（2）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA的_________________________ _______特点。含有Bt基因的Ti质粒导入棉花细胞是否可以稳定维持和表达其遗传特性，必须进行检测与鉴定。检测目的基因是否导入成功可以检测Bt基因是否转录出了mRNA，这是检测目的基因是否发挥功能作用的 。检测方法
是 。
（3）最后检验培育的棉花是否抗虫，
常用的方法是 。 9、（2）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞的染色体DNA上 第一步
从转基因棉花细胞内提取mRNA，用标记的目的基因作探针与mRNA杂交，如果显示出杂交带，则表明目的基因转录出了mRNA
（5）用培育的棉花的叶等器官喂食害虫，观察害虫的生活情况
7.继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。
（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入_____中，原因是_____________ 。 （3）通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的_______ 细胞中特异表达。 （5）膀胱生物发生器比乳腺生物反应器有什么优点？
答案：（1）显微注射
（2）受精卵（早期胚胎）；受精卵（或早期胚胎）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达 （3）DNA分子杂交 （4）膀胱上皮
（5）优点：收集产物蛋白比较容易，不必对动物造成伤害。从动物一出生就收集产物，不论动物的性别和是否正处于生殖期。最显著的优势在于从尿中提取蛋白质比在乳汁中提取简便、高效。
2、抗病毒转基因植物成功表达后，以下说法正确的是( ) A．抗病毒转基因植物，可以抵抗所有病毒
B．抗病毒转基因植物，对病毒的抗性具有局限性或特异性
C．抗病毒转基因植物可以抗害虫 D．抗病毒转基因植物可以稳定遗传，不会变异
5、下列不属于基因工程方法生产的药品是（ ）
A.干扰素 B.白细胞介素—2 C.青霉素 D.乙肝疫苗 9、“工程菌”是指( )
A．用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系
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B．用遗传工程的方法把相同种类不同株系的菌类通过杂交得到新细胞株系 C．用基因工程的方法使外源基因得到高效表达的菌类的细胞株系 D．从自然界中选取的能迅速增殖的菌类
10、生产上培育无子番茄、青霉素高产菌株、杂交培育矮秆抗锈病小麦、抗虫棉的培育原理依次是( )
①生长素促进果实发育 ②染色体变异 ③基因重组 ④基因突变 ⑤基因工程 A．①②③④ B．①④③② C．①④②⑤ D．①④③③ 15、对种植转基因农作物利弊有激烈的争论，假设正方认为种植转基因农作物对人类是有利的，反方认为种植转基因农作物是有潜在风险的。下列观点中支持正方的是（ ）
A转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白 B转基因农作物的扩散会威胁生物的多样性 C推广种植抗虫棉可减少农药使用对环境的污染 D抗虫基因通过基因漂移而造成“基因污染”
17、根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: AATTC??G G??CTTAA
为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是 。
(5)基因工程中除质粒外, 和 也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 。
(2012·全国新课标·T40)【参考答案】
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (5)噬菌体的衍生物 动植物病毒
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱
2、蛋白质工程中目前已成功的是（ ）
A．对胰岛素进行改造，生产速效型药品 B．蛋白质工程应用于微电子方面 C．体外耐保存的干扰素 D．用蛋白质工程生产高产赖氨酸玉米
6、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境。根据以上信息，下列叙述正确的是（ ） A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质
C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因
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D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 8．下列属于抗真菌基因的是（ ）
A．蛋白质抑制剂基因 B．淀粉酶抑制剂基因 C．几丁质酶基因 D．Bt毒蛋白基因
9．科学家发现将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达，产生的干扰素的抗病毒活性为 10μg／ml，只相当于天然产品的十分之一，通过基因定点突变将第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果使大肠杆菌中生产的β一干扰素的抗病性活性提高到10μg／ml，并且比天然β一干扰素的贮存稳定性高很多。此项技术属于( )
A．细胞工程 B．蛋白质工程 C．胚胎工程 D．基因工程
