W―― 样品重（g）
二 饲料中粗脂肪的测定：
根据脂肪不溶于水而溶于有机溶剂的特点，在索氏脂肪提取器中用无水乙醚反复浸提一定重量试样中的脂肪，脂肪被收集于已知重量的脂肪接收瓶中，根据浸提前后脂肪接收瓶重量之差，计算脂肪的含量。浸提物中粗脂肪外，还有有机磷、磷脂、脂溶性维生素、色素等，因此分析结果只能称为粗脂肪或醚浸出物 。 1 方法：索氏浸提法 （GB）。本方法适用于各种混合饲料、配合饲料、浓缩饲料及单一饲料中粗脂肪的测定。
2 原理：利用脂肪溶于有机溶剂的特性进行分离，首先用有机溶剂无水乙醚浸提试样，然后使含有脂肪的乙醚流集于已知重量的脂肪瓶中。乙醚又被蒸发到浸提管中，反复浸提，直至样品中脂肪全部被转移入脂肪瓶中，最后对脂肪瓶称重，根据浸提前后脂肪瓶重量之差，计算脂肪的含量。浸提物中除粗脂肪外，还有有机磷、磷脂、脂溶性维生素、色素等，因此分析结果只能称为粗脂肪或醚浸出物。 3 实验准备：实验用粉碎机、电子天平（万分之一）、电热恒温水浴锅（0－100℃）、恒温干燥箱、索氏脂肪提取器、滤纸包、干燥器等。 4 试剂及配制：
（1） 无水乙醚（分析纯） 5 测定步骤：
（1）准备索氏脂肪提取器 索氏脂肪提取器洗净烘干；脂肪接收瓶在105℃烘干2小时，在干燥器中冷却30分钟，称其重量，再烘干30分钟，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g 为脂肪接收瓶恒重（W1），同时记号。
（2）称样 准确称取试样1－5g（W）（如含油量高的样品可称1－1.5g）于滤纸包中，放到105℃烘干至恒重。
（3）回流浸提
A 将烘好的滤纸包放入浸提管中（注意：滤纸包的高度不应超过浸提器的虹吸管的高度，以全部浸泡于乙醚中为宜）。
B 由冷凝管上口注入无水乙醚，当加到虹吸管高度时，待乙醚回流一次后，继续注入至虹吸管的2／3处，（浸没脂肪包）。
C 回流 在55－60℃的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次（脂肪含量高的回流70次）浸提6－8小时（检查浸提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为浸提终点）。
D 回收乙醚 取出滤纸包，空回流2－3次，以便洗净浸提管，将乙醚回收。
E 当乙醚回收完毕后，取出脂肪瓶，用稀盐酸浸泡脂肪瓶外壁1分钟，然后用蒸馏水冲净，将其放入105℃烘箱中烘干2小时，在干燥器中冷却30分钟，
称重。（W2）
6 计算公式：
EE％＝（W2－W1）／W＊100 式中
W1--脂肪接收瓶重（g）
W2--脂肪接收瓶重+脂肪重（g） W—风干样品重 （g）
第六课 饲料级矿物质添加剂的测定
一 硫酸铜含量的测定
1 原理：过量的碘化钾能将二价铜离子还原为一价铜离子，同时还原析出定量的碘，然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定所析出的碘，以间接测定铜的含量。 2 实验准备：电子天平、碘量瓶（100ml）、量筒（100ml）、移液管（2 ml、5 ml）、滴定管（25 ml）等。 3 试剂及配制：
（1） 硫代硫酸钠标准溶液(0.1 mol/L）:称取26g硫代硫酸钠(5水的或无水硫代硫酸钠16g)溶于1000 ml水,缓缓煮沸10分钟,冷却,放置2周后过滤备用。
标定：称取0.15g于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾（准确至0.0001g），置于碘量瓶中，溶于25 ml水，加2g碘化钾及20ml 硫酸溶液（20％）摇匀，置于暗处10分钟，加150ml 水，用配制好的硫代硫酸钠溶液滴定，近终点时加3ml淀粉指示剂（5g/L），继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色，同时做空白试验。 计算：硫代硫酸钠标准溶液浓度 C＝m/(V1-V2)*0.04903 式中：C为硫代硫酸钠标准溶液的浓度（mol/L）
m为重铬酸钾质量(g)
V1为硫代硫酸钠标准溶液用量(ml)
V2为空白试验硫代硫酸钠标准溶液用量(ml)
0.04903为与1.00ml硫代硫酸钠标准溶液［C＝1.000 mol/L］相当的以
克表示的重铬酸钾的质量。
（2） 冰乙酸
（3）5g/L可溶性淀粉溶液：5g 可溶性淀粉溶于1000ml 水（将5g可溶性淀粉置于一个小烧杯中用少量水调成糊状，缓缓倒入煮沸的水中，并用水反复冲洗小
烧杯，继续煮沸5分钟，冷却。保存时间为1个月）。 （4）碘化钾
4 测定步骤：准确称取0.5g试样（精确至0.0002g ）,置于碘量瓶中，加入50 ml蒸馏水使之溶解，再加入4ml冰乙酸和2g碘化钾，混匀后，在暗处放置10分钟，然后，用硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加入2ml可溶性淀粉溶液，并继续滴定至蓝色刚刚消失为止，即反应终点。 5 计算公式
(1) 试样中硫酸铜（CuSo4 5H2O）的质量分数
W（CuSo4 5H2O）＝C＊V＊0.2497／m (2) 试样中铜的质量分数
W（Cu）＝C＊V＊0.06355／m
式中：C为硫代硫酸钠标准溶液浓度（mol/L）
