痢疾杆菌的分离与鉴定
濮阳市疾病预防控制中心
许银怀
第一节
概 述
? 志贺菌属(Shigellae)细菌又称痢疾杆菌, 引起人类及灵长类动物细菌性痢疾。
? 1899年由日本人志贺首先发现。
? 全球每年感染人次约为1.65亿,死亡110万,发病率、死亡率居感染性腹泻之首位。
? 发展中国家发病率较高,如阿根廷990.6/10万、印度972.3/10万;发达国家相对较低,如美国6~12/10万、德国2.7/10万、法国0.3/10万;我国上世纪50~80年代发病率在46.37~1018.93/10万之间。
? 近20年痢疾发病率在法定传染病中由第一位降至第三位,但在卫生状况不良的地区,发病率仍居高不下。
? 人群对细菌性痢疾普遍易感,各年龄组均可受到感染,5岁以下儿童发病率最高。
? 据估计,在临床就诊的腹泻病人中的5%~15%是志贺菌引起的,而因腹泻死亡病例中有75%是志贺菌感染造成的。
? 发展中国家福氏志贺菌最常见,发达国家以宋内志贺菌为主。美国
宋内志贺菌>75%,但在男-男性行为人群仍以福氏志贺菌常见。 ? 鲍氏志贺菌最先在印度发现,除印度次大陆地区较为常见外,其它地区较为少见。
? 细菌性痢疾发病有明显的季节性,发病高峰为夏秋季,通常在7~9月份。
细菌性痢疾防治仍需探索、研究内容:
? 细菌性痢疾在不同地区、不同人群的发病强度、分布特征、病原学特点缺乏全面、准确的数据;
? 缺乏快速、简便的病原学诊断方法,细菌性痢疾漏诊和误诊现象普遍;
? 志贺菌耐药性谱的不断扩大,细菌性痢疾抗菌治疗难度加大; ? 洗手、母乳喂养、安全饮水、粪便无害化处理等行之有效的干预措施的落实需要强化;
? 目前所用痢疾菌苗免疫保护效果仍需进一步评价。 第二节
病 原 学
一、抗原分类
志贺菌属细菌有菌体(O)抗原,某些新分离菌株有表面(K)抗原。
(一) 菌体(O)抗原
1.型特异性抗原:多糖,光滑型菌株主要抗原;分 A、B、C、D 4个群及35个抗原型。
2.群特异性抗原:光滑型菌株次要抗原,主要存在于B群,籍此将菌型分
为多种亚型。
(二)表面(K)抗原
? 常在新分离的A、C、D群各血清型及B群的2a型、6型细菌中出现。
? K抗原存在时,可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝集;需经100℃30分钟加热破坏后露出菌体抗原,与相应的免疫血清发生凝集。
二、血清分群
(一)A群(志贺痢疾杆菌):有12个血清型;具有K抗原菌株可阻碍O抗原的
凝集;在我国常见的为2型(又称司密斯杆菌),1型较少见,其余各型更为罕见。
(二)B群(福氏痢疾杆菌)
? 具有型、群抗原;型抗原存在于同型菌株中;群抗原有多种,存在于B群各菌型中。
? 近年1C(I:7)、2b(Ⅱ:3,4;7)、3c(Ⅲ:6)、4c(Ⅳ:7,8)及4型(Ⅳ:-)等新型菌株出现。
? 目前有6个血清型,(14个亚型及2个变种)。 (三)C群(鲍氏痢疾杆菌):18个血清型。
(四)D群(宋内痢疾杆菌):仅一个血清型(Ⅰ、Ⅱ相);Ⅰ相(光滑型菌落)多从急性期感染病人标本中分离;Ⅱ相亦称R型(粗糙型菌落)常从慢性患者或带菌者检出。
三、属间抗原关系
志贺菌属与埃希菌属的O抗原关系非常密切,有近半数的菌型与大肠埃
希氏菌的某些O抗原完全相同;相同抗原菌属间存在血清交叉凝集反应。
表1 志贺菌属与大肠埃希菌的O抗原关系
O抗原完全相同 志贺菌属 大肠埃希菌 A2 A3 A4 A5 A12 B2b B3a B4b B5 112ac 124 3588-51 58 152 147ab 5444-80 135 129 志贺菌属 A1 A2 A3 A4 A6 A7 A8 A9 A11 O抗原部分相同 大肠埃希菌 志贺菌属 1,120 149 164 88,159 130 121 38,23 144 29 C1 C2 C3 C4 C6 C9 C10 C12 C13 大肠埃希菌 2,(50) 87ab,96 85 149 76 102 105ac 7 28ac,98 C1 C4 C5 C7 C8 C11 C14 Cl5 149 53 79 4838-69 143 105ab 32 112ab A12 3 1,2,13,16,1719, 6269,73,3438-51 C15 C16 C17 C18 83 47 124 29,可能 B群 注: D群宋内菌与类志贺邻单胞菌O17抗原相同。 四、菌群分布与变迁
? 菌群分布与变迁因国家、地区、年份不同而异。
? 40年代前A群是优势流行菌,60年代初几乎销声匿迹,但1969-1970年突然在中美地区暴发,1972-1978年又在南亚的孟加拉国连年发生流行,继之印度、斯里兰卡、马尔代夫、尼泊尔、不丹、缅甸、泰国等地区和国家受到侵袭。
? D群从60年代起在许多工业发达国家跃居首位。
? 国内过去流行菌型为2a为主;近年来4、4c、5b、1a等菌型呈上升趋势;城市D群为上升态势。
? 我国个别地区发现A1型和C18型局部暴发流行。
五、溶原性
? 噬菌体对相应的细菌具有特异性裂解作用,温和噬菌体DNA侵入宿主细胞后,整合于宿主细胞的染色体DNA上,称为前噬菌体; ? 前噬菌体与宿主细胞的染色体同时复制,这个过程称为溶原化; ? 被感染的细菌称为溶原性细菌。