C． 将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯 D． 培育该“超级小鼠”所用的受体细胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的体细胞
考点： 基因工程的原理及技术．
分析： 将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
解答： 解：A、“超级小鼠”是通过转基因技术的获得成功的，其中目的基因导入受体细胞用的是显微注射法，A正确；
B、将目的基因导入动物细胞最有效的方法是用显微注射仪将目的基因注射到受精卵中，B正确；
C、将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯，以提高实验的成功率，C正确；
D、培育该“超级小鼠”所用的受体细胞是小鼠的受精卵，而体细胞一般不能表达全能型，不适合作受体细胞，D错误． 故选：D．
点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力． 13．（1.5分）下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（） A． 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B． 限制性核酸内切酶的活性受温度的影响 C． 限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D． 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取
考点： 基因工程的原理及技术．
分析： DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．其中限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种．
解答： 解：A、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，因此一种限制酶只能识别特定的碱基序列和切割一定的位点，A正确；
B、酶活性通常受温度和PH值的影响，B正确；
C、限制性核酸内切酶指能识别和切割DNA，C错误；
D、限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化出来的，D正确． 故选：C．
点评： 本题比较简单，属于考纲中识记层次的要求，着重考查了限制酶的分布、特异性及作用特点等方面的知识，考生只要识记该方面的知识即可解题． 14．（1.5分）基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC
﹣．根据图示判断下列操作正确的是（）
A． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C． 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D． 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
考点： 基因工程的原理及技术．
分析： 由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列．要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口．
↓
解答： 解：限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣，限制酶II的识别序列和切点是﹣↓
GATC﹣，可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端．据题图可知，目的基
↓
因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣和限制酶II的识别序列和切点是﹣↓
GATC﹣，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来．质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列；如果用限制酶II切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶I切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA． 故选：D．
点评： 本题考查基因工程限制酶相关知识，意在考查考生的识图和理解能力，解题的关键是理解基因表达载体构建的过程． 15．（1.5分）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，这种蛋白质基因如在转基因技术中利用，所起的作用最可能是（） A． 促使目的基因成功导入宿主细胞中 B． 使目的基因的成功导入容易被检测出来 C． 使目的基因在宿主细胞中更容易复制 D． 使目的基因更容易成功表达
考点： 基因工程的原理及技术．
分析： 标记基因的作用是用于检测目的基因的导入，荧光蛋白也具有相应的作用，即标记基因和目的基因一起，如果细胞表达出荧光蛋白，则说明目的基因已经进入细胞． 解答： 解：A、促使目的基因导入宿主细胞中是运载体的功能，A错误； B、发光蛋白可以作为标记，检测目的基因是否导入受体细胞，B正确； C、促使目的基因在宿主细胞中复制是运载体的功能，C错误； D、发光蛋白不能促使目的基因的表达，D错误． 故选：B．
点评： 本题以发光蛋白为素材，考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能将标记基因与荧光蛋白进行类比，得出正确结论的能力． 16．（1.5分）质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内．质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功．
外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点正确的一组是（） 细胞在含氨苄青霉素培养基上生长情况 细菌在含四环素培养基上的生长情况 ① 能生长 能生长 ② 能生长 不能生长 ③ 不能生长 能生长
A． ①是c，②是b，③是a B． ①是a和b，②是a，③是b C． ①是a和b，②是b，③是a D． ①是c，②是a，③是b
考点： 基因工程的原理及技术．
分析： 由图可知，a是抗氨苄青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因结构被破坏，细菌无抗氨苄青霉素能力．将细菌放入含有氨苄青霉素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活．b是抗四环素基因，如果外源基因插入到b中，抗四环素基因结构被破坏，细菌无抗四环素能力．将细菌放入含有四环素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活．
解答： 解：第①组中细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏．说明了外源基因插入位置使c；
第②组中细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏．说明了外源基因插入位置是b； ③细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏．说明了外源基因插入位置是a． 故选：A．
点评： 本题考查了基因工程的相关内容，意在考查学生对标记基因的生理功能的理解，能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系． 17．（1.5分）植物细胞工程常采用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交等．这些技术的理论基础是（） A． 植物细胞能进行有丝分裂 B． 植物细胞的结构是完整的 C． 植物体的生命活动受激素调节
D． 植物细胞具有全能性
考点： 植物组织培养的概念及原理．
分析： 本题主要考查植物组织培养和植物体细胞杂交的知识．
1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性．
2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株．植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性．
解答： 解：植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，因此植物组织培养和植物体细胞杂交等技术的理论基础是植物细胞具有全能性，ABC错误，D正确． 故选：D．
点评： 本题主要考查学生对知识的理解和记忆能力．生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能，全能性的基础是每个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体的全部基因．植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株． 18．（1.5分）下列关于单克隆抗体的叙述，正确的是（） A． 培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了动物细胞核的全能性 B． 将抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体也称为单克隆抗体 C． 用灭活的仙台病毒作诱导剂，得到两两融合的细胞均为杂交瘤细胞 D． 筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体
考点： 单克隆抗体的制备过程．
分析： 1、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体． 3、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备．
解答： 解：A、培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了细胞膜的流动性，并没有长成新个体，也没用核移植，不能体现动物细胞核的全能性，A错误；
B、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体，可能不止一种抗体，化学性质不单一，B错误；
C、两两融合的细胞有AA型、BB型、AB型，C错误；
D、筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体，D正确． 故选：D．
点评： 本题考查了制备单克隆抗体的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．
19．（1.5分）在动物细胞培养中，所培养的动物细胞大都取自（） A． 中龄动物器官 B． 老龄动物器官 C． 幼龄动物器官 D．中龄动物组织
考点： 动物细胞与组织培养过程． 分析： 动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．动物细胞培养利用细胞增殖的原理，胚胎或幼龄动物的器官、组织的细胞分裂增殖能力强． 解答： 解：幼龄动物的器官、组织或动物胚胎细胞的分裂能力旺盛，适宜进行动物细胞培养．
故选：C．
点评： 本题考查动物细胞培养的相关知识，考查学生对知识的理解和记忆能力．动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞． 20．（1.5分）如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（） A． 乳腺细胞的 B． 卵细胞的 C． 胃腺细胞的 D． 囊胚时期的胚胎细胞的
考点： 动物细胞核移植技术．
分析： 动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）．
解答： 解：1、乳腺细胞、胃腺细胞和囊胚时期的胚胎细胞都含有2个染色体组，经过核移植获得克隆动物．
2、卵细胞只含有1个染色体组，核移植后获得单倍体，对于绝大多数二倍体动物而言，单倍体不能存活． 故选：B．
点评： 本题考查核移植技术，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题． 21．（1.5分）在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（） A． 使动物组织分散为单个细胞进行培养 B． 去掉细胞壁成为原生质体 C． 去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D． 促进蛋白质水解为多肽
考点： 动物细胞与组织培养过程．
分析： 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖．所以在动物细胞培养时，首先要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，以分解组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞．
解答： 解：A、胰蛋白酶的作用是消化组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，应该使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，B错误；
C、植物细胞去掉细胞壁以后获得的是原生质体，动物细胞没有原生质体，C错误；
D、使用胰蛋白酶的目的是分解组织细胞间的物质，最终促进蛋白质水解为氨基酸，D错误．