来提高分辨率。
五、显微镜的操作步骤 （一）观察前的准备
1．置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约为一寸左右。镜检者姿势端正，一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左右眼均能观察。
2．调节光源，对光时应避免直射光源，因直射光源影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头，并刺激眼睛。如室内光线不足或阴暗天气，可用日光灯或显微镜灯照明。
调节光源时，先将光圈完全开放，升高聚光器至载物台同样高，否则使用油镜时光线较暗。然后转下低倍镜观察光源强弱，调节反光镜，反光镜有凹平面，光线较强的天然光源，宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜。在对光时，要使全视野内为均匀的明亮度。凡检查染色标本时，光线应强；检查未染色标本时，光线不宜太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线。
（二）低倍镜观察
检查的标本须先用低倍镜观察，因为低倍镜视野较大，易发现目标和确定检查的位置。
1．旋转转换器，将低倍镜移到镜筒正下方，和镜筒对直。
2．转动反光镜向着光源处，同时用眼对准目镜仔细观察，使视野亮度均匀。 3．将标本片放在载物台上，用标本夹夹住，移动移动器使观察的目的物置于圆孔的正中央。
4．将粗调节器向下旋转，眼睛注视物镜，以防物镜和载玻片相碰。当物镜的尖端距载玻片约0.5cm处时停止旋转。
5．左眼向目镜里观察，此时可适当的缩小光圈，否则只见光亮一片，难见到目的物。同时将粗调节器慢慢向上旋转，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细调节器调节，至目的物清晰为止。
6．如果粗调节器旋得太快，超过焦点，必须从第4步重调，不应正视目镜情况下调粗调节器，以防没把握的旋转使物镜与载玻片相碰撞坏。
7．观察时两眼同时睁开。单筒显微镜应习惯用左眼观察，以便绘图。 （三）高倍镜的观察
1．先用低倍镜观察，发现目的物后再将高倍镜移至视野正中处。
2．旋转转换器换高倍镜，眼睛要在侧面观察，如果高倍镜触及载玻片立即停止旋
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动，说明原来低倍镜就没有调准焦距，目的物并没有找到，要用低倍镜重调。如果调对了，换高倍镜时基本可以看到目的物。若有点模糊，用细调节器调就清晰可见。若视野较暗可适当调节光圈。
3．在视野中找到最适宜于观察的部位，将此部位移至视野中心，准备用油镜观察。 （四）油镜观察
1．如果用高倍镜目的物未能看清，可用油镜。在用油镜观察前，必须先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。
2．将高倍镜移至一侧，在载玻片上标本的镜检部位滴一滴香柏油（或液体石蜡），侧面观察，将油镜移至正中使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。应特别注意不能压在标片上，更不能用力过猛，否则不仅压碎玻片，还会损坏镜头。
3．从目镜观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用细调节器将镜筒徐徐上升，直至出现清晰物像为止。如油镜已离开油面而仍未见物像，必须再从侧面观察，将油镜降下刚好贴近载玻片，重复操作至物像看清为止。
4．观察细菌的示范片，用铅笔绘出其形态图。
5．观察完毕，上旋镜筒。先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再蘸取少许二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦去残留的二甲苯。切忌用手或其它纸擦镜头，以免损坏镜头。用绸布擦净显微镜的金属部件。
6．将各部分还原，反光镜垂直于镜座，将物镜转成八字形，再向下旋。同时把聚光镜降下，以免物镜与聚光镜发生碰撞危险。
六、微生物形态观察 （一）细菌的观察
取细菌观察片，依次用低倍镜、高倍镜，确定适宜的观察视野。然后用油镜观察，并在油镜状态下观察细菌具体形态，并绘制生物图。
（二）酵母菌的观察
酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显分化，菌体比细菌较大。繁殖方式也比较复杂：无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母菌是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色制成水浸片，不仅可观察其外形，而且可以区分死活细胞。
取酵母菌观察片，先用低倍镜，观察酵母菌的基本形态，然后用高倍镜观察细胞内部细微结构。并绘制酵母菌形态图。
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（三）霉菌的观察
霉菌属真核微生物，是丝状真菌的通称，菌丝较粗，分为营养菌丝及气生菌丝。营养菌丝伸入培养基内或匍匐生长在营养基的表面；气生菌丝生长在培养基上方的空气中，长出分生孢子梗和分生孢子。霉菌的菌丝直径约3～10μm，在显微镜下放大100倍清晰可见，放大400倍则细胞内部结构也能看见。多数霉菌的菌丝有隔膜，将菌丝分隔成多细胞。
取霉菌观察片，先用低倍镜，观察霉的基本形态和特点，然后用高倍镜观察细胞内部细微结构。并绘制霉菌形态图。
七、实验结果
分别绘出观察到的标本片的形态，同时注明物镜放大倍数和总放大率。
实验记录表：
微生物形态 细菌的观察 酵母菌的观察 霉菌的观察
观察倍数 微生物形态图 八、思考题
用油镜观察时应特别注意些什么？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作
用?
