等。
4 试剂及配制：
（1）盐酸溶液：1：3（V:V） （2）硫酸溶液：1：3（V:V）
（3）氨水溶液：1：1（V:V）
（4）草酸铵溶液：42g草酸铵溶于1000ml水。
（5）甲基红指示剂：0.1g甲基红溶于100ml乙醇(95%)。 （6）浓硝酸
（7）氨水溶液：1：50（V:V） （8）10％醋酸溶液
（9）0.02 mol/L高锰酸钾标准液：
配制：称取0.64g高锰酸钾溶于1000ml蒸馏水中，煮沸15分钟，冷却置于暗处保存2周。玻璃坩埚过滤于干燥的棕色瓶中。
C（高锰酸钾）／mol/L 0.1 0.05 0.02 （配制）高锰酸钾／ g 3.2 1.6 0.64 (标定)基准草酸钠／g 0.1 0.1 0.1
标定：称取基准草酸钠（105℃干燥两小时，存于干燥器中）0.1g，准确至0.0002g，溶于50ml水中，再加硫酸（1：3）10ml，将此溶液加热至75－85℃，用配制的高锰酸钾溶液滴定，溶液呈现粉红色且1分钟不退色为终点，滴定结束时，溶液温度在60℃以上。同时做空白试验。 计算：C＝m/[(V1-V2)*0.0670]
式中：C为高锰酸钾标准溶液浓度（mol/L）
m为基准草酸钠的质量(g)
V1为滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)
V2为空白试验滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)
0.0670为与1.00ml高锰酸钾标准溶液［C＝1.000 mol/L］相当的以克表
示的草酸钠的质量。
5 测定步骤：
（1）试样的制备：取具有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目，装入密封容器中（防止试样成分的变化或变质）。
（2）试样的分解
① 准备坩埚：将坩埚洗净烘干，在550℃灼烧1小时，冷却、称重、记号。 ② 称样、低温碳化：称取试样2-5g于坩埚中，准确至0.0002g，在电炉上低温碳化至无烟为止。
③ 高温灼烧：将碳化好的试样移入马福炉中550℃灼烧3小时。
④ 溶解灰分：用40ml盐酸溶液（1：3）反复洗涤坩埚，将灰分无损的转移至烧杯中，加入浓硝酸5ml，盖上表面皿，煮沸约3分钟。
⑤ 将分解好的溶液过滤至100ml容量瓶中，并用水洗涤烧杯一并滤至容量瓶中，冷却至室温后定容，摇匀。即为试样分解液。
（3）草酸钙沉淀的形成及洗涤：
① 草酸钙沉淀的形成： 用移液管准确吸取10ml分解液于烧杯中,加入蒸馏水50ml,滴加甲基红指示剂2滴,使溶液呈粉红色,滴加1:1的氨水至溶液呈黄色(PH=5.6),再滴加10%醋酸至溶液又呈粉红色(PH=2.5-3.0)。将上述溶液在电炉上煮沸，在微沸的状态下慢慢滴加草酸铵溶液10ml，并不断搅拌（注意：如果溶液变为黄色，应补加醋酸溶液至粉红色）。煮沸数分钟后，放置过夜使沉淀陈化。
② 沉淀的收集和洗涤：用中速的定量滤纸过滤上述溶液收集沉淀，然后用1：50的氨水洗涤沉淀6－8次，至无草酸根离子为止。（用试管接取滤液2－3ml，加1：3硫酸溶液数滴，加热至80℃，加高锰酸钾溶液1滴，溶液呈微红色，且30分钟不退色）。再用蒸馏水洗涤2次。
（4）沉淀的溶解与滴定
① 将沉淀和滤纸转移至原烧杯中，加1：3硫酸溶液15ml，蒸馏水50ml，加热至75－80℃，立即用0.02 mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色，且30秒不退色，即为滴定终点。记录消耗的高锰酸钾标准液的体积。
（5）空白的测定：在干净的烧杯中加滤纸一张，1：3硫酸溶液15ml,蒸馏水50ml，加热至75－80℃，立即用0.02 mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色，且30秒不退色即可。
6 计算结果
