农药对赤眼蜂的毒性评价目前国内外尚无统一的标准，可用安全系数评价农药使用对赤眼蜂的安全性，安全系数为赤眼蜂的半致死浓度LC50与该药的田间推荐施用浓度的比值或农药对赤眼蜂的半致死量LD50与该药的田间推荐施用浓度和虫体接触液量（接触量以室内点滴试验时用0.5?L/头量计）之积的比值，可用如下公式来表示：
赤眼蜂的毒性LC50(mg/L)
安全系数= 或 田间实际使用浓度(mg/ L)
赤眼蜂的毒性LD50(?g/头) 安全系数= 田间实际使用浓度(mg/L)?虫体接触液量(?L/头)?10-3 将农药对赤眼蜂的危害影响风险性等级划分为四级（见表15）：
表15 农药对赤眼蜂的风险性等级划分标准 风险性等级 极高风险性 高风险性 中风险性 低风险性
安全系数 安全系数≤0.05 0.05＜安全系数≤0.5 5＜安全系数≤0.5 安全系数＞5
（6）试验报告
① 受试样品名称、来源、纯度。 ② 试验物种名称、来源、培养方法。 ③ 试验条件：试验温度、光照等。
④ 试验液的浓度及试验开始后24、96及168h的LC50值和95%置信限，并
给出所采用的计算方法。
⑤ 对照组赤眼蜂的死亡率、行为反应异常的比例。 ⑥ 试验结果与毒性评价。
2.2.10天敌两栖类毒性试验
蛙类是两栖类中最常见的害虫天敌，是自然保护的主要对象之一。蛙类的生长分为卵、蝌蚪、幼蛙和成蛙四个发育阶段，其中以蝌蚪期对农药的反应最敏感。农药对两栖类的毒性试验，选用泽蛙的蝌蚪为试验材料。
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（1）试验材料
供试生物：采用泽蛙（Rana Limnocharis）蝌蚪，蝌蚪龄期为孵化10天左右，平均长度（连尾）约16mm。试验前在室内预养3天，试验前一天停止喂食，试验中亦不喂食。
试验药品：供试药品用制剂或纯品，溶于水或植物油中，配制成一定浓度供试验用。对难溶于水的农药，可用少量丙酮或吐温-80助溶，用量不得>0.1mL/L。
试验容器：10L玻璃缸。
试验用水：试验用稀释水为经活性炭处理、存放并曝气处理24 h以上的自来水。水质硬度在150~300 mg/L之间（以CaCO3计），pH在6.0~8.5之间，溶解氧保持在5.8mg/L以上。
试验条件：试验温度20℃左右，自然光照，光暗时间比为16：8，自然交替。 （2）试验方法
试验采用每隔24h更换一次药液的半静态法。正式试验前先作预试，然后在最高安全浓度与最低全致死浓度范围之间按等比级差设5~7个处理，并设空白对照，每缸分别配制不同浓度的药液各5L，充分搅拌均匀，每个处理均设三个重复。在每个试验缸内投放蝌蚪20尾，调节试液温度在20℃左右。试验历时二天，隔24h更换一次药液，试验过程中记录24h与48h蝌蚪的中毒情况和死亡数字，及时清除死蝌蚪，并测定溶解氧和pH。 求出LC50值与95%的可限值。
（3）数据处理
LC50的计算可采用寇氏法、直线内插法或概率单位图解法估算（具体计算方法参见2.2.1数据处理），也可应用有关毒性数据计算软件进行分析和计算。
（4）质量控制
① 驯养期间死亡率不得超过5%；空白对照组死亡率不超过10%。 ② 试验期间，试验溶液的溶解氧含量应不低于5.8 mg/L。 （5）评价标准
农药对蛙类毒性等级划分标准，一般按LC50(48h)值划分为四个等级（见表16）。
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表16 农药对蛙类的毒性等级划分标准 毒性等级 剧毒 高毒 中毒 低毒
48h-LC50 (mg/L) LC50≤0.1 0.1＜LC50≤1.0 1.0＜LC50≤10 LC50＞10
