细胞生物学(翟中和)笔记
?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。
?步骤:
?前体物掺入细胞(标记:持续标记和脉冲标记)
———放射自显影
六.定量细胞化学分析技术
? 细胞显微分光光度术(Microspectrophotometry)
?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收,测定这些物质
(如核酸与蛋白质等)在细胞内的含量。
包括:
紫外光显微分光光度测定法
可见光显微分光光度测定法
? 流式细胞仪(Flow Cytometry)
?主要应用:
用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量;
测定细胞群体中不同时相细胞的数量;
从细胞群体中分离某些特异染色的细胞;
分离DNA含量不同的中期染色体。
一、细胞的培养
?动物细胞培养
? 类型:原代培养细胞(primary culture cell)
继代培养细胞(sub-culture cell)
? 细胞株(cell strain) 正常二倍体,接触抑制
? 细胞系(cell line) 亚二倍体,接触抑制丧失
?植物细胞
?类型: 原生质体培养 (体细胞培养)
单倍体细胞培养(花药培养)
? 非细胞体系(cell-free system)
二、细胞工程
?细胞融合(cell fusion)与细胞杂交(cell hybridization)技术
?单克隆抗体(monoclone antibody)技术 图
?细胞拆合与显微操作技术
?物理法结合显微操作技术(图1、图2)
?化学法结合离心技术
?制备核体(karyoplast)和胞质体(cytoplast)。
?其它技术
遗传分析(mutant, knock out, knock in)
对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈
对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈
第四章 细胞质膜与细胞表面