16S_rDNA鉴定细菌的方法(9)

纯度：蛋白、多糖、酚类等杂质会抑制PCR反应

完整性： 模板降解会导致PCR扩增无产物

浓度： 加量过多导致非特异性扩增增加

7.2 引物

特异性：长度适当、避免二级结构和二聚体

完整性：避免反复冻融

浓度：应适当,过高导致非特异性增加,过低则扩增产物太少

7.3反应Buffer

pH值,盐离子浓度

稳定剂,增强剂

7.4 Mg 2＋浓度

过高非特异性严重

过低无扩增产物

7.4 dNTP Mixture

浓度适当

避免反复冻融

7.5 ddH2O