是否需否 否 是 要营养物质 缺点 ①对环境条件非常敏感，易失不利于催化一系列的酶促反应物不宜与酶接近，尤活②难回收，成本高，影响产反应 其是大分子物质，反应效品质量 率下降 优点 催化效率高，耗能低、低污染 ①既能与反应物接触，又成本低，操作容易 能与产物分离②可以反复利用 【解答】解：A、酶分子较小，易从包埋材料中漏出，因此一般不用包埋法固定化酶，A错误；
B、固定化细胞使用的都是活细胞，在应用时要注意为其提供适宜的生存条件，B正确； C、固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，这样使反应的效率有所降低，C错误； D、固定化酶和固定化细胞所固定的酶分别只能在细胞外和细胞内起作用，D错误． 故选：B．
【点评】本题考查固定化技术，要求考生识记固定化酶和固定化细胞的相关知识，能对两者进行比较，再结合所学的知识准确判断各选项．
19．水是实验中经常使用的试剂之一．下列叙述正确的是（ ） A．从鸡的血细胞中提取DNA过程至少需三次使用蒸馏水 B．经苏丹Ⅲ染色后的花生子叶切片需用清水洗去浮色 C．叶绿体中色素的提取用水作溶剂
D．观察植物细胞有丝分裂实验中解离后的根尖需用清水漂洗
【考点】观察细胞的有丝分裂；检测脂肪的实验；叶绿体色素的提取和分离实验；DNA的粗提取和鉴定．
【分析】1、在DNA的粗提取和鉴定中，第一次加蒸馏水使细胞吸水涨破，释放DNA；第二次加蒸馏水是降低氯化钠浓度，使DNA析出．
2、经苏丹Ⅲ染色后的花生子叶切片，需用50%酒精洗去浮色．
3、绿叶中色素的提取和分离实验中需用无水酒精或丙酮来提取色素．
4、观察细胞有丝分裂实验的步骤：解离（解离液由盐酸和酒精组成，目的是使细胞分散开来）、漂洗（洗去解离液，便于染色）、染色（用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染料）、制片（该过程中压片是为了将根尖细胞压成薄层，使之不相互重叠影响观察）和观察（先低倍镜观察，后高倍镜观察）．
【解答】解：A、从鸡的血细胞中提取DNA过程至少需二次使用蒸馏水，A错误； B、经苏丹Ⅲ染色后的花生子叶切片需用50%的酒精洗去浮色，B错误；
C、色素溶于有机溶剂，故叶绿体中色素的提取用无水乙醇或酒精作溶剂，C错误； D、观察植物细胞有丝分裂实验中解离后的根尖需用清水漂洗，D正确． 故选：D．
【点评】本题考查观察细胞的有丝分裂、DNA的粗提取和鉴定、叶绿体中色素的提取、脂肪的鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验选用的材料、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．
20．下列采集和处理实验材材的做法中，正确的是（ ） A．用鸡血细胞提取DNA，需要先用洗涤剂溶解细胞膜
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B．用胡萝卜韧皮部细胞进行组织培养，培养基和实验材料均要高温灭菌 C．用藓类叶片观察叶绿体，应用镊子撕取稍带些叶肉的下表皮进行观察 D．用涂布平板法纯化大肠杆菌，应当对菌液进行稀释
【考点】用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落；观察线粒体和叶绿体；DNA的粗提取和鉴定；植物培养的条件及过程．
【分析】DNA的粗提取需要使用合适的所以材料，是细胞破裂释放出DNA．植物细胞的分化程度越高，细胞的全能性就越低，反之，就越高．叶绿体的观察常使用菠菜叶片的下表皮或藓类叶片．微生物进行涂布平板培养时常需要进行梯度稀释．
【解答】解：A、用植物细胞提取DNA，需要先用洗涤剂溶解细胞膜，鸡血细胞提取DNA可以直接加蒸馏水使细胞吸水破裂即可，A错误；
B、用胡萝卜形成层细胞进行组织培养，形成层细胞的全能性高于韧皮部细胞的形成层，培养基和实验材料均要高温灭菌，B错误；
C、用菠菜叶片观察叶绿体，应用镊子撕取稍带些叶肉的下表皮进行观察，藓类叶片只有1至2层细胞构成，C错误；
D、用涂布平板法纯化大肠杆菌，应当对菌液进行稀释，否则不能获得单菌落，D正确． 故选：D．
【点评】本题主要考查微生物的培养、植物的制作培养、DNA的粗提取等内容，意在强化学生对数学知识点理解和综合运用．
二、多项选择题：本题包括5小题，每小题3分，共15分．每小题有不止一个选项符合题意，每题全对得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分． 21．下列实验，适宜选用新鲜、成熟菠菜叶作材料的是（ ） A．观察质壁分离 B．观察染色体的形态与数目
C．生物组织中还原糖的鉴定 D．绿叶中色素的提取与分离
【考点】观察植物细胞的质壁分离和复原；检测还原糖的实验；叶绿体色素的提取和分离实验． 【分析】阅读题干可知本题是考查课本常见实验材料的相关知识，先阅读题干找出实验目的，根据实验目的对相关知识进行梳理，并根据问题提示结合基础知识进行回答．菠菜叶片细胞含有较多的叶绿体，可以用于观察植物细胞中的叶绿体，也可以用于叶绿体中色素的提取与分离实验；同时，菠菜叶片细胞是成熟的植物细胞，含有大液泡，可用于观察质壁分离和复原．
