酶工程考试复习题及答案(8)

2021-01-28 20:24

泳、凝胶电泳和等电点聚焦电泳等。

16. 填充床反应器和流化床反应器的优缺点是什么?

流化床反应器优点:(1)具有良好的传质及传热的性能。pH、温度控制及气体的供给比较容易。(2)不易堵塞,可适用于处理粘度高的液体。(3)能处理粉末状底物。(4)即使应用细粒子的催化剂,压力降也不会很高。缺点如下:(1)需保持一定的流速,运转成本高,难于放大。(2)由于颗粒酶处于流动状态,易导致粒子的机械破损。(3)由于流化床的空隙体积大,酶的浓度不高。(4)由于底物高速流动使酶冲出,降低了转化率。

填充床反应器优点是:高效率、易操作、结构简单等,因而,PBR是目前工业生产及研究中应用最为普遍的反应器。它适用于各种形状的固定化酶和不含固体颗粒、黏度不大的底物溶液,以及有产物抑制的转化反应。但是它存在下列缺点:(1)温度和pH难以控制。(2)底物和产物会产生轴向浓度分布。(3)清洗和更换部分固定化酶较麻烦。(4)床内有自压缩倾向,易堵塞,且床内压力大底物需要加压注入。

17. 固定化后酶的性质会发生什么变化?

1.稳定性提高,对酸、碱、热和变性剂的耐受能力增强。2.最适pH改变,根据固定载体性质和催化反应产物性质的不同最适pH随之发生不同变化。3.相对酶活力降低,由于空间位阻等变化酶活力大部分下降。4.最适温度变化,一般固定化酶反应最适温度比一般酶高一些。

5.底物特异性变化,一般可作用于大分子底物的没特异性往往发生变化,作用于小分子底物的酶一般不发生变化。6.酶学特性可能变化,米氏常数和最大反应速度因不同固定方法可能发生变化。

18. 酶分离纯化的技术路线是什么?

酶分离纯化的技术路线是:对于胞内酶则是通过机械、物理或酶解等方法将预处理后的动物、植物或微生物细胞进行细胞破碎,再进行适当的酶提取处理,然后再通过离心、过滤、沉淀、层析、电泳、萃取、结晶等酶的分离纯化步骤,最后再进行酶的浓缩与贮存等到纯化酶。对于胞外酶则一般直接对预处理后的发酵液进行提取,再进行分离纯化及浓缩贮存等过程。

19. 常用沉淀法的种类及原理是什么?

沉淀法的原理是通过改变某些条件,使溶液中某些溶质的溶解度降低,从而使其从溶液中沉淀析出,达到与其他溶质分离的目的,是酶蛋白分离纯化中最常用的的方法,主要有盐析法、共沉淀法、等电点法、有机溶剂法、热处理法等。

20. 比较各类酶反应器的优缺点。

21. 双水相萃取、超临界流体萃取、反胶团萃取的原理各是什么?

双水相萃取的原理是利用某些高聚物之间或者高聚物与无机盐之间在水中以一定的浓度混合后可形成各种不相溶的两相,借助溶质在两相中分配系数的差异进行萃取分离的。超临界流体萃取的原理是超临界流体由于处于两相间的临界态具有很高的扩散系数、很低的粘度以及液体近似的密度,利用欲分离物质与杂质在超临界流体中溶解度不同而实现分离的。反胶束萃取的原理是利用表面活性剂分散于连续有机相中形成纳米尺度的聚焦体,聚焦体内部为包裹的亲水相外部为疏水有机相,借助欲分离物质的扩散作用与在有机相与水相两相中溶解度的不同实现分离的。

22. 等点聚焦的原理和用途是什么?亲和层析的原理是什么?

等点聚焦的原理是在电泳系统中,加进两性电解质载体。当接通直流电时,两性电解质载体


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