D.利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”
26.根据下面实验原理和材料用具，设计实验选择运载体——质粒，探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别。
实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。
材料用具：青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。
方法步骤：
第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标号1、2、3，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入1毫升蒸馏水、青霉素液和四环素液，并使之分布在整个培养基表面。
第二步：将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。
第三步：将接种后的三个培养皿放入37 ℃的恒温箱中培养24小时。 预期结果分析：
（1）设置1号的目的是_____________________， 出现的现象是____________________________ 。
（2）如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长，说明____________________________；
如果1、2号培养皿的细菌能正常生长，3号培养皿的细菌不能正常生长，则 说明____________________________ ； 如果1、3号培养皿的细菌能正常生长，2号培养皿的细菌不能正常生长，则 说明____________________________ ；
如果只有1号培养皿的细菌能正常生长，2、3号培养皿的细菌都不能正常生长，则 说明___________________________ _。
21答案：（1）对照 细菌能正常生长
（2）此细菌的质粒上既有抗青霉素基因也有抗四环素基因 此细菌的质粒上有抗青霉素基因但无抗四环素基因 此细菌的质粒上有抗四环素基因但无抗青霉素基因 此细菌的质粒上既无抗青霉素基因也无抗四环素基因
2012级高二第二学期生物自习考试 一
班级 学号 姓名 成绩
1．下列所示的黏性末端是由几种限制性核酸内切酶作用产生的（ ）
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A．1种 B．2种 C．3种 D．4种 3．限制酶的作用实际上就是使DNA上某些化学键断开，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，断开的化学键是 （ ）
A．G与A之间的键 B．G与C之间的键
C．A与T之间的键 D．磷酸与脱氧核糖之间的键
8.用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因1.2kb，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb)上相应的E—F区域 (0.2kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2 （ ）
A．大小为4.7kb B．大小为4.9kb C．能被E但不能被F切开 D．能被F但不能被E切开
10．限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法错误的是（ ） A.在相同的DNA分子中a酶的识别位点一般明 显要比b酶多
B.能被a酶识别并切割的序列也能被b切割 C.a酶与b酶切断的化学键相同
D．将大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新 连接后的DNA片段不一定全都能被b切割
12．与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是 ( )
A．反转录酶 B．RNA聚合酶 C．DNA连接酶 D．解旋酶
14．下图表示两种限制性核酸内切酶识别DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA进行切割的示意图，请回答以下问题：
(4)由图解可以看出，限制酶的作用特点是：
_______________________________________________________________________。 1．下列目的基因的方法中需要模板链的是（ ）
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因
③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.②③
2. 科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉
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花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导人棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株，有了抗虫能力。由以上过程推知，作为目的基因的运载体应其备的结构是
A． 目的基因、启动子 B.目的基因、终止子
C． 目的基因、启动子、终止子 D.目的基因、启动子、终止子、标记基因 8.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是（ ）
A.显微注射法 B.Ca+处理法 C.花粉管通道法 D.农杆菌转化法
9．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是 ?( )
A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法?
B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌?
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌?
D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长?
10.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ） A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C 将重组DNA分子导入原生质体
D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
11、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。 （4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是相同的。
（4）低 筛选 （5）氨基酸
12、图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点， ampR为青霉素抗性基因，tctR 为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。
据图回答：
（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所
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含有的连接产物是 ；
（3）在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。 12、（１）目的基因－载体连接物 载体－载体连接物 目的基因－目的基因连接物
分离纯化（每空２分，共８分）
（２）载体－载体连接物 目的基因－载体连接物 载体－载体连接物 （３）启动子 mRNA（４）EcoRI和BamHI（只答一个酶不给分）
3.细菌抗药性基因存在于 A．核区的DNA B． RNA C．质粒 D．小的直线型DNA
1.基因工程操作程序的核心步骤是基因表达载体的构建（对 ）
2.利用反转录法获取的目的基因在构建基因表达载体时，可以不另外添加启动子和终止子（错 ）
3.基因表达载体中的启动子和终止子决定着翻译的开始和结束（ 错 ） 4.将目的基因导入微生物细胞时，对受体细胞不需做任何处理（ 错 ） 5.DNA分子杂交是在分子水平上进行的目的基因的检测（ 对 ）
4．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp．Gly．Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是
A．促使目的基因导入宿主细胞中 B．促使目的基因在宿主细胞中复制 C．使目的基因容易被检测出来 D．使目的基因容易成功表达 6．基因工程中不会出现 ( )
A．DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来 B．限制性内切酶可用于目的基因的获取 C．目的基因必须有载体导入受体细胞 D．人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶 7、下列哪项不是基因工程技术 ( )
A．基因转移 B．基因扩增 C．基因检测 D．基因表达
5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编号的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越多，越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙
述正确的是（ ）
A过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目录基因组测序
B将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白， C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 解析 因为一种氨基酸可能对应多种密码子、真核生物体内的基因含有内含子等因素，导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，所以人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A选项错误；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多，抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相
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连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B选项正确；农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的最常用方法，不是为了筛选含有标记基因的质粒，C选项错误；应用DNA探针技术，可以检测转基因植物中目的基因的存在，但不能完成对目的基因表达的检测，D选项错误。
7．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 ( )
A．大肠杆菌 B．T4噬菌体 C．酵母菌 D．质粒DNA
8． 已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能____ ____，也不能____ ____。 (4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用____ ____与______ __进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是________________________。
8.（3）复制 合成S基因的mRNA
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清 （5）相同 表达蛋白质所用的基因相同
9.科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。其过程大致如图所示：
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