11．如图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫植物的图解。请回答：
8
6
(1)在下列含有ATP和有关的酶的试管中，大量而快捷的获取Bt基因的最佳方案是如图所示中的( )
(2) 图中a过程要用到的酶是 。
（3）写出b过程表达式： 。
（4）在进行图中b过程时．由我国科学家独创的十分简便经济的方法是 ，此 外，也经常采用 法。若耍培育转基因绵羊，则此过程要用 的方法。
（5）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位索标记
的 作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是 。
(6)活化的毒性物质应是一种________分子，活化的毒性物质全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于________平衡的破坏而破裂。
(7)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究，这将对________、________和农业可持续发展产生巨大影响。
(8)胰岛素是治疗依赖型糖尿病的特效药物，但是天然胰岛素在人体内寿命只有几小时，重
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症病人每天得注射好几次药物，给病人增加了不便和痛苦。通过蛋白质工程改变胰岛素的空间结构，以延长胰岛素的半衰期，得到长效胰岛素；还可以在不改变胰岛素活性部位结构的前提下，增强其他部位的结合强度，使之难以被酶破坏，从而增强其稳定性。
①若要利用大肠杆菌生产上述长效胰岛素，需用到的生物工程有发酵工程、_______和________。
②用蛋白质工程生产的胰岛素，与天然胰岛素比较，显著的优点是________ 。
答案(1)D（2）限制性核酸内切酶 （1分）
(3)Bt基因
mRNA
原毒素
（4）花粉管通道法 农杆菌转化 显微注射 （5）杀虫晶体蛋白质基因（或Bt基因、目的基因） 让昆虫吞食抗虫棉叶子，观察害虫的存活状态 (6)多肽 渗透
(7)农业害虫防治 环境保护
(8)①发酵工程 基因工程 蛋白质工程 ②具有长效性
专题二 细胞工程
4、下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是( )
A．利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C．多倍体植株的培育需经过如上图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 5.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( ) A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
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2．以下不能说明细胞全能性的实验是 （ ）
A．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B．紫色糯性玉米种子培育出植株 C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D．利用番茄叶子培育出植株 4．下列关于植物组织培养的叙述，正确的有（ ）
①培养对象只能是细胞 ②目的一定是为了得到植株 ③培养过程需要某些植物激素 ④单倍体育种用到了植物组织培养技术 ⑤植物组织培养的全过程需要照光 A．①② B.①②③ C.③④ D.①②③④⑤ 11.愈伤组织的细胞类型和愈伤组织分化后形成的结构分别是 （ ）
A 薄壁细胞、外植体 B. 厚壁细胞、胚状体 C.薄壁细胞、胚状体 D. 厚壁细胞、外植体
12.组织培养出来的植物一般很少有植物病毒危害，其原因在于 （ ） A．在组织培养过程中经过了脱分化和再分化，进行的是快速分裂和分化 B．人工配制的培养基上，植物病毒根本无法生存
C．进行组织培养用的材料是刚分裂产生的茎尖、根尖或芽尖 D．接种组织培养之前进行了严格的消毒处理
13.右图示某植物的培育过程，请据图判断下列说法中错误的是 （ ） A．A→F不能体现细胞的全能性 B．C中是高度液泡化的薄壁细胞 C．植株A和F中的染色体组数不同 D．植株F一般不能直接应用于生产
1、 植物体细胞杂交能解决不同种植物之间由于生殖隔离而不能进行有性杂交的问题。植物
体细胞杂交过程不涉及( )
A．使用限制性内切酶 B．使用纤维素酶和果胶酶
C．诱导两种不同的细胞融合 D．选择利于杂种细胞分裂和分化的培养基 7、下列过程中，不发生融合的是 ( )
A、植物体细胞杂交 B、受精过程 C、氧进入细胞中的线粒体 D、效应B细胞产生抗体
8、将若干番茄和马铃薯的原生质体混合，用聚乙二醇处理后，转移到培养基上培养，使原生质体再生出细胞壁。这时在培养基上的细胞类型有（ D ）
①番茄细胞 ②马铃薯细胞 ③番茄－马铃薯细胞 ④番茄－番茄细胞 ⑤马铃薯－马铃薯细胞
A.①②③ B.③④⑤ C.①②④⑤ D.①②③④⑤
一选择题
1．A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如右图所示（仅 显示细胞核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过 组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是 （ ） A．二倍体；基因型是DdYyRr
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