V为滴定所消耗硫代硫酸钠标准溶液体积（ml） M为试样质量（g）
0.2497为1mmol硫酸铜质量 0.06355为1mmol铜质量
二 硫酸锌含量的测定
1 原理：将硫酸锌溶解于乙酸中，用六次甲基四胺调节溶液的PH至5－6，以二甲酚橙为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准液进行滴定，当溶液由紫色变为亮黄色时，即为反应终点。
2 实验准备：电子天平、250ml三角瓶、量筒（100ml）、移液管（5ml）、滴定管（25 ml）等 3 试剂及配制：
（1）乙酸溶液：1：16乙酸溶液（V:V），由1份冰乙酸与16份蒸馏水混合而成。 （2）200g/L六次甲基四胺溶液:200g六次甲基四胺溶于1000ml水。
（3）2g/L二甲酚橙指示剂：2g二甲酚橙溶于1000ml水。 （4）乙二胺四乙酸二钠标准液(0.05 mol/L）： 称取19g EDTA,于1000ml水中加热使之溶解,冷却，摇匀。 C（EDTA）／mol/L （配制）EDTA／ g 0.1 0.05 0.02
标定：称取0.12g（精确至0.0001g）基准氧化锌（800℃灼烧至恒重）于三角瓶
38 19 8 (标定)基准氧化锌／g 0.12 0.04 中，加稀盐酸（20％）3ml使之溶解，加水20ml，再加0.1％甲基红指示剂1滴，然后滴加10％氨水使之呈微黄色，加水25ml，氨－氯化铵缓冲液（PH10）10ml，再加1%铬黑T水溶液少许,用EDTA滴定由紫色变为纯蓝色。同时做空白试验。 计算：EDTA标准液浓度 C＝m/（V1-V2）*0.08138 式中: m为氧化锌质量(g)
V1为EDTA溶液用量(ml)
V2为空白试验EDTA溶液用量(ml) 0.08138为每mmol氧化锌的数。
4 测定步骤：准确称取0.3g试样，精确至0.0002g，置于250ml三角瓶中，加入3ml乙酸使之溶解，再加入30ml
水和2滴二甲酚橙指示剂，然后滴加六次甲基四胺溶液，至反应液呈现稳定的紫红色后，再继续过量加入5ml。用EDTA标准液滴定，直至溶液由紫红色变为亮黄色时，即为滴定反应的终点。 5 计算公式：
（1） 试样中七水硫酸锌的质量分数: W=C*V*0.2875/m （2） 试样中一水硫酸锌的质量分数：W=C*V*0.179/m （3）试样中硫酸锌的质量分数：W=C*V*0.06538/m 式中：C为EDTA标准液的浓度（mol/L）
V为滴定所消耗EDTA标准液的体积（ml）
m 为试样质量（g）
0.2875为1 mmol七水硫酸锌的质量 0.179为1 mmol一水硫酸锌的质量 0.06538为1 mmol硫酸锌的质量
三 硫酸亚铁含量的测定
1 原理：在酸性介质(硫酸溶液)中,用高锰酸钾滴定硫酸亚铁,其化学反应式如下:
在此反应体系中,反应是迅速而定量地进行的,根据高锰酸钾的消耗量可以计算硫酸亚铁的含量。通常在反应体系中加入磷酸使之与Fe3+反应，生成无色络合物来消除Fe3+颜色的干扰，以高锰酸钾本身作为指示剂指示滴定反应的终点。
2 实验准备：电子天平、250ml三角瓶、量筒（100ml）、移液管（5ml）、滴定管（25 ml）等。 3 试剂及配制： （1）硫酸 （2）磷酸
（3）高锰酸钾溶液（0.02 mol/L）：称取0.64g高锰酸钾溶于1000ml蒸馏水中，煮沸15分钟，冷却置于暗处保存2周。玻璃坩埚过滤于干燥的棕色瓶中。 C（高锰酸钾）／mol/L （配制）高锰酸钾／ g (标定)基准草酸钠／g 0.1 3.2 0.1 0.05 1.6 0.1 0.02 0.64 0.1 标定：称取基准草酸钠（105℃干燥两小时，存于干燥器中）0.1g，准确至0.0002g，溶于50ml水中，再加硫酸（1：3）10ml，将此溶液加热至75－85℃，用配制的高锰酸钾溶液滴定，溶液呈现粉红色且1分钟不退色为终点，滴定结束时，溶液温度在60℃以上。同时做空白试验。 计算：C＝m/(V1-V2)*0.0670
式中：C为高锰酸钾标准溶液浓度（mol/L）
m为基准草酸钠的质量(g)
V1为滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)
V2为空白试验滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)
0.0670为与1.00ml高锰酸钾标准溶液［C＝1.000 mol/L］相当的以克表
示的草酸钠的质量。
4 测定步骤:准确称取0.5g试样,精确至0.0002g.溶于50 ml不含氧的蒸馏水中,加入5 ml浓硫酸和2 ml磷酸,再用高锰酸钾标准溶液进行滴定,直至溶液刚显粉红色且在30s内不退色为止,即为滴定反应的终点. 5 计算公式:
(1)试样中硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)的质量分数:
ω(FeSO4.7H2O)=c·V*0.2780/m (2) 试样中铁的质量分数:
ω(Fe)=c·V*0.05585/m 式中: c为高锰酸钾标准溶液浓度, mol/L;
V为滴定所消耗高锰酸钾标准溶液的体积,ml; m为试样的质量,g;
0.2780为1 m mol硫酸亚铁的质量; 0.05585为1 m mol铁的质量.