细胞生物学(翟中和)笔记
?电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成象。
? CO 2临界点干燥法防止引起样品变形的表面张
力问题
一、 离心分离技术
?用途：于分离细胞器与生物大分子及其复合物
?差速离心：分离密度不同的细胞组分
?密度梯度离心：精细组分或生物大分子的分离
二、 细胞内核酸、蛋白质、
酶、糖与脂类等的显示方法
?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些
特殊基团特异性结合的特征，通过显
色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来
判断某种物质在细胞中的分布和含量。
Feulgen Staining
三、特异蛋白抗原的定位与定性
?免疫酶标技术
?免疫胶体金?免疫荧光技术：
快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限 （图）
?蛋白电泳(SDS-PAGE)
与免疫印迹反应(Western-Blot)
?免疫电镜技术：
?免疫铁蛋白技术
技术
应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等
四、细胞内特异核酸的定位与定性
?光镜水平的原位杂交技术
（同位素标记或荧光素标记的探针）
?电镜水平的原位杂交技术
（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）
?PCR技术
五、放射自显影技术
?原理及应用：
?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；