《饲料分析与饲料质量检测技术》课程实验指导
实验十 饲料干物质离体消化率测定
一、实验目的:
通过对饲料干物质离体消化率的测定,判别饲料原料如鱼粉等的掺假。 二、消化酶液的制备
肠道消化酶提取方法:常规解剖取出鱼的肠道和肝胰脏,去除脂肪和肠道内容物后,分别称取肠道和肝胰脏,按照肝胰脏、肠道重量的10倍量取pH7.4、0.2mol/L的磷酸缓冲液,用玻璃匀浆器进行匀浆(冰浴中)。匀浆液在3500r/min冷冻离心20min,取上清液作为粗酶提取液,冰箱冷冻保存备用。 三、实验步骤
? 分别取过80目标准筛的饲料样品0.2000g于20ml带塞试管中,加入pH7.4、0.2mol/L的磷酸缓冲液15ml,分别加入消化酶液5ml。
? 在28 ℃的生化培养箱(或水浴锅)中培养、摇床以50次/min振摇进行酶解。 ? 水解时间控制6~8小时。过滤(滤纸先在105 ℃下烘干、衡重后称重),并用28 ℃水洗2~3次,得滤渣。
? 滤渣在105℃下烘干、衡重后分别称重。
? 也可将滤渣(连同滤纸)和饲料样品(在相同温度下烘干)按照粗蛋白质测定方法测定蛋白质含量。 四、计算方法
干物质消化率=(消化前饲料干物质重-消化后饲料干物质重)/消化前饲料干物质重
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