【解答】解：A、菠菜叶片细胞含有大液泡，能发生渗透失水或吸水，可用于观察质壁分离和复原，A正确；
B、一般采用能发生有丝分裂的材料，例如根尖分生区的细胞观察染色体的形态和数目，B错误；
C、生物组织中还原糖的鉴定的材料要求是颜色要浅，一般用苹果、梨匀浆等，C错误； D、光合色素的提取与分离一般选用新鲜、绿色菠菜叶作材料，D正确． 故选：AD．
【点评】本题考查课本基础实验的原理和选材，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用；并对实验现象和结果进行解释、分析、处理．
22．如图表示真核生物细胞中合成分泌蛋白的过程，有关说法正确的是（ ）
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A．图中核糖体在mRNA上移动的方向是从左向右
B．一个mRNA上结合多个核糖体可以迅速合成大量蛋白质 C．核糖体移动到mRNA末端直到脱落，翻译过程随即终止 D．粗面型内质网对翻译合成的多肽要进行加工和转运
【考点】遗传信息的转录和翻译；细胞器之间的协调配合．
【分析】图示为翻译过程，以mRNAmRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程，据此答题．
【解答】解：A、根据不同核糖体形成的肽链的长度可知核糖体在mRNA上移动的方向是从左向右，A正确；
B、一个mRNA上可以同时结合多个核糖体，同时进行多条肽链的合成，提高合成蛋白质的速度，B正确；
C、核糖体移动到mRNA上的终止密码时，翻译过程随即终止，C错误；
D、核糖体上经过翻译过程形成的肽链需要经过内质网的加工才能形成具有一定的空间结构的蛋白质，D正确． 故选：ABD．
【点评】对于遗传信息的转录和翻译、细胞器之间的协调配合的综合性理解，并把握知识点间的内在联系是本题考查的重点．
23．下列有关绿色植物叶肉细胞中物质运输的途径，可能存在的是（ ） A．产生的CO2：线粒体→细胞质基质→叶绿体 B．合成的葡萄糖：叶绿体→细胞质基质→线粒体 C．产生的O2：叶绿体→细胞质基质→细胞膜
D．合成的RNA聚合酶：核糖体→内质网→高尔基体→细胞膜 【考点】线粒体、叶绿体的结构和功能；细胞器之间的协调配合． 【分析】本题是对有氧呼吸的过程和场所，细胞呼吸的方式和产物、细胞器和细胞核的功能、分泌蛋白的合成和分泌过程的综合性考查，回忆有氧呼吸的过程和场所，细胞呼吸的方式和产物、分泌蛋白的合成和分泌过程及细胞核的结构和功能，然后分析选项进行解答．
【解答】解：A、植物细胞产生二氧化碳的场所是线粒体，通过细胞质基质进入叶绿体进行光合作用，A正确；
B、葡萄糖不能进入线粒体，葡萄糖只有在细胞质基质中形成丙酮酸，丙酮酸进入线粒体进行进一步氧化分解，B错误；
C、当植物光合作用大于呼吸作用时，叶绿体光合作用产生的部分氧气进入细胞质基质，通过细胞膜进入外界环境，C正确； D、RNA聚合酶的作用是催化转录过程，本质是蛋白质，因此RNA聚合酶在核糖体上合成，进入细胞质基质，由细胞质基质从核孔进入细胞核催化转录过程，D错误． 故选：AC．
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【点评】对于细胞的结构和功能、有氧呼吸的过程和场所，细胞呼吸的方式和产物及细胞器之间的协调配合等相关知识的综合理解，并把握知识点间的内在联系是解题的关键．
24．下列有关传统果酒、果醋发酵和腐乳制作的比较，正确的是（ ） A．果酒、腐乳发酵的主要微生物属于真核生物，果醋发酵菌种属于原核生物 B．三种发酵过程中都可以通过控制发酵温度实现对微生物类型的控制 C．果酒发酵在无氧环境下进行，果醋和腐乳发酵在有氧条件下进行 D．果酒、果醋和腐乳制作过程利用的都是微生物胞内酶
【考点】酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；制作腐乳的科学原理及影响腐乳品质的条件． 【分析】本题是对果酒、果醋发酵和腐乳制作的原理、菌种、菌种的代谢特点和发酵条件的考查，回忆果酒、果醋发酵和腐乳制作的原理、菌种、菌种的代谢特点和发酵条件，然后分析选项进行解答．
【解答】解：A、果酒发酵的菌种是酵母菌，腐乳发酵的主要菌种是毛霉，酵母菌和毛霉属于真核生物，果醋发酵菌种是醋酸菌，属于原核生物，A正确；
B、果酒、果醋发酵和腐乳制作过程的菌种生活的温度条件不同，可以通过控制发酵温度实现对微生物类型的控制，B正确；
C、酵母菌无氧呼吸产生酒精，果酒发酵在无氧环境下进行，醋酸菌和毛霉属于需氧生物，果醋和腐乳发酵在有氧条件下进行，C正确； D、腐乳制作过程是利用毛霉的胞外酶，D错误． 故选：ABC．
【点评】对果酒、果醋发酵和腐乳制作的原理、菌种、菌种的代谢特点和发酵条件进行比较记忆是本题考查的重点．
25．下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是（ ）
