细胞生物学(翟中和)笔记
?间接免疫荧光标记技术
?在光镜水平用于特异蛋白质
等生物大分子的定性定位：
如绿色荧光蛋白(GFP)的应用
激光共焦扫描显微镜技术
（Laser Scanning Confocal Microscopy）
?原理
?应用：
排除焦平面以外光的干扰，增强
图像反差和提高分辨率(1.4—1.7)，
可重构样品的三维结构。
?相差显微镜（phase-contrast microscope）
将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞
?微分干涉显微镜（differential-interference microscope）
偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成
明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究
活细胞中较大的细胞器
?录像增差显微镜技术（video-enhance microscopy）
计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活
细胞中的颗粒及细胞器的运动
电镜与光镜的比较
主要电镜制样技术
? 超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备示意图
?负染色技术（Negative staining）与金属投影
染色背景，衬托出样品的精细结构
?冰冻蚀刻技术（Freeze etching） （技术示意图）
冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒
和膜表面结构。
快速冷冻深度蚀刻技术（quick freeze deep etching）
?电镜三维重构技术
电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的
具有重要应用前景的一门新技术。
电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振
分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology）
——主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。
?
扫描电镜
?原理与应用：