灭菌（sterilization） 杀死和／或去除所有微生物及其孢子的过程。 11.1 实验室材料的清洁
清洁是指去除污垢、有机物和污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿布拖擦。尘土、污物以及有机物是微生物的栖身之所，并可能影响除污染剂（抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂）的作用。
必须通过预清洁才能实现洗涤和灭菌的目的。许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质中。
预清洁时必须使用与以后使用的杀菌剂化学性质上相容的物质。普遍采用的是相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。 11.2 消除局部环境的污染
可以联合使用液体和气体消毒剂来清除实验室空间、用具和设备的污染。清除表面污染时可以使用次氯酸钠（NaOCl）溶液；含有0.1％有效氯的溶液用于普通的环境卫生设备，而当处理高危环境时，建议使用高难度（5g/L）的溶液。在清除环境污染时，含有3％过氧化氢的溶液也可以作为漂白剂的代用品。
可以通过加热多聚甲醛或煮沸福尔马林所产生的甲醛蒸汽熏蒸来清除房间和仪器的污染。这是一项需要由专门培训的专业人员来进行的、非常危险的操作。产生甲醛蒸汽前，房间的所有开口（如门窗等）都应用密封带或类似物加以密封。熏蒸应当在室温不低于21℃且相对湿度高于70％的条件下进行。
清除污染时气体需要与物体表面至少接触8小时。熏蒸后，该区域必须彻底通风后才
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能允许人员进入。在通风之前需要进入房间时，必须带适当的防毒面具。可以采用气态的碳酸氢铵来中和甲醛。
采用过氧化氢溶液对小空间进行气雾熏蒸同样有效，但需要专门的蒸汽发生设备。 11.3 清除生物安全柜的污染
清除I级和II级生物安全柜的污染时，要使用能让甲醛气体独立发生、循环和中和的设备。应当将适量的多聚甲醛（空气中的终浓度达到0.8％）放在电热板上的长柄平锅中（在生物安全柜外进行控制）。然后将含有比多聚甲醛多10％的碳酸氢铵置于另一个长柄平锅中（在生物安全柜外进行控制）。在柜外将该平锅放置到第二个加热板上，在安全柜外将电热板接上插头通电，以便需要时在柜外通过开关电源插头控制盘子的操作。如果相对湿度低于70％，在使用强力胶带（如管道胶带）密封前部封密板前，还要在安全柜内部放置一个开口的盛有热水的容器。如果前部没有封密板，则可以用大块塑料布粘帖覆盖在前部开口和排气口以保证气体不会泄漏进入房间。同时供电线穿过前封密板的穿透孔时须用管道胶带密封。
将放有多聚甲醛平锅的加热板插上插头接通电源。在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以断电。熏蒸的生物安全柜至少静置6小时，然后给放有第二个平锅的加热板插上插头通电，使碳酸氢铵蒸发。然后拔掉电源插头，接通生物安全柜电源两次，每次启动约2秒钟来让碳酸氢铵气体循环。在移去前封密板（或塑料布）和排气口罩单前，应使生物安全柜静置30分钟。使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。 11.4洗手/清除手部污染
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处理生物危害性材料时，只要可能均应戴合适的手套。同时，实验室人员仍然需要经常地、彻底地洗手。处理完生物危害性材料和动物后以及离开实验室前必须洗手。
大多数情况下，可使用普通的肥皂和水彻底冲洗手部。在高危情况下，应使用杀菌皂液；手要完全抹上杀菌皂液，搓洗至少10秒种，用干净水冲洗后再用干净的纸巾或毛巾擦干（如果有条件，可以使用暖风干手机）。
