五、CASA精液分析流程
打开主机外设电源：显微镜、打印机、加温器等
打开主机(计算机)电源
打开精子检测菜单
调试显微镜 、系统加温 检测时载物台达到并保持37℃，
才能避免低温对精子活力的影响 。
填写病历 应详细、认真填写完整，保证病历的可
靠性并保存。
制作样品 严格按规程加样，减少加样误差。
选择检测的视野，检测的 检测、调整 减去混入的杂质， 精子数应大于200个。 正确判断畸形精子并记录。
预览无误 打印结果 复核后签名
返回原操作系统，用清水冲洗计数板，无菌纱布檫干，
准备下一个样本的检测。
结束检测程序，关闭电脑和所有电源，盖上罩子。 注意：
1、本仪器必须由受过培训的有专业技术资格的人员操作使用，由专人保管和维护。
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2、本操作流程是使用说明的简化，如果想详知各项的内涵，请查看桌面上的使用说明中的有关内容。
3、本系统是专用设备，不能玩游戏，以免染上病毒造成系统破坏。 4、该系统常选择20倍的物镜检测。在转换镜头时注意避免损坏镜头。
5、样本只能加5~7μl，标本放在载物台上后稍等一会儿让精液静止下来，如果精液处于流动状态则结果会失真。
6、精液标本放在载物台上后，检测尽可能在10分钟内完成，否则因精子聚光会使结果失真。
7、正式检测以前必须将温度加到37℃，并保持此温度，否则会影响精子活力。 8、根据精子密度选择检测的视野数，一般为3~20个视野，检测精子数在200个以上。如果精子密度太低则应选择人工计数或离心后查找精子。
六、IVF精液处理
一、注意事项：
1、必须为受检者提供《精液标本采集须知》或口头简要说明。
2、尽量要求病人在本中心的取精室取精，在外取精需在30分钟内送到实验室；且要求病人签署院外取精协议书。
3、核对病人姓名后，给其1个取精杯，在盖子和容器上予以明确标示。 4、精子在交给工作人员时，要当面取样封管，签字冻存，以备必要时的核查。 5、实验员将患者的精液带入实验室前核实患者的姓名及身份证号并记录在院外取精协议书上。
6、取精困难者，通知男科医师。
7、抗精子抗体阳性者，应在本中心的取精室取精后立即处理。 二、精液分析：同前。 三、精液处理方法： l、上游法：
（1）男性血清抗精子抗体阴性者，待其精液液化后，取一滴作常规检查并记录，抗体阳性者，取后应立即作洗涤处理或密度梯度离心。
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（2）精子分装成约lml／管，2～多管，标上病人的姓名，沿壁缓慢加入2～3ml的IVF—30液(已平衡好)以约30°~45°角倾斜放入37℃培养箱。
（3）40~50分钟后取出培养管，吸取上层液体(整个过程保持试管倾斜30°~45°，注意不搅动下层液体)。
（4）离心：1000～1500rpm×5分钟。
（5）取出培养管后，去上清，加入1ml IVF—30培养液，以 30°~45°角倾斜放入C02培养箱，再次上游。
（6）30分钟后从培养箱中取出，吸取上层液体做精子计数及观察活力。 （7）调整精子浓度为1.3×106／ml待用。 2、密度梯度离心法：
（1）每份精液准备1支15ml的尖底离心管，标上Pureception和患者姓名，另准备2支试管分别标上Spermrinse 、IVF-20和患者姓名。
（2）将Pureception试剂盒在37℃预温，在15ml的尖底离心管中分别加入等份量（1.5~2.0 ml）的80％(下层液)与40％(上层液)制成密度梯度离心液，将平衡过夜的Spermrinse 、IVF-20分别抽取2 ml和1 ml置于相应离心管内。
（3）将完全液化的精液沿内管壁慢慢加入装有Pureception密度梯度离心液的离心管中，2000rpm离心 10分钟，弃去上清。
