2008-2009学年第一学期《生物工业下游技术》试题（A卷）答案
二、选择题（将正确的答案写在横线上，可选的答案个数不固定，每题全对3分，共30分）
1. 影响蛋白质与SDS结合的因素有( ACD )
A. 溶液中SDS单体的浓度 B. 聚丙烯胺凝胶的浓度
C. 样品缓冲液的离子强度 D. 二硫键是否完全被还原
2. 依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有 ( BC )
A. Na+ >Ca2+> Fe3+ B. Fe3+>Ca2+>Na+
C. Li+ < Na+ < K+ D. Li+ > Na+ > K+
3. 要使目的物从离子交换剂上解吸而被洗脱，采用方法有 ( ABCD )
A. 改变洗脱剂的pH B. 增加洗脱剂的离子强度
C. 往洗脱剂中添加特定离子 D. 往洗脱剂中添加一种置换剂
4. 下列表述正确的有 ( CD )
A. 无论是哪一类离子交换剂，其膨胀度都随着交联度的增加而下降
B. 低密度的离子交换剂具有优势
C. 总交换容量是指每克干介质包含的带电功能基团，它是个变质
D. 离子交换层析分辨率与系统的选择性，效率和容量因子有关
5. 亲和层析有效地洗脱策略有 ( BC )
A. 改变缓冲液的离子强度 B. 特异洗脱 C. 阶段洗脱 D. 改变缓冲液电性
6. 分析超离子主要应用方面有哪些( ABD )
A. 测定生物大分子的分子质量 B. 研究蛋白质、病毒的纯度估计
C.分离提纯多糖、核酸和蛋白质等 D.检测大分子构象变化
6. 分配系数Kd >1的情况有( BCD )
A. 亲和作用 B. 疏水作用 C. 吸附作用 D. 离子间的静电作用
7. 下面表述正确的有 ( ABCD )
A. 总柱床体积是凝胶经溶胀、装柱、沉降，体积稳定后所占据层析柱内的总体积
B. 外水体积是柱中凝胶颗粒间隙的液相体积的总和
C. 内水体积是存在于溶胀后的凝胶颗粒网孔中的液相体积的总和
D. 凝胶体积是凝胶颗粒固相所占据的体积
8. 阴阳离子盐析效果正确的有 ( AC )
A. 柠檬酸＞PO43－＞SO42－＞CH3COO－
B. 柠檬酸<PO43－<SO42－<CH3COO－
C. NH4+ ＞K+ ＞ Na+ ＞ 高价阳离子
D. NH4+ <K+ < Na+ <高价阳离子
9. 离心机转子的种类 (ABC )
A. 角式转子 B.圆盘转子 C. 区带转子 D. 分子转子
10. 蛋白质印迹的主要转移方法 ( BCD )
A. 扩散印迹 B.对流印迹 C. 真空印迹 D. 毛细管印迹
三. 简述题（5小题，每小题7分，共35分）
1.微生物发酵液的特性及改变发酵液的特性的方法。
1）目标产物浓度普遍较底，悬浮液中大部分是水;
2）组分复杂，含有细胞，细胞碎片，蛋白质，核 酸，脂类，无机盐等多种物质；
3）由于pH ,离子强度，温度等变化因素，分离过程易造成失活和污染现象；
4）性质不稳定，随时间变化。
1.迅速加工,缩短停留时间,
2.控制好操作温度和pH,
3.减少或避免与空气接触受污染的机会,
4.总体设计好各组分的分离顺序.
2.浓度极化产生的原因及如何降低浓度极化？
浓差极化是指在超滤过程中，由于水透过膜，因而在膜表面的溶质浓度增高，形成梯度，在浓度梯度的作用下。溶质与水以相反方向扩散，在达到平衡状态时，膜表面形成一溶质浓度分布边界层，它对水的透过起着阻碍作用.
通过改变诸如速度、压力、温度和料液浓度之类的操作参数，可以降低浓差极化效应。
3.简述离子交换法的一般步骤。
1．上样阶段，此时离子交换剂与平衡离子结合；
2．吸附阶段，混合样品中的分子与离子交换剂结合；
3．开始解吸阶段，杂质分子与离子交换剂之间结合较弱而先被洗脱，目标分子仍处于吸附状态；
4．完全解吸阶段，目标分子被洗脱；
5．再生阶段，用起始缓冲液重新平衡层析柱，以备下次使用。
4. 凝胶过滤分辨率及影响分辨率因素？
层析分离常采用分辨率（RS）来描述两种物质之间分离效果的好坏。分辨率定义为两个洗脱峰峰顶对映的洗脱体积之差比上两峰在基线上峰宽的和的平均值。
分离两种物质时分辨率取决于这两种组分的洗脱体积和峰宽。
而决定组分洗脱体积和峰宽的因素包括两种组分的分子大小，
凝胶柱的选择性和柱效。
5.简述亲和层析的分离过程。
1)选择合适的配体。
2)将配体固定在载体上，制成亲和吸附剂，而配体的特异性结合活性不被破坏。
3)当样品液进入亲和柱时，其中的特定生物分子与亲和吸附剂相结合，而被吸附在柱上。
4)未被吸附的杂质可随缓冲液洗掉。
5)用洗脱液将结合在亲和吸附剂上的特定生物分子洗脱下来。
四. 论述题（每小题15分，共15分） 请根据下游技术的一般工艺过程及它们的主要技术特点设计一套经济的且技术可行的提取纯化方案。（至少要涉及三种技术）
发酵液 提取 原材料：酵母 处理对象：酵母蔗糖酶
第一步：离心要沉淀。
第二步：破碎细胞。因为酵母蔗糖酶是胞内产物，所以要破碎细胞把酵母蔗糖酶释放出来，采用氨解法。 第三步：用氨解法抽提粗酶还含有大量杂质，需要进一步分离纯化，采用有机溶剂乙醇沉淀。
第四步：乙醇分级后的蔗糖酶仍含有许多杂质，这时用一些层析技术，如离子交换层析。
最后检测蔗糖酶纯度和得率。
2009-2010学年第一学期《生物工业下游技术》试题（A卷）答案.
二、选择题（将正确的答案写在横线上，可选的答案个数不固定，每题全对3分，共30分） Rs Ve2 Ve1(Wb1 Wb2)/2
1. 下游技术的生物原料可以是( ABCD )
A. 生物界自然产生的 B. 酶反应获得的
C. 动植物细胞组织培养的 D. 微生物菌体发酵的
2. 细胞浓度的间接测量方法有 ( ABC )
A. 核酸 B. 蛋白质 C. ATP D. 浊度法
3. 依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有 ( BC )
A. Na+ >Ca2+> Fe3+ B. Fe3+>Ca2+>Na+