附录 显微镜的保养
显微镜的光学系统是显微镜的主要部分，尤其是物镜和目镜。一架显微镜的机械装置虽好，但光学系统不好，这架显微镜是不会起好作用的。因此，对显微镜要妥善保管。
1．避免直接在阳光下曝晒，因为透镜与透镜之间，透镜与金属之间都是用树脂或亚麻仁油粘合起来的。金属与透镜膨胀系数，受高热因膨胀不均，透镜可能脱离或破
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裂，树脂受高热溶化，透镜也会脱落。
2．避免和挥发性药品或腐蚀性酸类一起存放，碘片、酒精、醋酸、盐酸和硫酸等对显微镜金属质机械装置和光学系统都是有害的。
3．透镜要用擦镜纸擦拭，若仅用擦镜纸擦不净，可用擦镜纸蘸二甲苯擦拭，但用量不宜过多，擦拭时间也不宜过长，以免粘合透镜的树脂被溶化，而使透镜脱落。
4．不能随意拆卸显微镜，尤其使物镜、目镜、镜筒不能随意拆卸，因拆卸后空气中灰尘落入里面引起生霉。机械装置经常加润滑油，以减少因摩擦而受损。
5．避免用手指沾抹镜面，否则会影响观察，沾有有机物的镜片，时间长了会生霉，因此，每使用一次，所有的目镜和物镜都得用擦镜纸擦净。
6．显微镜放在干燥处，镜箱内要放硅胶吸收潮气。目镜、物镜放在盒内并存于干燥器内，以免受潮生霉。
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实验 2 培养基制备与灭菌
一、实验目的
1．熟悉玻璃器皿的洗涤和灭菌前的准备工作。 2．掌握配置和分装培养基的方法 3．掌握高压蒸汽灭菌技术。
二、仪器与材料
1．培养皿（d=90mm）10套；试管（20mm×200mm）10支；移液管（10mL）2支，（1mL）4支；锥形瓶(250mL)2个，（500mL）1个；烧杯（300mL）1个，电炉（800w）1个；玻璃珠30粒；天平；量筒等。
2．纱布、棉花、牛皮纸（或报纸）
3．精密pH试纸6.4～8.4；10％盐酸；10％NaOH； 4．牛肉膏；蛋白胨；氯化钠；琼脂；蒸馏水； 5．高压蒸汽灭菌锅；烘箱；酒精灯；
吸管 图8-1吸管的包扎 牛皮纸或报纸 三、实验原理
培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、无机盐、生长因素以及水份等。微生物在培养基上生长繁殖还必须在最适酸碱度范围内才能表现它们最大生命活力，因此对不同种类的微生物应将培养基调节到一定的pH值范围。培养基的种类很多，不同的微生物所需要的培养基不同，就它们的物理性状来分，可分为液体的、固体的和半固体的三种。固体培养基是在液体培养基中加入1.5～2％的琼脂，半固体培养基是加入0.2～0.5％的琼脂。
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