6、病毒的繁殖
1）病毒的繁殖没有个体生长的过程，只有两种成分的合成装配过程； 2）整个过程可分为五个阶段 ：吸附、侵入、增殖、装配和裂解。
A、吸附：
B、侵入： 动物病毒：
① 整病毒穿过细胞膜的移位方式； ②细胞的内吞功能；
③毒粒包膜与细胞质膜的融合；
植物病毒：通过因人为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆虫取食将病毒带入细胞。
有尾噬菌体：注射方式将噬菌体核酸注入细胞——通过尾部刺突固着于细胞；尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖，使细胞壁产生小孔；尾鞘收缩，核酸通过中空的尾管压入胞内，蛋白质外壳留在胞外；如果大量噬菌体在短时间内吸附于同一细胞上，使细胞壁产生许多小孔，也可引起细胞立即裂解，但并未进行噬菌体的增殖，这种现象称为自外裂解 C、病毒大分子的合成（增殖）
病毒利用宿主的生物合成机构和场所，使病毒核酸表达和复制，产生大量的病毒蛋白质和核酸。 D、病毒的装配与释放（裂解宿主细胞）
新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒，称做病毒的装配，亦称成熟（maturation）。 病毒的释放标志病毒复制周期结束
3）复制周期（replicative circle）或称复制循环：自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放到细胞
外的病毒复制过程。
4）烈性噬菌体（毒性噬菌体）和温和噬菌体：
烈性噬菌体：噬菌体侵入细胞后，短时间内连续完成吸附、侵入、增殖、装配和裂解这五个阶段而实现其
繁殖同时裂解宿主细胞的噬菌体。
温和噬菌体：噬菌体侵入细胞后，核酸整合到宿主染色体上和宿主同步复制，寄主细胞不裂解。此时， 该噬菌体被称为原噬菌体。 7、烈性噬菌体的一步生长曲线
（一）定义：可反映噬菌体生长的三个参数：潜伏期、裂解期和裂解量。 1）、潜伏期： 从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期 2）、裂解期； 随着菌体不断破裂，新噬菌体数目增加，直到最高值 3）、裂解量：每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。
实验过程：用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）；保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）；以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线；
8、溶源性细菌（lysogenic bacteria）:细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌称做溶源性细菌。
检查溶源菌的方法：将少量溶源菌与大量敏感指示菌混合，然后与琼脂培养基混匀后倒平板，能长出特殊菌落形态的为溶源菌。
第四章 微生物的营养
1、微生物的营养物质（种类，定义）。
营养：是指生物体从外部环境中摄取其生命活动所必需的能量和物质，以满足其生长和繁殖需要的一种生理机能。也可指微生物获得和利用营养物质的过程。 微生物的营养要素： 碳源、氮源、无机盐、生长因子和水 微生物营养的特点： 营养类型多，食谱广，胃口大、转化快
（一）碳源：提供微生物营养所需碳元素的营养源，构成微生物细胞核代谢产物中碳架来源的营养物质。 （二）氮源：提供微生物营养所需氮元素的营养源。
三种类型的供氮无机物：（NH4）2SO4 NH4NO3 KNO3
（三） 生长因子：一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简单的碳源或氮源自行合成的（小分子）有机物。必须由外界提供才能进行生长繁殖。
种类：氨基酸、维生素、碱基（核苷）、甾醇、直链脂肪酸、卟啉
补加前体、酵母膏、血清、麦芽汁、动植物汁液
（四）无机盐（矿质元素） 大量元素：需要量大于10-4mol/L 磷、硫、钾、钙、镁、钠、铁
微量元素：需要量小于10-6mol/L 铜、锌、硼、钼、钴、锰
（五）水
水是细胞维持正常生命活动所必不可少的，一般可占细胞重量的70－90%。 在微生物各种各样的生理活动中必须有水参加才能进行。 2、微生物的营养类型
（一）定义：指微生物生长所需要的碳源和能源的不同而划分的微生物类型。
1)、化能无机营养型(化能自养型)：能够从无机物氧化过程中获得能量，以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源生长。化能无机自养型只存在于微生物中，可在完全无机及无光的环境中生长。
