毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药的功效,用于脾胃虚弱,倦怠乏力,心悸气短,咳嗽痰多,脘腹、四肢挛急诊疼痛,痈肿疮毒,缓解药物毒性、烈性。
甘草中含有三萜类皂苷和黄酮类化合物,主要有效成分为甘草酸(glycyrrhiza acid)和甘草次酸(glycyrrhetinic acid)。其结构和主要理化性质如下。
1.甘草酸 为无色柱状结晶( 冰乙酸 ),mpl70℃,加热至220℃分解,[α]D20+46.2°( 乙醇 )。易溶于热水,可溶于热稀乙醇,几乎不溶于无水乙醇或乙醚,,其水溶液有微弱的起泡性及溶血性。甘草酸与5%稀硫酸在加压下,110-120℃进行水解,生成2分子葡萄糖醛酸及其苷元甘草次酸。
2.甘草次酸 具有α型和β型两种晶型。α型为小片状结晶,mp283℃,[α]D20+140°( 乙醇 );β型为针状结晶,mp296℃,[α]D20+86°( 乙醇 )。两种结晶均易溶于乙醇或氯仿。
COOHOHOHCOOHCOOHOOOHOHOHO+H+HOHOOHCOOHH+ 2 分子葡萄糖OH甘草酸 甘草 次酸
[目的要求]
1.通过查阅文献自行设计甘草中甘草酸和甘草次酸的提取分离方法并加以实施。
2.自行设计甘草酸和甘草次酸的鉴定和检识方法。 3.掌握中药有效成分提取、分离和鉴定的一般过程和思路。 [实验内容]
1. 查阅有关甘草提取、分离与鉴定的资料, 写出文献来源及文献分析。 2. 自行设计提取分离工艺,提供实验基本原理。
3. 小组讨论完善实验设计,提供工艺要点的实验依据及实验方法;提供可行的定性分析方法用于跟踪分析;提供产品的定性和定量分析方法。
4. 实验完后认真总结,写出实验报告,各小组交流讨论,上交实验产品和报告。
附录一
常用试剂及配制方法
1. 碘化汞钾试剂(MayereT.S)
二氯化汞1.35克与碘化钾5克,分别溶于60ml及10ml水中,将两液混合,将水稀释至100毫升,如有不溶沉淀可加碘化钾至溶解为止。 2. 碘化铋钾试剂(Dragendorff’ S. T. S)
碘化铋钾16克,碘化钾30克及盐酸3毫升共溶于100毫升水中,用棕色瓶保存。
3. 改良碘化铋钾试剂(Imprived Dragendorff’ S. T. S)
溶液甲:次硝酸铋0.85克,加入蒸馏水40毫升和冰醋酸10毫升,充分搅匀使混溶。
溶液乙:碘化钾8克溶于20毫升水中,如溶解缓缓可于水溶上徽热。 临时用取甲、乙二各5毫升,加入20毫升冰醋酸及60毫升水混合,用棕色瓶保存。
4. 硅钨酸试剂(Bertrand. S. T. S)
硅钨酸5克溶于100毫升水中,加浓盐酸少量使呈酸性(PH=2.0左右)。 5. 碘—碘化钾试剂(Wagner’S. T.S)
1克碘及10克碘化钾,溶于50毫升水中(可加热助溶),加2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升。
6. 茚三酮试剂[Ninhgdrin T. S (EtOH)]
茚三酮0.2克溶于100毫升乙醇中。 7. 1%三氯化铁试剂(Ferrio ehloride T. S)
1克三氯化铁溶于100毫升水中。
8. 1%三氯化铁乙醇液[Ferrio chloride solution (EtOH)]
1克三氯化铁溶于100毫升95%乙醇中。 9. 香草醛—硫酸试剂(Vanillin-Sunlfuricid-T. S.)
0.5克香草醛溶于100毫升硫酸—乙醇(4:1)的混合液中,临用前新鲜配制。
10. 三氯化铁—铁氰化钾试剂(Ferrio chloride-Potussium-Ferricyanide T. S.)
溶液甲:1%三氯化铁水溶液 溶液乙:1%铁氰化钾水溶液 临用时甲乙液等体积混合 11. 斐林试剂(Fehling’ST. S)
溶液甲:1.93克硫酸铜溶于100毫升水中。
溶液乙:34.6克洒石酸钾钠及10克氢氧化钠溶于100毫升水中。 临用前甲乙两液等体积配合,如试剂不澄明,可先过滤后再混合。 12. 硝酸银—氢氧化铵试剂(Tollcn’S T. S.)
