1.有机合成,抗体酶由于具有精确底物专一性和立体专一性可用于催化内消旋底物合成相同手性产物反应、2.阐明化学反应机制,、3.医疗,由于抗体酶既能标记靶抗原目标,又能执行一定的催化功能,通过这两种功能的结合,抗体酶可大力应用于戒毒和肿瘤治疗等。
11. 固定化方法有哪几种?并简述各自的机理。
1. 吸附法、吸附法固定化酶技术的原理是通过氢键、疏水键、电子亲和力等物理作用力将
酶固定于不溶性载体上得到固定化酶。
2. 载体偶联键合法、键合法固定化酶技术的原理是选择一种合适的不溶性载体使它与酶分
子上的某些非必须的游离基团发生反应,通过共价键或离子键使二者连接起来形成固定化酶。
3. 交联法、交联法固定化酶技术的原理是使用某种双功能或多功能试剂使酶与酶或细胞与
细胞之间和多功能试剂间形成共价键得到三向的交联网架结构得到固定化酶。
4. 包埋法、包埋法固定化酶技术的原理是利用多孔性载体,通过网格包埋或微囊包埋过程
不经化学反应与化学修饰方法将酶包埋在载体内部得到固定化酶
12. 阐述酶工程的应用并分别举例说明。
随着酶的工业化纪产的发展,酶已广泛地应用于工业、农业、医药、环保及科研等各个领域,在发酵工业中酶工程可用于生产葡萄糖。氨基酸有机酸等多种轻工食品原料,在医药领域酶工程技术可以应用于糖尿病、癌症等多种疾病的诊断和治疗与抗生素凝血素等多种药物制造等方面,在分析检测方面酶工程技术可以应用于生产食品快速检酶测试纸、特异性检测酶柱和酶管、酶传感器等方面,在环境保护领域酶工程可用于环境检测、三废处理、生物脱墨等,在研究方面酶工程也可用于生物工程研究和阐明酶反应机制等方面研究。
13. 对酶进行化学修饰时应该考虑哪些因素?
对酶进行化学修饰时应考虑以下因素:1.酶化学修饰方法的基本原理,选用正确合理的修饰方法。2.化学修饰剂的性质与要求,选用正确合理的化学修饰剂。3.酶自身条件和位点的性质,熟悉酶活性部位及相关条件和性质避免不当或错误修饰。4.反应条件的选择,尽可能在酶稳定条件下进行,并尽量不破坏酶活性功能的必需基团,使修饰率高,同时酶的活力回收高。
14. 对酶的初提取液经过一次纯化后,经测定得到以下数据,试计算比活力,回收率及纯化倍数。
粗提液: 体积100mL 活力单位250u/mL 蛋白氮2.5mg/mL
硫酸铵沉淀: 体积8mL 活力单位800u/mL 蛋白氮1.6mg/mL
15. 写出三种分离纯化酶蛋白的方法,并简述其原理。
酶蛋白的分离纯化方法主要有沉淀法、层析法、电泳法、离心法、过滤与膜分离法、萃取法等。其中沉淀法的原理是通过改变某些条件,使溶液中某些溶质的溶解度降低,从而使其从溶液中沉淀析出,达到与其他溶质分离的目的,是酶蛋白分离纯化中最常用的的方法,主要有盐析法、共沉淀法、等电点法、有机溶剂法、热处理法等。层析法的分离原理是利用混合物中各组分的物理性质(分子大小形状、极性、亲和力、分配系数等)的不同,使各组分在层析流动相和固定相中分布程度不同而达到分离。生产中常用的层析方法有吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析、层析聚焦、高效液相层析等。电泳法的原理是利用不同蛋白与酶蛋白自身带电情况和分子量等性质不同,在稳定电场中向着与自身所带电荷相反的电极以不同速率移动的方法达到分离纯化目的,常用的电泳技术有纸电泳、薄层电泳、薄膜电