B.在较高流动相速度时，反压降低。
C.采用径向流技术，不能在较小的柱床层高度使用较大的流动相速度。
D.可以线性地增加样品处理量。
4. 下列细胞破碎方法属于机械法的有( ACD )
A. 压榨法 B. 微波加热法
C. 高压匀浆法 D. 超声破碎法
5. 下列属于无机基质色谱填料的有 ( ABCD )
A. 可控孔径玻璃 B. 硅胶 C. 羟基磷灰石 D. 石墨
6. 动物细胞培养类型有 ( ABC )
A. 悬浮培养 B. 贴壁培养 C. 固定化培养 D. 包埋培养
7. 下列表述正确的有( BC )
A. SEC（疏水层析） B. IEC（离子交换层析）
C. AFC（亲和层析） D. HIC（凝胶过滤层析）
8. 生化分离技术特点( BCD )
A. 均一性的绝对性 B. 成分复杂 C. 含量甚微 D. 易变性
9. 下面表述正确的有 ( ABCD )
A. 总柱床体积是凝胶经溶胀、装柱、沉降，体积稳定后所占据层析柱内的总体积
B. 外水体积是柱中凝胶颗粒间隙的液相体积的总和
C. 内水体积是存在于溶胀后的凝胶颗粒网孔中的液相体积的总和
D. 凝胶体积是凝胶颗粒固相所占据的体积
10. 要使目的物从离子交换剂上解吸而被洗脱，采用方法有 ( ABCD )
A. 改变洗脱剂的pH B. 增加洗脱剂的离子强度
C. 往洗脱剂中添加特定离子 D. 往洗脱剂中添加一种置换剂
三. 简答题（5小题，每小题6分，共30分）
1. 目标产品分离对象特点及根据这些特点应该如何做？
1）目标产物浓度普遍较底，悬浮液中大部分是水; 1分
2）组分复杂，含有细胞，细胞碎片，蛋白质，核 酸，脂类，无机盐等多种物质； 1分
3）由于pH ,离子强度，温度等变化因素，分离过程易造成失活和污染现象； 1分
4）性质不稳定，随时间变化。 1分
1.迅速加工,缩短停留时间, 0.5分
2.控制好操作温度和pH, 0.5分
3.减少或避免与空气接触受污染的机会, 0.5分
4.总体设计好各组分的分离顺序. 0.5分
2. 膜的污染及其控制方法。
膜分离过程中随着操作时间的增加，膜透过流速的迅速下降，溶质的截留率也明显下降，这被称为膜 的污染。污染是由膜的劣化和水生物(附生)污垢所引起的。
（一）膜的劣化
由于膜本身的不可逆转的质量变化而引起的膜性能变化，有如下三类：
1．化学性劣化2．物理性劣化3．生物性劣化， 2分
（二）水生物（附生）污垢
由于形成吸着层和堵塞等外因而引起膜性能变化。 2分
防止污染应根据产生的原因不同，使用不同的方法。
（1）预处理法（2）开发抗污染的膜（3）加大供给液的流速 2分
3. 生物工程下游技术主要包括哪些技术？
沉淀分离 盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性沉淀、非离子聚合物沉淀等 1分 层析分离 凝胶层析、离子交换层析、疏水层析、反相层析、亲和层析等 1分 电泳分离 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦、双向电泳、毛细管电泳等 1分
离心分离 低速、高速、超速（差速离心、密度梯度）离心分离技术等 1分 膜分离技术 透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透等 1分 分类清楚1分
4. 色谱装置主要包括哪几部分及它们的作用。
由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统等四大部分组成。 1分
一、高压输液系统
高压输液系统由 溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置和压力表等组成。
1.溶剂贮存器 溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑料制成，容量为1-2 L，用来贮存足够数量、符合要求的流动相。
2.高压输液泵 其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小，因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过.
3. 梯度洗脱装置 梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分析时间的目的。 2分
二、进样系统
进样系统包括进样口、注射器和进样阀等，它的作用是把分析试样有效地送入色谱柱上进行分离。1分
三、分离系统
分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。主要作用是分离样品的。 1分
四、检测器
检测器是液相色谱仪的关键部件之一。对检测器的要求是：灵敏度高，重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温度和流量的变化不敏感等。 1分
5.动物细胞培养生物反应器有哪些，在设计上要考虑哪些因素。
①气升式细胞培养生物反应器
气升式生物反应器产生的湍流温和而均匀，剪切力相当小，反应器内没有机械运动部件，因而细胞损伤率比较低；同时由于采用直接喷射空气供氧，氧传递速率高；液体循环量大，能使细胞和营养成分均匀地分布于培养基中。 2分
②中空纤维管生物反应器
中空纤维培养技术的优点是无剪切、高传质、营养成分的选择性渗入, 使培养细胞和产物密度都可达到比较高的水平。 2分
③通气搅拌反应器
避免向培养基直接通气时气泡损伤细胞，没有移动部件，密封好，氧转换率较高，便于放大。 1分 ④流化床生物反应器 1分 ⑤无泡沫搅拌生物反应器 1分