酶工程考试复习题及答案(9)

2021-01-28 20:24

即形成一个由阳极到阴极连续增高的 pH 梯度。当酶或其他两性电解质进入这个体系时,不同的两性电解质即在电场作用力的推动下移动到(聚焦于)与其等电点相当的 pH 值位置上,此时由于等电点与pH相当分子表面净电荷为零呈不带电状态,因此不再受电场作用力作用而发生移动,稳定聚焦于该位置范围不变,从而使不同等电点的物质得以分离。此法主要用于分离纯化等电点不同的蛋白质等物质。亲和层析的原理是利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力,通过选择特异性的亲和层析载体,将欲分离物质与杂质加入后进行洗脱,由于特异性又可逆的亲和作用力使欲分离物质保留于载体上其他物质则被洗脱,从而使生物分子分离纯化。

23. 电泳的基本原理是什么?电泳的种类有哪些?

电泳法的原理是利用不同蛋白与酶蛋白自身带电情况和分子量等性质不同,在稳定电场中向着与自身所带电荷相反的电极以不同速率移动的方法达到分离纯化目的,常用的电泳技术有纸电泳、薄层电泳、薄膜电泳、凝胶电泳和等电点聚焦电泳等。


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