利用的无机物有H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等还原性物质。种类：硝化细菌、硫细菌、氢细菌、铁细菌 2)、化能有机营养型（化能异养型）：以有机物为能源和碳源。分为细菌、真菌两大类。 腐生型(metatrophy)：可利用无生命的有机物(如动植物尸体和残体)作为碳源； 寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主机体内吸取营养物质,离开寄主就不能生存；
3）、光能无机营养型（光能自养型）：以光为能源，以CO2或碳酸盐作为碳源生长。种类：蓝细菌、藻类 4）、光能有机营养型（光能异养型）： 以光为能源，以简单的有机物作为供氢体，以CO2或有机物作为碳
源生长种类：红螺菌科的细菌
3、培养基
（一）培养基定义： 是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
（二）原则 1、目的明确：细菌VS真菌、实验室VS发酵生产、代谢产物VS菌体。
2、营养协调：水 碳源 氮源 P S K Mg 生长因子 3、物理和化学条件适宜： pH、渗透压、氧化还原电位
4、经济节约：以粗代精、以野代家、以废代好、以烃代粮、以纤代糖
碳氮比（C/N）：培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值。
细菌： C/N=5-10：1 真菌： C/N=10-20：1
营养要素： 碳源、氮源、无机盐、生长因子、水 （三）培养基种类：
1）、根据化学组成：天然培养基和合成培养基
天然培养基(complex medium)：以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成
合成培养基：是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined
营养物质 来源 主要成份 牛肉浸膏 瘦牛肉组织浸出汁浓缩而 富含水溶性碳水化合物、有机 成的膏状物质 氮化合物、维生素、盐等 蛋白胨 将肉、酪素或明胶用酸或 富含有机氮化合物、也含有一 蛋白酶水解后干燥而成的 些维生素和碳水化合物 粉末状物质 酵母浸膏 酵母细胞的水溶性提取物 富含B类维生素,也含有有机氮 浓缩而成的膏状物质 化合物和碳水化合物 medium)，这种培养基成分精确，重复性强，多用于实验室。
高氏一号培养基（淀粉硝酸盐培养基）－－放线菌：察氏培养基（蔗糖硝酸盐培养基）－－真菌 半合成培养基:由成分已知的物质和成分未知的天然物质配制而成的培养基。
如：马铃薯蔗糖培养基（PDA培养基）－－真菌
2）、根据物理状态：固体培养基、半固体培养基和液体培养基 固体培养基琼脂浓度；1.5％～2.0％；半固体培养基琼脂浓度；0.2％～0.7％
半固体培养基:在液体培养基上加进一定凝固剂,在液体培养基中如加0.5%左右琼脂,可以用来观察细胞运动的特征,鉴定菌种,测定抗菌素的效价等。
固体培养基:在液体培养基中加入1.5-2.0%琼脂。固体培养基为微生物的生长提供了一个营养表面,在这个表面生长微生物可形成单个菌落,用于微生物的分离,鉴定,计数,保管。
3）、根据培养基功能：基本培养基和完全培养基、选择性培养基和鉴别培养基
基本培养基：在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，称为基本培养基。 完全培养基：在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基。
选择性培养基：根据待分离微生物的特点，加入某种选择压力的培养基，用于从环境中富集和分离某种特
定功能的微生物。
鉴别性培养基 ：用于鉴别不同类型微生物的培养基特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特
征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。
实验室的常用培养基：
细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）； 放线菌：高氏1号合成培养基培养（ 100ppm重铬酸钾）； 酵母菌：豆芽汁培养基；
霉菌： 查氏合成培养基；PDA培养基 4、营养物质进入细胞的方式
? 简单扩散（Simple diffusion) ? 促进扩散（Facilitated diffusion） ? 主动吸收（Active transport）