（1）计算公式：Ca(%)=(V-V0)*C*0.02/m*(V1/V2)*100 式中：V－滴定试样消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml） V0-空白测定时消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml） C－高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/L） V1－试样分解液的体积（ml）
V2－形成沉淀时吸取的分解液的体积（ml）
m-试样的质量（g）
0.02-与1.00 ml1.000 mol/L的高锰酸钾标准溶液相当的钙的克数。 （2）重复性：每个样品取两个平行样进行测定，如果相对平均偏差在允许的范围内，以其算术平均值为结果。
含钙量在5％以上时，允许相对平均偏差为3％；含钙量在5％－1％时，允许相对平均偏差为5％；含钙量在1％以下时，允许相对平均偏差为10％。
（3）注意事项
① 高锰酸钾标准溶液的浓度不稳定，至少1个月标定一次。 ② 每种滤纸的空白值不同，至少每盒滤纸应作一次空白实验。
③ 洗涤草酸钙沉淀时，必须沿滤纸边缘向下洗，使沉淀集中在于滤纸中心，以免损失。每次洗涤过滤时，都必须等上一次洗液完全滤净后再加，每次洗涤不得超过漏斗体积的2／3。
二 饲料中总磷的测定（钼黄比色法）GB
1 本方法适用于配合饲料和单一饲料。测定范围磷含量0－20微克／毫升。 2 测定原理：样品经灰化后，磷形成各种金属的磷酸盐，（将试样中有机物
破坏，使磷游离出来），在酸性溶液中与钒钼酸铵显色剂反应，生成黄色的磷－钒－钼酸复合体，在420纳米的波长下比色测定。因为这种颜色
的深浅与溶液中磷的含量呈正比，所以可以用比色法测定出饲料中磷的含量。（此法测得为总含磷量，其中包括动物难以吸收的植酸磷。）
3 实验准备：实验室用粉碎机、分析天平、分光光度计电炉、马福炉、坩
埚、容量瓶（50、100ml、1000ml）、移液管（0.1、0.5、2、5、10 ml）、量筒（20、100 ml）等。 4 试剂及配制：（本方法试剂为分析纯，水为蒸馏水） （1）盐酸溶液：1：3水溶液
（2）硝酸
（3）钒钼酸铵显色剂：ａ称取偏钒酸铵1.25 g置于1000 ml烧杯中 ，加硝酸250 ml，ｂ另取钼酸铵25 g置于500 ml烧杯中，加水400ml使之溶解，在冷却的条件下，将ｂ缓缓倒入ａ中，并用水定容到1000ml，（存于棕色容量瓶中）避光保存，若生成沉淀则不能继续使用。
（4）磷标准液：将磷酸二氢钾105℃干燥1小时，在干燥器中冷却后称取0.2195克溶于水中，定量移入1000 ml容量瓶中，加入硝酸3 ml，用水稀释至刻度，摇匀，即为50微克／毫升的磷标准液。
5 测定步骤：
（1）试样制备 取具有代表性的样品，粉碎至40目，用四分法缩分到200克，装入密封的容器中。
（2）试样分解 同钙的测定。可用测定钙的试样分解液直接测定总磷。 （3）标准曲线的绘制：
①吸取磷标准液 准确移取磷标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0毫升分别放入9个编号的50毫升的容量瓶中。
②加显色剂 在上述的9个容量瓶中分别加入10毫升钒钼酸铵显色剂。 ③定容 在各容量瓶中加水定容到刻度，摇匀。
④静止 10－20分钟。
⑤比色 用10毫米的比色皿，在420纳米的波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度（光密度）。
⑥绘制曲线 以各溶液的吸光度为横坐标，磷的微克数为纵坐标绘制标准曲线。
（4）试样的测定：
①吸取试液 准确移取试样分解液0.1－5毫升（含磷在50－750微克）于50毫升的容量瓶中。（空白：在50毫升容量瓶中加入10毫升显色剂，用水定容到刻度。） ②加显色剂 在容量瓶中分别加入10毫升钒钼酸铵显色剂。 ③定容 在容量瓶中加水定容到刻度，摇匀。 ④静止 10－20分钟。
