临床检验基础实验指导 - 图文(7)

2019-04-22 10:39

色。

肉眼观察记录如下:黄、桔黄、黄褐、红色、乳白色。正常尿液的颜色,随尿量的多少由

淡黄到桔黄色。也可因各种病变药物、食物影响而改变。 3、透明度:正常尿液新鲜留取者,不一定为清析透明。 肉眼观察记录如下:透明、微混、混浊。

4、酸碱反应:用0.04%溴麝香草酚蓝溶液一滴加入数毫升尿液中,黄色是酸性,蓝色是碱性,绿色是中性。

5比密(比重):将尿液倒入大号试管内,将比密计(比重计)轻轻置于尿中,使其 在尿中自由浮动,勿与量筒壁接触,在尿液半月状凹面下缘阅读数,即为比密。 正常尿比密(比重)在1.010—1.025之间,最大范围为1.003—1.030, 【注意事项】

(1)、尿量太少应加等量蒸馏水稀释,所得结果应将读数的末两位数字乘2即得原尿液的比重。

(2)、测尿比重时,应以200C为标准,每升高30C应加0.001,每低30C应减0.001. (二)尿液的化学检查 (urine chemical examination)

1、尿液蛋白定性试验(黄基水杨酸法)(黄柳酸法) 【试剂】 20%黄基水杨酸 【原理】

磺基水杨酸亦称磺柳酸,为生物碱试剂,在略低于等电点的酸性环境下,其阴离子(酸根)与蛋白质的氨基酸阳离子结合,成为不溶的蛋白盐而沉淀。

【操作方法】于试管内加入2/3量的尿,滴加20%黄柳酸3—4滴,1分钟内立即观察结果,其结果判断如表2:

表2 尿液蛋白定性试验(黄柳酸法) 结果判断

符号检验反应 每100ml尿含蛋白质的量(克) —仍清晰,未见混浊 无蛋白 ±隐约可见轻微混浊 0.001以下 +混浊 0.001-0.05 ++混浊并有颗粒状沉淀 0.05-0.2

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+++絮状沉淀 0.2-0.5 ++++凝集状沉淀 0.5以上

【注意事项】

(1)混浊尿应离心后取上清液做试验。

(2)本法非常敏感,判断结果时间应严格控制在15秒内。 2、尿糖定性试验(斑氏定性法): 【原理】

葡萄糖含有醛基,在热碱性溶液中能将高价硫酸铜(蓝色)还原为低价的氧化亚铜(红棕色沉淀)。 【试剂】

硫酸铜尿糖定性试剂:

枸橼酸钠42.5克,无水碳酸钠25克,放入2000毫升容量三角烧瓶内加蒸馏水约700毫升加热溶解后冷至室温。

另用250毫升三角烧瓶加入硫酸铜(CuS0425H20)10g加水约100毫升,加热溶解,将溶解后的硫酸铜溶液徐徐倒入前液,倒时不断混合,补足水量到1000毫升。 【操作方法】

试管一支加班氏试剂2ml煮沸,滴加尿液4滴放入缸内煮沸10分钟,冷后观察结果,其结果判断如下表3

表3 尿糖定性试验(斑氏定性法)

结果 兰色不变 绿色 草绿色 土黄色 砖红色

符号 (—) + ++ +++ ++++

约计糖含量(克/100) 无 0.5克以下 0.5-1克 1-2克 2克以上

(三)尿液特殊蛋白检测(本-周氏蛋白) 热沉淀反应法 【原理】

本-周氏蛋白又称凝溶蛋白,是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。此种蛋白在一定的pH条件下加热至40~60℃时有沉淀发生,温度升高至100℃时,沉淀消失,

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再冷却时又可重新沉淀。 【试剂】

(1)200g/L磺基水杨酸溶液。

(2)2mol/L乙酸盐缓冲液(Ph4.9±0.1)。

取乙酸钠(CH3COONa23H2O)17.5g,加冰乙酸4.1ml,再加蒸馏水至100ml,调pH至4.9。 【操作】

(1) 先将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性试验,如呈阴性反应,则可认为尿液标本中本-周氏蛋白阴性。