溶液甲:0.1N硝酸银 溶液乙:5N氢氧化铵 临用前甲乙两液等体积混合。 13. 醋酸铅试剂
10%醋酸铅的水溶液。
14. 碱式醋酸铅试剂(basic lead acetate T. S)
取氧化铅14克,置乳钵内,加蒸馏水10毫升,研磨成湖状后,倾入玻璃瓶中,乳钵用蒸馏水10毫升,洗液并入瓶中,加醋酸铅溶液(取醋酸铅22克,加蒸馏水70毫升制成)50毫升,用力振摇5分钟后,时时振摇,放置7天,滤过,并在滤器上添加适量新沸过的冷蒸馏水,便成100毫升,即得。 15. 重氮化试剂(Diayuyating T. S.)
溶液甲:对硝基苯胺3.5克,溶于45毫升浓盐酸中,如溶解缓慢,可于水浴中加热,冷却,用水稀释至500毫升。
溶液乙:亚硝酸钠10克溶于100毫升水中。 临用时甲乙两溶液等量混合,贮于冰水中备用。 16. 碱性3.5—二硝基苯甲酸试剂(KeddeT. S.)
溶液甲:2%3.5—二硝基苯甲酸甲醇液。 溶液乙:1N氢氧化钾溶液。
临用前甲乙两液等量混合,用棕色瓶盛装。 17. 醋酐—浓硫酸试剂(Liebenann-Bruchard T. S)
溶液甲:醋酐 溶液乙:浓硫酸
18. 三氯化铝试剂[Aluminum chloride T. S. (EtOH)]
1%的三氯化铝乙醇液
19. 氢氧化钾醇液[Potassium hydrotide solution (EtOHOR MeOH)]
10%氢氧化钾乙醇或甲醇液,本品应用无醛醇配制。 20. 醋酸镁试剂[magnesium acetate T. S (EtOH)]
0.5%醋酸镁乙醇液。 21. 明胶溶液(Gelatin Solution)
白明胶1克溶于50毫升水中(在60℃水浴上加热助溶),加入氯化钠10克,使完全溶解后,用水稀释至100毫升。临用前新鲜取制。 22. 磷钼酸试剂[Phosphomolyldic acid T. S (EtOH)]
10%磷钼酸乙醇液,临用前新鲜配制。 23. α—萘酚试剂[Molish T. S. (EtOH)]
溶液甲:10%α—萘酚乙醇液 溶液乙:浓硫酸
24. 荧光素—溴试剂(Fluorescein sodiuon Bromine T. S.)
溶液甲:0.1%荧光素乙醇液 溶液乙:5%溴的四氯化碳溶液 使用时用甲液喷雾,再以乙液熏。
25. 澳酚兰乙酚液(Bromopbend blue solution (EtOH))
0.05%澳酚兰的乙醇溶液。
附录二
熔点的测定
1. 熔点(mp.)是化合物的固液两态互成平衡而共存的温度,每种纯的固体化
合物有其固定的熔点,熔点范围是指化合物开始液化至完全液体时的温度,如果是纯的化合物,其熔点范围为0.5℃或更小。一般纯度的化合物熔点范围为1-2℃。
如化合物不纯,则熔点降低。因此,测定化合物的熔点不仅能鉴别化合物而且还能判定化合物的纯度。
2. 测熔点的样品必须是非常干燥,否则熔点会下降,常用的干燥方法有: (1) (2)
常压干燥:一般为105℃干燥至恒重。
减压加热干燥:对具有升华性、低熔点、受热易分解、氧化的化合物采
用。 (3) (4)
干燥剂干燥:对不稳定品采用。
冷冻干燥:对受热易破坏或易吸潮物质采用。
3.测熔点的方法常用毛细管法及显微测熔仪。
4.操作方法:取通过氧化铝柱层析收集到的鲜黄色部分,经干燥后的盐酸小檗碱1/2小品大小的样品夹在两片载玻片之间,用手轻轻压碎样品,将样品对准电热板的中心孔洞上面放上桥式玻璃及园玻璃盖,调整显微镜对样品的焦距,加热,用可变电阻调节加热速度,当温度接近熔点时,应控制升温(1-2℃/分钟)。当
观察到样品的棱角开始熔时,为样品的初熔温度,结晶完全消失时,即熔点结束。 然后停止加热,稍冷用镊子除去园玻璃盖、桥玻璃及载片,将一厚铝盖放在加热板上加快冷却,而后清洗玻片,以备后用。
注:盐酸小檗碱加热至220℃左右被分解成红棕色小檗碱红缄,继续加热至285℃完全熔融。