（6）试验报告
① 受试样品名称、来源、纯度和理化性状。 ② 试验生物名称、来源、大小及驯养情况。
③ 试验条件：试验温度、光照等，所采用稀释水的温度、溶解氧浓度及pH
等。
④ 试验液的浓度及24h、48h的LC50值和95%置信限，并给出所采用的计
算方法。
⑤ 对照组蝌蚪的死亡率、行为反应异常的比例。 ⑥ 试验结果与毒性评价。
2.2.11作物的敏感性试验
通过研究作物发育阶段对农药的敏感性，评价长残留农药对主要后茬作物的危害影响。测定作物敏感性的方法有土培法和水培法。
（1） 供试材料
供试植物:选择对农药最敏感的植物或直接受影响的植物作为试验材料。选择三种主要敏感作物进行试验。
试验农药: 采用制剂进行试验。 （2） 试验方法
土培法：选用直径20cm的盆钵，装入土壤，土壤用定量的供试农药充分拌匀，播入10粒种子，然后将盆钵置于温室中，土壤保持一定的含水量，浇水时从底部吸湿法加水。定期（7天、14天，必要时延长时间）观察记录出苗率、苗高、植物受害率。试验结束时，记录出苗率、苗高、苗鲜重、植物受害率、植物死亡数。对抑制根系生长的药物，须记录根鲜重、长度。利用概率统计法计算EC50和95%置信限。
试验时先通过预试确定毒性影响范围，正式试验时，在此范围内按一定的比
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例级差设置若干组不同浓度的处理（以mg/kg干土表示），另设一组空白对照，每个处理设3个重复。
水培法：选用籽粒饱满、大小一致的植物种子，先在合适的条件下催芽，选择根长0.2~0.4cm的发芽种子待用。在培养皿中垫5张滤纸（或石英砂、玻璃珠），加入配制好的农药药液，每皿播10粒已催芽的种子，在25℃恒温箱中先避光培养72h，再光照24h，培养过程中需适量加水，以保持滤纸湿润，培养4d后取出测主根长度。试验时先通过预试确定毒性影响范围，正式试验时，在此范围内按一定的比例级差设置若干组不同浓度的处理（以mg/L表示），另设一组空白对照，每个处理设3个重复。用概率统计法求出农药对根长的半抑制浓度EC50值与95%的可信限，用EC50值的大小评价农药对植物的毒性大小。
（3）数据处理
用概率统计法求出EC50值及95%可信限。 （4）质量控制
① 发芽率低的种子不能用于试验。
② 记录试验土壤的类型、基本性质；记录试验期间光强、温度、湿度、光周期、浇水周期及方法、害虫控制等。
③ 试验设计最小设五个处理浓度，试验必须做出相应的曲线能得到EC50及EC10值。
（5）评价标准：
农药对作物的毒性评价目前国内外尚无评判标准，可用安全系数评价农药使用对作物的安全性，安全系数为农药对作物的EC10与后茬作物种植前土壤中农药浓度的比值，可用如下公式来表示：
作物的EC10
安全系数= 土壤农药浓度
将农药对作物的危害影响风险性等级划分为四级（见表17）：
表17 农药对作物的风险性等级划分标准
风险性等级 极高风险性 高风险性 中风险性 低风险性
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安全系数 安全系数≤1 1＜安全系数≤2 2＜安全系数≤10 安全系数＞10
（6）试验报告
① 供试植物：学名，来源。
② 供试农药：含量，来源，主要使用情况。
③ 供试土壤：pH、有机质含量、阳离子代换量、机械组成等。 ④ 主要仪器设备：培养箱、分析仪器等。 ⑤ 试验条件：温度、持水量、试验浓度。
⑥ 试验结果：各处理浓度及处理的出苗率、苗度、苗干重、根长、受害程度、死亡数、EC50、EC10等。
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