痢疾杆菌的分离与鉴定课件 - 图文(2)

2019-03-21 18:51

? 溶原性细菌对于相同的噬菌体具有免疫力,并获得一些新的性状,称为溶原性转换。

该转换可导致福氏志贺菌型抗原和群抗原发生广泛的变异。

六、变异性

(一) S-R变异

? 志贺菌属菌落可由光滑型变异成为粗糙型(S-R变异),并常伴有生化反应、抗原构造和致病性的变异。

? 在慢性痢疾病人或恢复期病人体内,菌株可变异成为不典型菌株。部分变异菌株可通过10%的胆汁肉汤培养发生返祖,成为典型菌株。因而在分离这类细菌时注意要反复多次地检查。 (二) 抗原变异(溶原性转换)

? 根据溶原性转换变种和细胞壁多糖免疫化学分析,福氏志贺菌除 6型菌外其它型、亚型以及变种都是由一个种所产生的许多溶原性的变种。

? y变种是非溶原性的前体型,当被六种不同的噬菌体溶原化后, 可以变为各型福氏菌的a亚型或x变种,这是第一次溶原化; ? 一次溶原化的培养物,还可以发生第二次溶原化,变为各型福氏菌的b亚型。

? 福氏型特异性抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和群7,8抗原,均以y变种群3,4抗原多糖为前体型,经温和噬菌体溶原性转换而来。

? 噬菌体(Φ)7,8溶原化的结果是使群7,8抗原变为x变种,同时群3,4抗原成为隐蔽状态;

? 前体型经ΦⅡ、ΦⅤ、ΦⅠ、ΦⅣ溶原化结果,则是相应型抗原的产生,分别变为2a、5a、1a、4a等型。其中x变种、2a型和5a型还可以经第二次的溶原化,变为2b型和5b型。

? 群6抗原是群4抗原乙酰化(ΦⅢ,6溶原性转换)所致;型Ⅲ抗原为群3,4复合抗原乙酰化的结果。福氏1a型和4a型的群4抗原乙酰化后出现群6抗原,变为1b型和4b型,但此时型Ⅲ抗原成为隐蔽状态,仅当型抗原Ⅰ、Ⅳ消失时显现。

? 宋内志贺菌Ⅰ相抗原受控于一个140Mda大质粒,若质粒丢失,Ⅰ相抗原不能合成,菌则从Ⅰ相转变为Ⅱ相。 (三) 毒力变异

志贺菌的2型肠毒素(ShET-2)、粘附性、侵袭力、胞内繁殖、细胞间扩散等活性编码基因均存在于一个140Mda的质粒上,其表达受染色体上多个基因的调控。该调控基因的变异或大质粒的丢失,均可造成毒菌株的毒力减弱或消失。

七、致病性

(一)侵袭力:菌毛-有利于菌粘附至肠粘膜

(二)毒 素: ↗ 通透性增加 内毒素 → 局部 → 作用于肠壁

↘ ↘ 粘膜炎症、溃疡 全身 → 内毒素血症

外毒素(A群1型) → 与内毒素协同作用

↘ 加重局部和全身症状

? 志贺菌具有抗酸性,能顺利通过胃酸屏障进入肠道,侵袭于结肠粘膜上皮细胞,引起炎症反应。

? 有研究表明最小感染剂量为10个CFU。

? 产生的SHET1肠毒素是染色体编码毒素,主要见于福氏志贺菌;SHET2是质粒编码毒素,志贺菌和侵袭性大肠杆菌均能产生。 ? 痢疾志贺菌可产生志贺毒素(ST),为染色体编码,由1个A亚单位和5个B亚单位构成,具有肠毒性、细胞毒性和神经毒性。

第三节 实验室分离

一、标本的采集和运送

(一) 标本的采集 腹泻病人粪便标本:

? 监测点人员发现疑似病人和腹泻病人后,立即发给病人洁净塑料袋,要求其接取自然排出的可疑粪便部分立即送检;

? 婴幼、儿童则让其父母协助其坐排于罩有干净塑料袋的痰盂内(要求勿混入尿液)。

? 用2个棉拭子分别在大便中可疑部分多点蘸取并旋转棉拭子使全部蘸满大便(约1-2克)。

? 将绵拭子插入装有Cary-Blair运送培养基的采样管中(注意培养基应埋住粪便拭子),手接触的棉签尾部在管口处折断丢弃。 ? 编号后将采样管置4℃冰箱或冷藏包中保存。

? 认真填写腹泻病人粪便采样表。

监测点/村医需配备和更换的监测材料: ? 腹泻病人粪便采样登记表。 ? 消毒棉签。

? 装有Cary-Blair运送培养基的采样管(4℃保存可备用半年)。 ? 采便塑料袋。

? 冷藏包(应每日更换冰排) 。

(二) 标本的运送

? 采集标本后应立即通知监测点运送标本人员,或每天分中午、下午两次送交实验室。

? 如当天晚上采集,最长保存时间最好是48小时内。


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