DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪
分 析 分 析 标 准 操 作 规 程
本节产适用于DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪的9个分析项目编写了分析项目标准操作规程（SOP），虽然不明全部项目，但反映了该仪器与试剂的特点。Dimension RxL型自动生化分析仪大部分分析通道是不开放的，使用专用的配套试剂。本节SOP的编写按照“分析系统”的要求，所用的试剂、校准品和质控品均采用DUPONT的配套产品（美国Dada Behring公司出品）。
一、血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：血清丙氨酸氨基转移酶（缩写ALT）测定；组合项目申请：肝功能项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 标本采集
2.1.1 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中，式采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识
2.1.4 标本采用后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足。
2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存
2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2 标本保存时间：室温可稳定48h，2~8℃稳定7d，-20℃稳定一个月。 2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置2~8℃冰箱内保存7d。 2.3 标本采集的注意事项
2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理
丙氨酸 +α－酮戊二酸 ALT 谷氨酸 + 丙酮酸 丙酮酸 +NADH +H+ LDH 乳酸 + NAD+
采用双波长连续监测法测定NADH减少的速率，推算出ALT的活力。 4 试剂及其他用品
4.1 试剂：连续监测法测定丙氨酸氨基转移酶试剂盒，由Dade Behring公司出品。试剂盒产品DF43/DF43A。
4.2 试剂盒保存：保存于2~8℃，不开盖情况下至标签的失效期。密封或未水化试剂放于仪器中稳定30d，启用后稳定72h。
4.3 试剂盒准备：四试剂型，1~3孔为LDH与NADH片剂，4~6孔为αKG片剂，仪器自动化。其余为液态试剂，即开即用，无特殊准备。
4.4 试剂盒主要成分：LDH 3000U/L，NADH0.22mmol/L，P5P 0.15mmol/L，α—KG片剂20 mmol/L，丙氨酸260 mmol/L，Tris缓冲液100 mmol/L。 5 校准品与校准模式
5.1 校准品
5.1.1 校准品来源：与试剂盒配套的Dade Behring校准液，产品与DC19。 5.1.2 校准类型和数目：线性三个校准点。由此建立校准曲线并自动得出C0与C1参数。
5.1.3 校准周期：校准间隔时间3个月或更换试剂批号前。但在：①出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。
5.1.4 校准液重建方法：冻干校准品，临用前精确用离子水溶解。 6 质控品与室内质控规则
6.1 质控品采用由德灵公司提供的DADE两个不同水平定值质控血清。 6.2 质控液重建方法：冻干质控血清，使用前先将质控血清按要求复溶，完全溶解后充分混匀，分装塑料小管后低温冰冻存放。每次使用取一支置室温融化并混匀。
6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。
6.4 质控规则：采用L-J质控图，以±s为控制限。标准差由本实验室实验数据导出。
6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及纠正，并在确认重复到控制状态后开始标本检测。 7 适用仪品
适用Dimension品牌各种型号的全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤
装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 →标本测定 → 结果复核 → 报告。
9 主要分析参数
标本：35μl，试剂1：30μl，试剂2：80μl，稀释剂：215μl，温度：37℃，主波长：340nm，次波长：700 nm，测定模式：双波长连续监测法。 10 结果计算
计算公式：ALT浓度（U/L）=（△A（340-700）nm×C1）+C0（U/L） 注：C0为校准曲线y 轴上的截距，C1为校准曲线的斜率。 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。 11 检验结果的报告及范围
11.1 结果的报告
11.1.1 结果经审核后,确认准确无误后发出报告.