应使用肘控的水龙头洗手。如没有安装，应使用纸巾或毛巾来关上水龙头，以防止再度污染干净的手。
如果没有以上推荐的洗手方法或洗手不方便，应该用酒精擦手来清除双手的轻度污染。 11.5 消毒和灭菌方法
物理和化学的去污染方法包含三个方面：加热、液体去污剂、水蒸气和空气。 11.5.1 加热
加热的应用, 湿热和干热被推荐为杀菌最有效的方法. 在一般环境下，高压灭菌器加热到1210C快速产生蒸汽是最方便的方法。干热1600C-1700C，2-4小时在不具有渗透性、非有机体的物质（如玻璃）是可行的净化方法, 但是甚至在有机体或非有机体的浅层也不能被绝缘。焚烧是另一种净化方法。焚烧对人和动物的病理性废物是一个有效的方法。
实验人员应对热的固体和液体有害物的处理相当熟悉，并要注意如果滥用设备那在高压下水蒸气将会喷射出来，因此只能在允许范围内使用。在高压蒸汽下被处理过的液体是非常热的，如果要从灭菌器中取出必须等处理后过段时间再取出；如果立即取出，
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会引起容器内的液体产生暴沸，并飞溅到处理容器的人员身上。 11.5.2 液体去污剂
在通常情况下, 足够浓度的液体去污剂常用于表面去污染，而液体废物的去污剂最终的处理是进入污水管道系统。液体去污剂的去污效果不佳，常常是因为有些因素（如应用场所的温度、接触时间、pH、当时情况、播散状况、穿透能力、有机物的反应）没有被适当地考虑。这些因素中的一些很小的变化可能会造成去污剂的效力上大的不同。 因此甚至在很有利的情况下，当最终要求必须无菌时，液体去污剂也不是完全可信赖的去污方法。
有许多可用的液体去污剂在商商品名上有很大的变化。在通常情况下, 这些去污剂能被分类为：卤素，酸和碱，重金属盐, 四铵化合物，苯酚，乙醛类，酮类，酒精和铵。但是去污剂的作用越大，它的危害性可能也越大（如腐蚀性）。对于所有传染性的情况没有一种（去污剂）是具有同等作用和效力的。
使用普通原料的消毒剂处理中必须特别小心。 从原料到制成可用的溶液对工作人员的安排必须考虑到有潜在的危险，要进行安全培训以及合适的个人防护设备保证毒性不接触眼睛，皮肤和呼吸部位。 11.5.3 蒸气和气体
蒸汽和气体的种类决定了去污剂的性质，其中最常用的是甲醛和乙烯氧化物。当在一个密闭的系统中，在一定的温度、湿度控制下，它们能发挥很好的去污作用。蒸汽和气体去污剂最初被用于生物安全柜和与之相关的空气处理系统和空气过滤系统、
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抵抗液体表面去污剂渗透的大容积或固定的设备、或用其他去污方法会受到损害的仪器和光学（设备）和门、建筑物和与之相关的空气处理系统等。
为了避免甲醛和乙烯氧化物蒸汽的吸入，（贮存）这些化学品的容器的材料应尽可能地限制这些蒸汽（的溢出）和应放置在适当通风的化学品贮存区。当准备进行稀释和取用这些化学品时， 操作者应按操作规程严格操作以防止（这些化学品）的暴露，必要时应穿戴呼吸防护装置。乙烯氧化物已归入（对人体具有）潜在危害的诱变剂；甲醛也（对人体）具有毒性和超敏性反应。乙烯氧化物的用途非常有限，通常用于外科和临床领域。
11.6 高压灭菌器程序
湿热引起蛋白质的变性比干热所需要的温度低且时间短。最主要的物理去污控制作用之一是在一个密闭的小室（空间）里高压灭菌器产生湿热和高压。大多数情况，下列组合可以确保高压灭菌器的灭菌效果。
a.134℃、3分钟 b.126℃、10分钟 c.121℃、15分钟 d.115℃、25分钟
应使用生物指示剂验证高压灭菌操作是否达到效果。当操作高压灭菌器时必须穿戴个人防护设备（简称PPE）如橡胶围裙和抗热防水的手套。
高压灭菌器里物品的放置应保证蒸汽能穿透至需消毒的所有部分，所以物品间不能
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