⑤比色 用分光光度计测吸光度，将波长调至420纳米处，用空白调“0”（用10毫米的比色皿）后，依次测出溶液的吸光度（光密度），代入相关方程求得P含量。
⑥根据测得的试样分解液的吸光度，在标准曲线上查出其含磷量（微克） 6 计算结果
（1）计算公式：P(%)=Y/ m *1000000*(V1/V2)*100 式中：m-试样的质量（g） X-吸光度
Y＝887.87*X+11.35
V1－试样分解液的体积（ml）
V2－测定时吸取的分解液的体积（ml） 1000000－克和微克的换算 所得结果应精确到0.01％
（2）重复性：每个样品取两个平行样进行测定，如果相对平均偏差在允许的范围内，以其算术平均值为结果。
含磷量在0.5％以上时，允许相对平均偏差为3％；含磷量小于0.5％时，允许相对平均偏差为10％。
Y＝887.87*X+11.35 W＝样品重（Y）
V＝取消化液的量（ml） Y=a+bx
b= (∑xy-∑x∑y/n)/［∑x2-(∑x)2/n］ a=Y-bx
只有相关系数γ＝0.99??至少两个“9”以上才能使用该回归方程 γ＝(∑xy-∑x∑y/n)/｛［∑x2-(∑x)2/n］*[∑y2-(∑y)2/n]｝0.5 将试样的光密度最好在0.05-0.7之间。
三 饲料水溶性氯化物的测定方法（硝酸银反滴定法--氟尔哈德法）GB
饲料中的氯化物大部分为氯化钠,氯化钠在机体内是以钠离子和氯离子的形成主要分布在细胞外液中,参与集体渗透压的调节,在维持畜禽
的正常生理活动，以及酸碱平衡起着重要的作用。氯化钠还有增进食欲，促进生长等作用。但是，在植物饲料中，氯化钠的含量较少，而且钠和氯的比例不平衡，不能满足动物的生理需求，必须人工喂一定的食盐，而过量的食盐又可以引起畜禽中毒，甚至死亡，因此测定单一饲料和配合饲料，特别是鱼粉中盐分的含量在饲料生产中具有重要意义。
1 本方法适用于配合饲料和单一饲料。检测范围氯元素含量为6－60mg 2 测定原理：测定可溶性氯化物的量作为盐分的量，采用硫氰酸铵反滴定法，在样品中加入过量的硝酸银，生成白色氯化银沉淀，除去沉淀后，在酸性溶液中用硫氰酸铵回滴过量的硝酸银。根据消耗的硫氰酸铵的量，则可计算出氯化物的含量，作为饲料中盐分的估计。
3 实验准备：分析天平，移液管（10、25、50 ml），滴定管（50 ml），容量瓶（100 ml），三角瓶（250 ml具塞1个其他2个） 4．试剂与配制
使用试剂除特殊规定外均为分析纯。水为蒸馏水。
1）硝酸。 2）硫酸铁溶液（60g/L） 称取60克硫酸铁，加水微热溶解后，加水至1000ml. 3）硫酸铁指示剂 250g/L的硫酸铁水溶液，过滤除去水溶物，与等体积的浓硝酸混合均匀。
4）氨水溶液 10ml加蒸馏水190ml.
5）硫氰酸铵溶液（0.02mol/L） 称取硫氰酸铵1.52克，溶于1000ml水中。 6）氯化钠标准贮备溶液 基准级氯化钠，与500oC灼烧1h，干燥器中冷却
保存。称取5.8454克溶解与水中，转入1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度摇均。此氯化钠标准贮备液的浓度为0.1mol/L。
7）氯化钠标准工作溶液 准备吸取氯化钠标准20ml于1000ml容量瓶，用水
稀释至刻度，摇均。此氯化钠标准溶液的摩尔浓度为0.02mo/L. 8）硝酸银标准溶液（0.02mol/L） 称取3.4克硝酸银溶于1000ml水中，贮
于棕色瓶中。 （1）体积比 吸取硝酸银溶液20ml，加硝酸4ml，指示剂2ml,在剧烈摇动下用硫氰酸铵溶液滴定，滴至终点为持久的淡红色。由下式计算两溶液的体积比（F）。
F=20/v2
式中 F-硫酸银与硫氰酸铵溶液的体积比； 20-硝酸银溶液的体积（ml）； V2-硫氰酸铵溶液体积（ml）;