11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 11.2 报告范围：0~1000U/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。 12 操作性能
12.1 精密度：批内CV＜5.0%；总CV＜8.0%。 12.2 线性范围：0~1000 U/L。
12.3 方法的有限性干扰因素：谷氨酸脱氢酶活性较高是在有氨的条件下可导致检测结果偏高。
13 参考范围及医学决定水平
参考范围：ALT＜50U/L。 14 临床意义
14.1 ALT存在于各种组织细胞内,以肝细胞中含量最多,正常时血清中ALT活性很低。
14.2 肝细胞因感染病毒而受损伤，尤其是处于急性期时，ALT从细胞内逸出至血液中，血清中ALT活性可明显升高，因此是各种肝炎的一个重要指标。
14.3 某些药物对肝细胞有毒性副作用，过量或长期使用可致肝脏受损，亦可以ALT活性升高反映。
15 结果审核以及分析与相关项目的联系
15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。
15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。
15.3 相关项目：审核与AST、ALP、γ-GT、TBIL、TP、清蛋白等之间的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。
16 威胁生命的“紧急值”及报告规定
16.1 ＞1000 U/L为应引起临床重视的紧急值，可能有较严重的肝细胞坏死或受损的情况。
16.2 处理程序
16.2.1 检测人员立即报告审核者。
16.2.2 审核者首先根据审核程序，分析质控、校准、试剂的情况是否正常，当时其他已做标本本项目的总体情况有无异常，确认实验有关的基础是正常是正常状态中。
16.2.3 出现紧急值的标本有无异常，该标本其他相关项目有无异常，尤其是其他肝功能指标的情况。
16.2.4 对该标本进行一次重复测定，确认紧急值是否重现。
16.2.5 报告技术质量主管与科主任，立即与临床联系，了解临床相关情况。 16.2.6 确认此紧急值是可报告的，由技术主管或科主任立即电话向负责临床医生报告，同时作好电话记录，包括电话报告时间和对方接听人员的标识，并及时签发正式检验结果报告。 17 有关引用程序与文件
17.1 Dimension RxL全自动生化分析仪仪器标准操作规程。 17.2 生化检验室内质控标准操作程序。 17.3 检验结果审核程序。 17.4 标本送检和接收程序。 18 参考文献
18.1 陆永绥，张伟民主编。临床检验管理与技术规程。杭州：浙江大学出版社，2004。
18.2 丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒说明书。
二、血清酸性磷酸酶测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：血清酸性磷酸酶（缩写ACP）测定；组合项目申请：肿瘤标志物组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 标本采集
2.1.1 常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3 标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上
急查标识。
2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列村本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足。
2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单位对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存
2.2.1 因红细胞及血小板内富含ACP，接收标本后应尽快分离血清。 2.2.2 标本保存时间：血清置室温中1~2h，ACP活性至少降低50%，如不能立即测定，应将血清管加紧塞冰冻保存，或每ml血清中加50Μl5mol/L醋酸或加10mg枸椽酸二钠溶液，置室温可稳定数小时，置于2~8℃
2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置2~8冰箱内保存7d。 2.3 标本采集的注意事项
2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是EDTA。 3 方法原理
酸性（pH5.6）条件下磷酸百里在酚酞（TMP）被ACP水解产生百里酚，加入NaOH终止反应并使pH增高至12，使百里酚离子化，在600nm波长处有吸收峰，百里酚产生的量代表ACP的活力。
本法需做空白管，测定用双波长。 4 试剂及其他用品
4.1 试剂：酸性磷酸酶测定试剂盒，由美国Dade Behring公司出品，试剂盒产品号DF11。
4.2 试剂盒保存：未开瓶的试剂贮2~8℃，密封或未水化试剂在仪器里稳定30d，开封水化后在仪器里稳定72 h。
4.3 试剂盒主要成分：R1：片剂，主要成分为TMP（0.5mmol/L）；液态NaOH（1.0 mmol/L）。 5 校准品与校准模式
5.1 校准品：与试剂盒配套的Dade Behring校准液，产品号DF23。 5.2 校准类型和校准点数目：线性模式，三点校准。由此建立校准曲线并自动得出C0与C1参数。
5.3 校准周期：校准间隔时间3个月或更换试剂批号前。但在：①出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。