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3. 溶出度 3.1 流动相的选择
沿用原标准溶出度项下色谱条件，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾600mg，无水磷酸氢二钠279mg，加水100ml溶解并稀释至1000ml）-乙腈（95：5）为流动相，流速为1.5～1.8ml/min；检测波长为210nm，柱温40℃。 3.2 系统适用性试验
取本品溶出液50μl，注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图，理论板数按*********计算不低于800，结果见图3.2.P.5.3-10。由图可见，本品主峰峰形较好，理论板数为137578，可以满足溶出度测定需要。 3.3 漏槽条件
取3倍处方量的*********原料，精密称定，分别加入1000ml水、0.1mol/L盐酸溶液、pH6.8磷酸盐缓冲液中，照溶出测定法2010版二部附录Ⅹ C 第二法进行试验，经30分钟时取样测定，计算溶出量，结果见表3.2.P.5.3-17。
表3.2.P.5.3-17 漏槽条件试验结果
溶 剂 项 目 溶出量（%） 水 101.5 0.1mol/L盐酸 89.99 pH6.8磷酸盐缓冲液 106.9 上述试验表明：水和pH6.8磷酸盐缓冲液符合漏槽条件，由于*********在水中极易溶解，溶出度的介质应首选水，因此选择水作为本品溶出度测定的介质。 3.5 辅料干扰试验
取处方量的空白辅料，照溶出度测定方法试验，精密量取50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见图3.2.P.5.3-11。由图可见辅料对本品的溶出度测定没有干扰。 3.7 转速的选择
参照原标准 3.8 线性范围试验
取*********对照品适量，精密称定，加水溶解并制成每1ml中含0.5mg*********的溶液，摇匀，精密量取0.8，0.9，1.0，1.1，1.2mL至10ml量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，精密量取50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表3.2.P.5.3-20。
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表3.2.P.5.3-20 溶出度测定线性试验结果
浓度（μg/ml） 峰面积 10.6 151288 31.8 438675 53.0 747130 74.2 1042728 106.0 1324296 以*********的峰面积(A)对*********的浓度(C)进行线性回归，线性回归方程为：y=295007X-144197（r=1.000，n=6）。试验结果表明，*********在0.01mg/ml～0.11mg/ml浓度范围内，线性关系良好。 3.9 回收率试验
分别精密称取三份10倍处方量的空白辅料，各加入50%、80%、100%处方量的*********原料（约相当于每片含*********25mg、40mg、50mg），充分混匀，各称取1片量三份，按照溶出度测定法（中国药典2010版二部附录X C第二法），经30分钟后取样，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取*********对照品适量，精密称定，加溶出介质溶解并稀释制成每1ml约含*********50μg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。取上述溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，计算测得量及回收率。结果见表3.2.P.5.3-21。
表3.2.P.5.3-21 溶出度测定回收率试验结果
加入量 浓度 （mg） 36.68 50% 35.07 37.68 44.33 80% 47.59 41.81 51.81 100% 51.38 54.81 （mg） 37.17 34.78 38.62 44.37 47.72 41.18 53.34 52.49 54.40 （%） 101.3 99.19 102.5 100.1 100.3 98.47 102.9 102.2 99.24 100.7 1.60 （%） （%） 测得量 回收率 平均回收率RSD 结论：试验结果表明，该方法准确度良好。 3.10 溶液稳定性试验
取溶出度测定项下供试品溶液，分别于0h、2h、4h、6h、8h、12h时，精密量取50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表3.2.P.5.3-22。
表3.2.P.5.3-22 溶出度测定供试液稳定性试验结果
时间（h） 0 2 4 6 8 12 RSD（%） 第 22 页 共 36 页
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峰面积 774556 773389 770950 759884 733603 696339 4.13 试验结果表明，本品供试液室温下6h内基本稳定。 3.11 溶出曲线及均一性
取本品三批小试样品（批号：100405，100406，100407）、中试样品（100511，100513，100515）以及上市样品，以水1000ml为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经5、10、15、20、30、45分钟时，取溶液6ml滤过，同时补加等量溶出介质；取续滤液作为供试品溶液。另取*********对照品适量，用溶出介质溶解并制备成每1ml约含有0.05mg*********的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以时间(min)为横坐标，溶出度(％)为纵坐标，绘制溶出曲线。计算本品与上市样品的相似因子f2：
结果见表3.2.P.5.3-23～表3.2.P.5.3-29，图3.2.P.5.3-13（附件7）。.
