生物工程工艺综合性实验报告(5)

2019-01-12 16:29

2.从冰箱里取出丁醇上清液[A试管中倒入39ml(全部),B试管中倒入36ml(剩5ml,倒入离心管中在3500rpm下离心5min,上清液倒掉,用接种环挑去下部孢子,制片观察孢子形态)共75ml。倒入圆底烧瓶进行蒸馏。蒸馏出馏分62ml,(体积大约为总体积的4/5)将此馏分装于150ml的锥形瓶中,套上橡皮塞。 【蒸馏装置见图九、图十】 3.制片,用油镜观察芽孢形态。

先用接种环挑取上述二中处理过的芽孢于干净的载玻片上,置于酒精灯上固定,固定好后用孔雀绿染色,并在火焰上固定,固定过程中要滴加孔雀绿保持湿润,不能烤干,十分钟后用蒸馏水洗净,动作要轻,以免将菌体冲洗干净,再用番红复染,静置一分钟,在用蒸馏水洗净。滴加香柏油,置于载物台上,用油镜观察。【见图十一、十二】 6月10号

取蒸馏液0.5ml,加入0.2ml 2%的叔戊醇,在加60%的酒精定容至10ml,用玻璃棒搅拌均匀后,上气相色谱仪。分析图谱见附录 5)实验结果(见附录)

丁醇含量×20×V馏出液/V馏前液=0.1003×20×62/75=1.66g/100ml 6)实验结果分析

鉴于客观因素每组都相同,因此结果不同可能是主观原因,比如培养基成分漏加,错加,重复加;取样时所取菌种的量不同;观察时间和取样时间不同;观察时显微镜操作方式不同;制片操作手法不同;稀释倍数不同;调pH值时,有的加了NaOH,有的未加,加了的加的滴数不同等等。 (三)试验对动手能力培养的收获及试验中获得的经验教训建

这是我做的第一次为期这么长时间的的实验。在做实验前,我以为这会是一个很难做的实验,和以前那种半天就可以完事,做完实验然后两下子就可以将实验报告做完的实验不一样。但当我真的着手去做时才发现也没有那么难,都是我自己吓自己吧了。

不管难与易,在做实验前,一定要先把老师发的讲义大概看一遍,了解实验的大概方向,当老师讲解时一定要认真听,虽然老师分给我们四个人一个小组,

但是只有每个人都了解清楚了,我们的小组才能配合的更加默契,我们的速度才会更快,实验结果才会更加令人满意。这次实验让我体会到作为一个团队齐心协力,默契很重要。另外做实验时,一定要亲力亲为并且弄清楚每一个环节,弄明白。生物实验特别要注意操作,操作一定要规范,严格要求自己要用科学严谨的态度对待实验,因为生物实验与其他的化学实验物理实验不同特别要注意不能染菌,接种时一定要在无菌操作台进行,勤消毒灭菌。这次实验让我见识到了一些以前没有见过或不曾亲手操作过的仪器如生物传感器,摇床,气相色谱仪等等。增长的我许多见识及动手操作能力,希望下次还有机会做这样的实验。

附录

时间/h 吸光值 脂溶性色素 水溶性色素 总色素 0 48 54 0.214 1.405 1.619 68 72 90 96 112 1.072 0.681 0.034 0.336 0 0.833 0.832 0.561 0.620 0.802 0.577 0.574 1.342 2.184 0.034 1.169 1.409 1.135 1.962 2.981.756 3

吸光值 0号样 1号样 2号样 3号样 4号样 5号样 6号样 7号样 时间h 以蒸馏水为参照实验组 葡萄糖含量0.047 0.0445 0.0395 0.03 0.027 0.02350.02110.00945 5 5 0.515 1.310 1.742 0.79 1.132 1.664 4.792 2.96 0 18 23 41 48 64 71 90 g/ml

丙酮丁醇馏出液气相色谱图

峰号 峰名 保留时间 峰高 峰面积 含量 1 0.398 202.514 1190.450 0.0000 2 丙酮 1.590 2187.840 4124.950 0.0390 3 1.798 38.394 85.664 0.0000 4 乙醇 1.982 1491087.625 7747798.500 0.6363 5 叔戊醇 2.307 5998.846 11323.800 0.0000 6 2.523 142.500 213.200 0.0000 7 丁醇 3.848 5002.869 15155.700 0.1003


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