分子诊断学习题 LucasGu
7．脆性X 智力低下1 号基因( FMR-1) 基因5′端重复序列异常扩增，其全突变重复范围（n）是 A．6～45 B．45～55 C．55～200 D．0～6 E．>200 8．CEPH
A．美国疾病控制中心 B．加拿大临床化学协会 C．人类多态性研究中心 D．美国病理学家协会 E．美国临床化学协会 8．
二、B型题：
A．IT 15 基因上CAG异常重复 B．DMD基因突变 C．PAH基因突变 D．CFTR基因突变
E．FMR-1基因内（CGG）异常重复及CpG岛异常甲基化 1．亨廷顿病 2．脆性x综合症 3．苯丙酮尿症 4．杜氏肌营养不良症 5．囊性纤维化
A．限制性内切酶MstⅡ切割法 B．长距离PCR法（LD-PCR） C．多重PCR
D．扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影 E．Southern印迹杂交法
6．亨廷顿病IT 15 基因CAG常用的分子诊断方法 7．目前脆性x综合症主要的分子诊断法 8．肌营养不良症分子诊断的常用方法 9．镰状细胞贫血分子诊断
10．甲型血友病基因倒位的分子检测法 三、X型题：
1．α地中海贫血在临床上包括以下类型： A．Hb Bart’s胎儿水肿综合征 B．轻型(标记型)α地中海贫血 C．遗传性胎儿Hb持续增多症 D．中间型地中海贫血 E．HbH病
F．静止型地中海贫血
2．杜氏肌营养不良症（DMD）分子异常的机制主要包括： A．基因缺失 B．点突变 C．插入 D．微小缺失
E．基因重复
3．PND和PGD的适应症
A．有可能孕育出严重遗传性疾病和先天性畸形胎儿的孕妇。 B．夫妇一方有某种遗传病或曾生出过某种遗传病患儿，或孕妇
有X伴性隐性遗传病家族史。
C．夫妇任何一方为染色体异常、染色体平衡移位和倒位携带者。 D．早孕阶段曾服用过致畸药物或曾有病毒感染史等致畸情况。 E．羊水过多或过少。
F．原因不明的多次流产、死胎、死产的孕妇。 G．胎儿发育迟缓。 H．未触到正常的胎儿。 I．年龄超过35岁的孕妇等等。 4．遗传疾病分子诊断的策略 A．直接诊断策略 B．SSCP
C．基因多态性连锁分析 D．RFLP
E．基因突变的定量（dosage）诊断 5．β地中海贫血常用的分子诊断检测方法： A．PCR-RDB法 B．VNTR C．STR
D．PCR-RFLP法 E．基因芯片法
6．苯丙酮尿症常用的分子诊断检测方法： A．PCR-STR B．PCR-SSCP C．PCR-DGGE D．PCR-RFLP E．多重ASPCR 四、名词解释：
1．镰状血红蛋白(HbS) 2．植入前遗传学诊断（PGD） 3．苯丙酮尿症 五、问答题：
1．血红蛋白病及其分类。
2．试述点突变（基因背景清楚和未知）的主要检测方法。 3．试述限制性内切酶MstⅡ切割法诊断镰状细胞贫血的原理并图示。
4．试述近端重组、远端重组概念。
参考答案
一、A型题：
1.D 2.B 3.B 4.C 5.D 6.A 7.E 8.C 二、B型题：
1.A 2.E 3.C 4.B 5.D 6.D 7.E 8.C 9.A 10.B 三、X型题：
1.ABDF 2.ABCDE 3.ABCDEFGHI 4.ACE 5.ADE 分子诊断学习题 LucasGu
6.ABCDE 四、名词解释：
9. β珠蛋白基因中第6 位密码子的序列由原来的GAG改
变成GTG，结果β珠蛋白肽链的第6 位氨基酸残基由原来的谷氨酸改变成缬氨酸，改变后的血红蛋白称为镰状血红蛋白(HbS)。
10. 植入前遗传学诊断主要是指在显微操作下从体外受精发育
至6～8 个细胞期的胚胎中，活检1～2 个卵裂球细胞或直接获取受精前后的极体，通过聚合酶链式反应或荧光原位杂交，进行快速遗传学诊断，选择正常胚胎植入宫内，从而获得健康胎儿。
11. 由于肝内苯丙氨酸羟化酶（PAH）严重缺失所致的苯丙氨
酸代谢异常，为常染色体隐性遗传病。由于长期高苯丙氨酸血症导致脑组织的损伤和不可逆的智力发育障碍。 五、问答题：
3. 血红蛋白病(hemoglobinopathy)是由于血红蛋白在质和
量上的异常而发生的一类遗传性贫血病。它可分为两大类：一类是异常血红蛋白病，其Hb发生了结构上的异常，导致贫血病。例如镰刀状细胞贫血；另一类是地中海贫血，其构成Hb的蛋白部份—珠蛋白的合成降低或消失，而其Hb一般不发生结构上的变化，故亦称珠蛋白合成障碍性贫血。
4. 对基因背景清楚或部分清楚的点突变，可以采取直接检测
基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸杂交(allele specific oligonucleotide，ASO)、PCR-ELISA、等位基因特异性扩增(allele specific amplification，ASA)、PCR-RFLP、基因芯片技术等进行诊断，例如β地中海贫血，可以使用ASO、PCR-RFLP 联合基因芯片技术进行诊断。
对于一些基因背景未知的点突变，可以采用单链构象
多
态
性
(single-strand
conformational
polymorphism，SSCP)、变性梯度凝胶电泳(denaturing graient gel electrophoresis，DEEG)、异源双链分析(heteroduplex analysis，HA)、DNA序列测定、蛋白截短测试（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大学医学院的研究人员设计了47 对PCR引物，分段扩增血友病A因子Ⅷ 基因片段，进行DGGE分析，发现多态性片段后再进行DNA序列分析，几乎查清了所有临床轻中度病人的点突变。
3．在FⅧ基因区域内，有一种A基因存在三个拷贝，其功能
不详，其中一个A基因位于FⅧ基因的第22 号内含子内(A1)，另外两个位于X染色体的末端(A2、A3)。A1基因可以与其上游的两个A基因拷贝中的一个发生同源重组，引起FⅧ基因的1-22 外显子片段倒位，这种倒位导致FⅧ功能完全丧失而发生严重的血友病(图15-5)。其中与A2发生的重组称为近端重组，约占倒位的15％；与A3发生的重组称为远端重组，约占倒位的85％。
4．在FⅧ基因区域内，有一种A基因存在三个拷贝，其功能
不详，其中一个A基因位于FⅧ基因的第22 号内含子内(A1)，另外两个位于X染色体的末端(A2、A3)。A1基因可以与其上游的两个A基因拷贝中的一个发生同源重组，引起FⅧ基因的1-22 外显子片段倒位，这种倒位导致FⅧ功能完全丧失而发生严重的血友病(图15-5)。其中与A2发生的重组称为近端重组，约占倒位的15％；与A3发生的重组称为远端重组，约占倒位的85％。