A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合形成重组DNA B．限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子 C．用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁生长的动物细胞可使其分散
D．用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体可用于植物体细胞杂交 【考点】基因工程的原理及技术；植物体细胞杂交的过程．
【分析】酶均具有专一性．限制酶和DNA连接酶的作用部位均为磷酸二酯键，只是限制酶是切割磷酸二酯键，DNA连接酶是连接磷酸二酯键；在磷酸二酯键形成和断裂过程中，伴随了水的生成和消耗． 在植物体细胞杂交过程中，需利用纤维素酶或果胶酶水解细胞壁获得原生质体，然后进行原生质体融合．
【解答】解：A、DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的磷酸二酯键黏合，形成重组DNA，A错误；
B、限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段，即断裂两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，B正确；
C、由于动物细胞之间通过胶原蛋白相连，所以动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁生长的动物细胞可使其分散，C正确；
D、细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此植物体细胞杂交过程中利用纤维素酶或果胶酶水解细胞壁获得原生质体，D正确． 故选：BCD．
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【点评】本题考查了生物工程中常见的几种酶的相关知识，意在考查考生的识记能力和区分能力，难度适中．考生要能够识记和理解基因工程中工具酶的作用部位和作用效果；能够区分植物体细胞杂交和植物杂交育种．
三．简答题
26．放射性同位素标记技术在生物学的研究中已被广泛应用． （1）若用O标记H
18
O研究动物有氧呼吸的过程，则其最终出现在 CO2 （物质）
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中．
3535
（2）在噬菌体侵染细菌实验中，获得S标记的噬菌体的方法是 用含S的培养基培养
35
大肠杆菌，再用噬菌体去侵染被S标记的大肠杆菌 ．
1515
（3）利用N标记的氨基酸研究唾液腺细胞的唾液淀粉酶的合成和分泌，则N首先出现
15
在具膜的细胞器是 内质网 ，最终含N唾液淀粉酶以 胞吐（外排） 方式从细胞中分泌出去．
1514151415
（4）a、b、c为三种DNA分子：a只含N，b同时含N和N，c只含N．将N标
14
记的DNA分子，放入含N的培养基上连续扩增了4代，则a、b、c三种DNA分子所占的比例依次是 0 1/8 7/8 ．
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（5）用P标记的胰岛素基因探针，对小鼠胚胎干细胞和胰岛B细胞进行检测． 用探针探测细胞的DNA 用探针探测细胞的RNA 胚胎干细胞 胰岛B细胞 胚胰胎岛干B细细胞胞 + + ﹣+
表格的空格中应填写的检测结果依次是 ++﹣+ ．（用“+”表示能检测到，用“﹣”表示不能检测到）．
【考点】有氧呼吸的过程和意义；细胞膜系统的结构和功能；噬菌体侵染细菌实验；DNA分子的复制．
【分析】有氧呼吸过程中，水参与有氧呼吸的第二阶段，与丙酮酸反应生成CO2．噬菌体是病毒，没有细胞结构，不能独立生存，必须寄生在活细胞内．分泌蛋白质合成与分泌过程为：核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔基体“出芽”形成囊泡→细胞膜．DNA的复制方式是半保留复制．小鼠体内的胚胎干细胞和胰岛B细胞均是由同一个受精卵发育而来的，因此它们所含的DNA相同，但由于基因的选择性表达，它们所含的RNA有所区别． 【解答】解：（1）有氧呼吸过程中，水参与有氧呼吸的第二阶段，与丙酮酸反应生成CO2．所以用O标记H
18
O，则其最终出现在CO2 中．
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（2）噬菌体是病毒，没有细胞结构，不能独立生存，所以在噬菌体侵染细菌实验中，要获353535
得S标记的噬菌体，首先用含S的培养基培养大肠杆菌，再用噬菌体去侵染被S标记的大肠杆菌．
（3）唾液淀粉酶属于分泌蛋白质，分泌蛋白质合成与分泌过程为：核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→内质网“出芽”形成囊泡→高尔基体进行再加工形成成熟的蛋白质→高尔
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