(2)取透明尿液4ml于试管中,再加入乙酸盐缓冲溶液1ml,混匀后,放置56℃水溶液中15min。如有混浊或出现沉淀,再将试管放入沸水中,煮沸3min,观察试管中混浊或沉淀的变化,如混浊变清、混浊减弱或沉淀减少,均提示本-周氏蛋白阳性。若煮沸后,混浊加强或沉淀增多,表明此尿液中还有其他蛋白质,此时应将试管从沸水中取出,立即过滤。如滤液开始透明,温度下降后浑浊,再煮时又透明,提示本-周氏蛋白为阳性。

(四)显微镜检查(Microscopic Examination of urinary Sediments)

1、标本制备:取新鲜尿10毫升置于试管内离心沉淀3分钟,弃去上清液,摇匀底层沉渣,倒于玻片上,用低倍镜(low power field.LPF)观察管型(鉴定使用高倍镜),上皮细胞,结晶,用高倍镜(high Power field,HPF)来辩认红细胞、白细胞。检查细胞,应观察10个高倍镜视野,检查管形应观察20个低倍视野。观察20个高倍视野(或低倍视野),以所见最低与最高值报告。镜检时光线应较弱。 2、镜检内容 [1] 细胞

(1)上皮细胞(见挂图)

a:扁平上皮细胞:细胞大而薄,外形不规则。多呈大而扁平的多角形,边缘常卷起成堆,来自阴道,尿道粘膜表层,少量出现无临床意义。

b:大圆上皮细胞:胞体为圆形,较扁平上皮细胞略小,内有一个圆核,膀胱上皮表层,阴道上皮中层为此类细胞,正常尿中可偶见,膀胱炎时可成堆出现。 c:尾状上皮细胞:尾状或纺锤形,核较大,来自肾盂或输尿管及膀胱颈部,正常尿中不易见到,肾盂、输尿管或膀胱炎时可见。

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d:小圆上皮细胞:较白细胞略大,圆形或多边形核大而圆,核膜清楚,胞浆可见空泡及脂肪滴,来自肾小管,正常尿中少见,出现时多为肾小管病变,肾移植术后一周,尿中可见此类细胞。 (2)白细胞及脓细胞

正常尿中可有少量白细胞,在妇女尿中无重大意义,若尿中发现多量白细胞,表示泌尿系统有炎症,多为中性白细胞,脓细胞是在炎症中死亡的中性粒细胞细胞,外形不规则,浆内充满颗粒,看不清胞核,若超过5/HP以上称镜下脓尿,表明泌尿系炎症。细胞形态在酸性尿液中较完整,碱性尿液中细胞肿胀而不清析。

(3)红细胞:新鲜红细胞为淡黄色,略有折光性的无核细胞,有时在高渗尿中可皱缩成星状,低渗尿内膨胀,甚至可使血红蛋白逸出成为大小不等的空环,称为红细胞泡影。正常尿中无红细胞或个别出现,离心后的尿液如每高倍镜视野平均可见到1-2个红细胞即为异常表现,若仅在显微镜下发现红细胞每高倍镜视野达3个以上,而尿的外观无血色者,称为镜下血尿,多为急性和慢性肾小球肾炎,肾结石、肾结核、肾盂肾炎等。(图11)

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[2] 管型:为正直或弯曲的园柱状体,两边平行,两端除因折断外,都为钝园形,宽窄长短不一致,由于结构不同分下列数种(图12)。

(1)透明管型:为无色透明均匀的圆柱体,较窄两端钝圆,偶见于正常尿中,当肾脏有轻度或暂时功能性改变时,尿中可见少量透明管型。

(2)红细胞管型:是指透明管型内含有较多的红细胞(超过管型的1/3),表示肾小球有病理改变,为急性肾小球肾炎等。

(3)白细胞管型:在透明管型内含有许多白细胞超过管型的1/3,表示有化脓性炎症。

(4)上皮细胞管型:在透明管型内含有许多肾小管上皮细胞(超过管型的1/3),

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