（4）将沉淀移入Spermrinse管中，1500rpm 离心10分钟，弃去上清。 （5）将沉淀移入IVF-20管中， 1500rpm离心10分钟，弃去上清。
（6）保留底层沉淀，加入IVF-20培养液至1ml，如沉淀少，则加IVF-20至0.5~0.8 ml，上游15~20分钟。
（7）将上层悬浮液移入标有患者姓名的小试管中，调整精子浓度为1.3×106／ml待用。 3、注意：
（1）处理精液样本整个过程需无菌，并采取常规的防止感染的措施。 （2）用吸管吸精液，检查精液完全液化后再作上述操作。
（3）在处理或检查之前，精液样本需充分混合均匀。由于粘稠度太大造成的不均匀，会引起精子活力和浓度结果不准确。这种情况下，使用10ml注射器和18号针头或吸管反复抽吸精液，使精液液化完全。
（4）抗精子抗体为阳性的，洗涤二次后上游1次，第一次洗涤后离心转数要大一
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些，约2000rpm。也可立即采用密度梯度离心法。
（5）精子活力较差或密度较小的洗涤一次后上游一次即可。
（6）样本的抛弃：所有的体液标本以及实验室弃物均应按医院废物处理程度规定交医院统一处理。
（7）干扰物质：污染的精杯可能会影响精子的活力。必须使用组织培养级并通过质量检测的精杯。一些药物如钙离子阻断剂等，也会影响精子的活力。
参考文献：
1、黄荷凤主编，《现代辅助生育技术》，人民军医出版社，2003年9月第1版。 2、庄广伦主编，《现代辅助生育技术》，人民卫生出版社，2005年6月第1版。 3、葛秦生主编，《临床生殖内分泌学》，科学技术文献出版社，2001年版。
4、世界卫生组织编，《WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》，人
民卫生出版社，2001年第4版
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生殖医学中心规章制度
一、生殖伦理委员会工作制度
1、生殖伦理委员会（以下简称“本会”）是在医院伦理委员会领导下，结合生殖医学专业特点，开展生殖伦理方面的咨询、教育、培训；对实施中涉及的伦理问题进行审查、论证和建议以及指导和监督生殖医学中心生殖伦理制度执行的群众性组织。
2、本会由医学伦理学、心理学、社会学、法学、生殖医学、护理医学专家和群众代表等组成，任期三年。
3、本会设主任委员一名，主持委员会工作，副主任委员一名，协助主任工作，秘书一名，负责记录、通讯、联络和综合协调工作。
4、本会每年召开例会一次，或根据工作需要决定。认真学习国家有关法律、法规，研究和解决生殖伦理问题。每次参会委员人数须达到2/3以上。决议形成须经半数以上（不含半数）委员赞成。
5、本会以国家卫生部制定的《人类辅助生殖技术和人类精子库伦理原则》为指导原则审视医疗活动和科研活动。
6、本会按照《郴州市第一人民医院生殖伦理委员会督查制度》的要求，不定时抽查生殖医学中心实施的辅助生殖技术病历资料，评定是否符合医学伦理原则。
7、本会对生殖医学中心开展的新技术、新项目及申报的科研课题进行医学伦理论证、审查和建议。
8、界定患者要求与卫生部规定的医学伦理原则相抵触的伦理问题。
二 、工作人员行为准则
1、热爱祖国，热爱人民，热爱中国共产党，拥护社会主义。
2、发扬救死扶伤的革命人道主义精神和全心全意为人民服务的精神，尊重病人，热情认真，积极主动解答病人的各种疑问。
3、严谨求实，奋发进取，钻研医术，精益求精，不断更新知识，提高业务技能，做到医疗服务、治疗和护理让病人满意。
4、服从组织和中心的安排，关心集体，热心公务，互学互尊，团结友爱，正确处理同事间的关系，勇于批评和自我批评。
5、廉洁奉公，坚守岗位，尽职尽责，遵守职业道德规范，坚决抵制不正之风。
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