表3.2.P.5.3-23 溶出曲线及均一性（100405）
溶出度（%） 5min 10 min 15 min 20 min 30 min 45 min 1 50.13 88.29 109.3 110.5 110.4 110.5 2 48.37 85.50 107.9 108.7 108.8 108.7 3 57.66 89.93 110.6 110.8 109.8 111.3 4 60.90 94.43 103.6 107.6 107.7 107.1 5 51.14 89.18 105.4 108.9 108.8 107.1 6 54.87 88.29 97.15 95.61 94.91 108.8 平均(%) 53.85 89.27 105.7 107.0 106.7 108.9 RSD（%） 8.96 3.29 4.63 5.34 5.49 1.59 相似因子f2
62.74 表3.2.P.5.3-29 溶出曲线及均一性（上市样品）
溶出度（%） 5min 10 min 15 min 20 min 30 min 45 min 1 45.72 85.14 103.1 103.7 105.0 104.6 2 48.77 88.87 103.9 100.4 101.0 104.2 3 50.60 89.03 105.4 103.8 103.4 106.5 4 72.15 106.5 105.6 104.8 109.8 109.3 5 58.71 99.84 103.6 101.4 105.3 103.3 6 53.56 95.36 104.2 105.9 104.6 104.7 平均(%) 54.92 94.13 104.3 103.3 104.8 105.4 RSD（%） 17.35 8.53 0.96 2.01 2.75 2.07 试验结果表明：
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3.12 测定法
根据上述试验结果，拟定本品溶出度测定方法如下：
3.13 样品测定
取本品和上市品，测定溶出度，结果见表3.2.P.5.3-30。
表3.2.P.5.3-30 溶出度测定结果
样品批号 溶出度（%） 100405 102.8 100406 98.45 100407 106.9 ********* 105.6 结论：本品和上市样品的溶出度均符合规定。
3.2.P.5.3.5 含量测定
采用HPLC法测定。 1. 仪器设备与试剂
见有关物质项下。 2. 流动相的选择
见有关物质项下。 3. 检测波长确定
见有关物质项下。 4. 辅料的干扰试验
见有关物质项下。 5. 溶液制备方法
对照品溶液的制备：取*********对照品适量，精密称定，加水溶解并制成每1ml中约含10mg*********的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于*********250mg），置25ml量瓶中，加水适量，超声处理10分钟，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液为供试品溶液。 6. 线性关系考察
取*********对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml约含20mg的溶液，精密量取1、3、5、7、10ml分别置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以*********的主峰面
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积(A)对浓度(C)进行线性回归，结果见表3.2.P.5.3-35。
表3.2.P.5.3-35 含量测定线性试验结果
浓度（mg/ml） 峰面积 2.02 1988958 6.05 6055915 10.08 9676501 14.11 13619027 20.51 16837358 结果表明：*********在2.02mg/ml～20.51mg/ml的范围内，线性关系良好，回归方程：y=3725991x-1542422（r=1.000，n=5）。 8. 回收率试验
分别精密称取三份10片处方量的空白辅料，各加入80%、100%、
120%*********原料（约相当于每片含*********40mg、50mg、60mg），充分混匀，各称取5片量三份制成供试品溶液；另取*********对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml约含*********10mg的溶液，作为对照品溶液。取上述溶液，照含量测定项下方法测定，计回收率。结果表3.2.P.5.3-37。
表3.2.P.5.3-37 回收率试验测定结果
浓度 80% 加入量（mg） 测得量（mg） 164.0 186.2 173.3 219.8 100% 201.1 211.7 230.8 120% 226.1 223.0 164.7 189.2 175.1 221.9 203.0 212.0 232.1 226.8 224.2 回收率（%） 100.4 101.6 101.0 100.9 101.0 100.2 1005 100.3 100.6 100.7 0.46 平均值（%） RSD(%) 结论：结果表明，本法准确度良好。 9. 重复性试验
取本品20片（批号100405），研细，取细粉适量，按供试品溶液制项下的方法制成6份供试品溶液。另取*********对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释至刻度，制成每1ml中约含10mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。依法测定，计算*********的含量，结果见表3.2.P.5.3-38。
表3.2.P.5.3-38 重复性试验结果
序号 1 2 100.5 3 100.6 4 100.7 5 100.7 6 100.7 均值（%） RSD（%） 100.6 0.12 含量（%） 100.4 第 25 页 共 36 页