（6）试验报告
试验报告须包括下列内容：
① 供试农药：通用名、化学名称、结构式、CAS号、纯度、水溶解度及其它理化性质。
② 供试土壤：pH、有机质含量、阳离子代换量、机械组成。
③ 主要仪器设备：气流式密闭装置、气相色谱、液相色谱等分析仪器。 ④ 试验条件：试验温度、气体流速、试验时间、避光条件。
⑤ 不同介质中农药残留量分析：提取方法、测定条件、线性范围、添加回收率、相对标准偏差、最小检测量。
⑥ 试验结果：估算结果、农药在空气、水、土壤介质中的挥发性测定结果与评价。
2.1.7生物富集作用
生物富集作用是评价环境中的残留农药对生物体及整个生态系统危害性的一个重要指标。生物富集作用通常用生物富集系数BCF表示，它是在稳定平衡状态下生物体受试物含量与试验水体中受试物浓度之比。测定生物富集系数的方法有静态法、半静态法与动态法三种，对一般农药，通常采用静态法或半静态法；对易降解与强挥发的农药，采用动态法。 （1）试验材料
供试鱼种：建议用鲤鱼、斑马鱼作试验材料。试验鱼健康，大小均匀，体长约3cm，试验前在室内驯养一周，预养期间生长正常，死亡率<5%。
供试农药：试验农药用纯品（或原药），难溶于水的可用少量低毒、不易降解的有机溶剂（如叔丁醇或二甲亚砜）助溶，加量?0.1mL/L。 （2）试验方法
试验用水为经曝气去氯处理24h的自来水，配制药液浓度分别为急性毒性LC50(96h)的1/10和1/100两个处理。每一处理不得小于20升试液，设置3个平行。每组投放20尾鱼，在22±20C的恒温条件下饲养，试验过程中定期测定水中溶解氧的含量，于0、6、24、48、96、144、192h分别从各处理中取水样测定农药含量的变化，并喂给适量饲料，至第8天时取出全部鱼样，称体重后每组分成两份测鱼体内农药含量。同时设置对照处理试液（不加入试验鱼）。 （3）数据处理
用对照组水体中农药的含量，来校正养鱼组水体中的农药含量，求出被鱼体
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摄入农药的真实值。在试验结束时水体及鱼体中农药含量变化已达到平衡，则此时鱼体对农药的富集系数为：
BCF=Cfs / Cws
式中，Cfs—已达到平衡时鱼体内农药含量(mg/kg)
Cws—已达到平衡时水体中农药含量(mg/L)
如果在试验结束时，水体中农药浓度尚未达到平衡，则用上述公式求出的富集系数值应注明是8天的结果，即用BCF8d表示。 （4）质量要求
① 水和鱼体中农药残留量测定方法回收率为70~110%，最低检测浓度满足测定要求。
② 试验结束时，试验液农药含量不低于规定浓度的80%，空白对照供试农药损失量不显著。
③ 试验期间水中溶解氧不得低于5mg/L。
④ 试验鱼在试验期间不应有异常反应或健康状况恶化。 （5）评价标准
根据BCF值的大小，可将农药生物富集性分为三级（表7）。
表7 农药生物富集等级划分
等级 I II III
BCF
富集等级
<10 10~103 >103
低富集性 中等富集性 高富集
（6）试验报告
试验报告须包括下列内容：
① 供试农药：通用名、化学名称、结构式、CAS号、纯度、水溶解度、物化性质、吸附性、正辛醇/水分配系数。
② 供试鱼种：种名、来源、驯化时间、驯化条件、食物种类与数量、鱼龄和规格。
③ 试验条件：试验时间、周期、温度、试验容器、农药浓度、pH、溶解氧、助溶剂及浓度、试验鱼数量、投食时间和数量等。
④ 水和鱼体中农药残留量分析方法：样品提取、测定条件、线性范围、添加回收率、最小检测量。
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⑤ 试验结果：试验期间鱼死亡率、异常反应、表征变化；富集系数对时间的曲线、生物富集系数BCF值及生物富集性评价。
2.2对非靶生物毒性试验 2.2.1鸟类毒性试验
通过测定农药对鸟类的LC50或LD50，评价农药对鸟类的急性毒性，提供农药对生态环境影响的资料。国际上常用的试验鸟类有鸽、鹌鹑、雉、野鸭等。鹌鹑饲养方便，是理想的试验生物。 （1）试验材料
试验生物：供试鹌鹑（Coturnix coturnix japonica）用同一批大小均匀的鹌鹑蛋孵化，饲养约30天，体重约90~110克，健康、活泼、雌雄各半的鹌鹑用于试验。试验前一天停止喂食，仅供清水。
