Sanger提出的________________法和Maxam，Gilbert提出的________________法。
12.T.Cech和S.Altman因发现________________而荣获1989年诺贝尔化学奖。
二、是非题
1.[ ]脱氧核糖核苷中的糖环3′位没有羟基。
2.[ ]若双链DNA中的一条链碱基顺序为：pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱
基顺序为：pGpApCpCpTpG。
3.[ ]若种属A的DNA Tm值低于种属B，则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。
4.[ ]原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。 5.[ ]用碱水解核酸，可以得到2′与3′-核苷酸的混合物。 6.[ ]Z型DNA与B型DNA可以相互转变。
7.[ ]生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。 8.[ ]mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。
9.[ ]tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。 10.[ ]真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3′-OH。 11.[ ]目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA中。 12.[ ]核酸变性或降解时，出现减色效应。
13.[ ]DNA样品A与B分别与样品C进行杂交实验，得到的杂交双链结构如下图：
那么说明样品A与C的同源性比样品B与C的同源性高。 14.[ ]在所有病毒中，迄今为止还没有发现既含有RNA又含有DNA的病毒。 15.[ ]基因表达的最终产物都是蛋白质。
16.[ ]核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶分别作用于RNA和DNA中的磷酸二酯
键，均属于特异性的磷酸二酯酶。
17.[ ]核糖体不仅存在于细胞质中，也存在于线粒体和叶绿体中。 三、单选题
1.[ ]胰核糖核酸酶水解RNA，产物是： A.3'-嘧啶核苷酸 B.5’-嘧啶核苷酸
C.3'-嘧啶核苷酸和以3'-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸 D.5'-嘧啶核苷酸和以5'-嘧啶核苷酸结尾的寡聚核苷酸 E.3'-嘧啶核苷酸和5'-嘧啶核苷酸
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