试验药品：供试药品用制剂或纯品，溶于水或植物油中，配制成一定浓度供试验用。
试验条件：室温在25±2?C，光照采用自然光照。
主要仪器设备：试验用鸟笼（大小约为300cm2/鹌鹑）、注射器、移液管、容量瓶、烧杯等玻璃器皿。 （2）试验方法
经口一次性染毒法：供试鹌鹑以经口灌注法一次性给药0.5~1.0 mL /鹌鹑，连续7 d观察受试鹌鹑的死亡情况与中毒症状。正式试验前先做预试，以较大的间距设置4~5个浓度组，求出受试物质对受试鸟的最低全致死剂量和最高全存活剂量。正式试验时，在此剂量范围内按一定间距设置5~7个剂量组，每组10只鹌鹑（雌雄各半），并设空白对照组，使用溶剂助溶的还需增设溶剂对照组。试验在25±2?C与正常的饲养条件下进行，记录试验鹌鹑的死亡数，对试验数据进行数理统计，求出LD50值及95%置信限。
喂饲法：将农药定量拌入饲料中进行喂饲，试验时间为8天。前5天喂含药饲料，后3天喂正常饲料。正式试验前先做预试，可设置4~5个浓度组，求出受试物质对受试鸟的最低全致死浓度和最高全存活浓度。正式试验时，在此浓度范围内按一定间距设置5~7个浓度组，每个处理10只鹌鹑（雌雄各半）。对照组喂正常饲料。试验在25±2?C与正常的饲养条件下进行，定期观察记录鹌鹑的中毒
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症状和死亡情况。试验观察期为8天，死亡数字8天累计。计算并求出LC50值及95%置信限。
（3） 数据处理
鸟类半数致死剂量LD50或半数效应浓度LC50的计算可采用寇氏法、直线内插法或概率单位图解法估算，也可应用有关毒性数据计算软件进行分析和计算。
寇氏法：
用寇氏法可求出鸟类在24、48、72、96、120、144及168 h的LD50或LC50
值及95%置信限。 Ⅰ：计算公式
LD50?LC50??Xm?i??P?0.5? log 式中，Xm—最高浓度的对数；
i—相邻浓度比值的对数；
?P—各组死亡率的总和（以小数表示）。
Ⅱ：95%置信限的计算
先求标准误：SlogLD50?LC50??i式中，p—1个组的死亡率； q—1-p；
i—相邻浓度比值的对数； n—各浓度组鸟的数量。
的95%置信限?logLD50?LC50??1.96SlogLD50?LC50? 直线内插法
采用线性刻度坐标，绘制死亡百分率对试验物质浓度的曲线，求出50%死亡时的LD50（LC50）值。
概率单位图解法
用半对数纸，以浓度对数为横坐标，死亡百分率对应的概率单位为纵坐标绘图。将各实测值在图上用目测法画一条相关直线，从直线中读出致死50%的浓度对数，估算出LD50（LC50）值。
（4）质量控制
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?pq n① 投喂药品期间，农药含量不能低于规定含量的80%。 ② 试验结束时，对照组死亡率不超过10%。
③ 试验鸟类的生理和行为，应适应试验环境条件和基本食物。
④ 对鸟类低毒农药，设计试验剂量LD50值达1000mg/kg，可不再提高试验剂量。
（5）评价标准
根据毒性测定结果，将农药对鸟类的急性毒性划分为四个等级（见表8）。
表8 农药对鸟类的等级划分
毒性等级 剧毒 高毒 中毒 低毒
急性经口（mg/kg）
LD50≤10 10＜LD50≤50 50＜LD50≤500 LD50＞500
喂饲（mg/kg） LC50≤50 50＜LC50≤500 500＜LC50≤1000 LC50＞1000
（6） 试验报告
① 受试样品名称、来源、纯度。
② 试验生物的名称、来源、大小及饲养情况。 ③ 试验条件：试验温度、方法等。
④ 24、48、72h及7d的LD50或24、48、72、96、120h及8d的LC50值和95%置信限，并给出所采用的计算方法。 ⑤ 对照组及处理组是否出现死亡及异常反应。 ⑥ 试验结果及毒性评价。
2.2.2蜜蜂毒性试验
蜜蜂是一类重要的环境生物，它既采花酿蜜，又传授花粉，具有重要的经济价值。通过测定农药对蜜蜂的LC50或LD50，评价农药对蜜蜂的急性毒性。采用养殖最普遍的意大利成年工蜂作试验蜂种。
（1） 试验材料
试验生物：意大利成年工蜂（Apis meLLifera L），要求供试蜜蜂健康、大小一致。
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