- Dimension - RxL型自动生化分析仪操作规程(4)

2020-04-21 02:03

单独检验项目申请:血清甘油三酯(缩写TG)测定:组合项目申请:脂类测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理

2.1 标本采集

2.1.1 常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符

2.1.3 标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间,如为急诊标本,加上急查标识。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1标本量不足。

2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存

2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2 标本保存时间:2~8℃稳定3d。长期贮存应置于-7℃。

2.2.3 已完成 测试的标本保持完整的识别号,置2~8℃冰箱内保存7。 2.3 标本采集的注意事项

2.3.1 标准化要求:采血前2周保持平时的饮食习惯,3 d内避免高脂饮食,24内不饮酒,必须空腹12h后采集标本。

2.3.2 采血前最好停用影响血脂的药物(如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等)数天或数周,否则应记录用药情况。

2.3.3 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理

脱氢酶法,双波长连续监测法。 TG+H20 LPL 甘油+脂肪酸

甘油+NAD+ GDH 二羟内酮+NADH+H+

340nm波长处测定NADH增高速率,推算出TG含量。采用双波长连续监测法测定。

4 试剂及其他用品

4.1 试剂:德灵甘油脱氢酶法测定甘油三酯试剂盒,由美国 Dade Behring 公司出品,试剂盒产品号DF69.

4.2 试剂盒保存:保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。密封试剂放于仪器中稳定30 d。试剂船的1~6孔开封启用后稳定72h,第7孔启用后稳定14 d。

4.3 试剂盒准备;试剂中含有片状试剂,临用时由仪器自动水化、混匀,无特殊准备。

4.4 试剂盒主要成分:LPL 1590U/L,GDH1.06U/L,NAD+5.27mmol\\L,K2CO30.17mol\\L。 5 校准品与校准模式

5.1 校准品:与试剂盒配套的Dade Behring 校准液,产品号DC20。 5.2 校准类型和校准点数目:线性模式,3个校准点。由此建立校准曲线并自动得出C0与C1参数。

5.3 校准周期:校准间隔时间3个月或更换试剂批号前。但在:①出现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器的重要零件更换后,进行一次校准。

5.4 校准液重建方法:液态校准液即开即用,无须特殊准备。 6 质控品与室内质控规则

6.1 质控品采用由德灵公司提供的DADE两个不同水平定值质控血清。 6.2 质控液重建方法:冻干质控血清,使用前先将质控血清按要求复溶,完全溶解后充分混匀,分装塑料小管后低温冰冻存放。每次使用取一支置室温融化并混匀。

6.3 质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血精各一次。 6.4 质控规则:采用L-J质控图,以±3So 控制限。标准差由本实验室实验数据导出。

6.5 如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施时纠正,并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。 7 适用仪器

适用各种Dimension系列全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤

装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。 9 主要分析参数

标本:5μl,试剂1:95μl,试剂2:36μl,试剂3:75μl,稀释剂:165μl,温度:37℃,主波长:340nm,次波长:383nm,测定模式:双波长连续监测法。 10 结果计算

计算公式:甘油三酯浓度(mmol/L)=(△ A(340-383)m m×C1)+C0(μmol\\L) 注:C0为校准曲线y轴上的截距,C1为校准曲线的斜率。

仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。 11 检验结果的报告及范围

11.1 结果的报告

11.1.1 结果经审核后,确认准确无误后发出报告。

11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、时间、操作者和审核者签名,并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 11.2 报告范围:0~5.70 mmol/L ,超过此范围的结果报告时必须附有证明结果准确可靠的文字说明,并经上级主管技师审核后报告。 12 操作性能

12.1 精密度:批内CV<2.2%,总CV<4.3%。 12.2 线性范围:0~70 mmol/L。

12.2 方法的有限性及干扰因素:Hb达5g/L时对反应有负干扰。 13 参考范围及医学决定水平

13.1 参考范围:成年人血清:0.40~1.70 mmol/L。 13.2 医学决定水平

血清TG含量有随年龄增高的倾向,我国血脂异常防治建议提出成年人血清TG水平为:

合适水平 <1.69 mmol/L(1.49g/L); 边缘水平 1.70~2.25mmol/L(1.50~1.99g/L); 甘油三酯高值 2.26~5.64 mmol/L(2~5g/L); 甘油三酯极高值 >5.64 mmol/L(>5g/L)。 14 临床意义

14.1 高TG血症常伴有低HDL-C血症,而HDL-C与动脉粥样硬化呈负相关,因此高TG血症与动脉粥样硬化也有一定的相关性。

14.2 高TG血症有原发性和继发性,原发性高TG血症多有遗传因素,包括家庭性高TG血症与家庭混合型高脂蛋白血症。继发性高TG血症见于糖尿病、糖原贮积症、甲状腺功能减退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒等。

14.3 一般认为单独高TG不是冠心病的独立危险因素,同时伴以高TG、高LDL-C、低HDL-C等情况时才有病理意义。目前将血清TG水平作为冠心病的预防和治疗时的第二目标。

14.4 通常将高脂蛋白血症分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ6型,除Ⅱ。型外都有高TG,有的TG可高达1000mg/dl以上。

14.5 影响TG水平的因素有:①年龄与性别,TG水平往往随年龄上升;②长期高饱和脂肪酸和高热量饮食;③遗传因素;④其他,如缺少运动、脑力劳动、精

神紧张等可能使TG升高。

14.6 不应凭一次血脂检测结果作出血脂水平异常的诊断,有怀疑时应在两月内进行再次或多次测定,且两次测定至少要相隔一周;在判断是否存在高脂血症或决定防治措施之前,至少应有两次血脂检验的记录。 15 结果审核以及分析与相关项目的联系

15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。

15.2 认真审核每一个测定结果,审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。

15.3. 相关项目:审核与总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇以及高密度脂蛋白胆固醇等之间的关系,如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。 16 有关引用程序与文件

16.1 Dimension RxL 全自动生化分析仪仪器标准操作规程。 16.2 生化检验室内质控标准操作程序。 16.3 检验结果审核程序。 16.4 标本送检和接收程序 17 参考文献

17.1 陆永绥,张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社,2004.

17.2 DABE BEHRING 甘油三酯测定试剂盒说明书

五、血清高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程

1 检验申请

单独检验项目申请:血清高密度脂蛋白胆固醇(缩写HDL-C)测定;组合项目申请:脂类测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理

2.1 标本采集

2.1.1 常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3 标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间,如为急诊标本,加上急查标识。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。

2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1 标本量不足

2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存

2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2 标本保存时间:2~8稳定3d,-20℃保存急定一个月,-70℃保存可稳定两年。应避免标本反复冻溶为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号,置2~8℃冰箱内保存7d。 2.3 标本采集的注意事项

2.3.1 标准化要求:采血前2周保持平时的饮食习惯,3d内避免高脂饮食,24h内不饮酒,空腹12h后采集标本。

2.3.2 采血前最好停用影响血脂的药物(如高脂药、避孕药、某些降压药、激素等)数天或数周,否则应记录用药情况。

2.3.3 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理

匀相的二步HDL-C直接测定法,血清先与试剂I共同孵育,血清中含 apo B 的脂蛋白(LDL,VLDL和CM)与试剂中的聚阴离子和多聚体形成复合体,同时抑制剂(与含apo B脂蛋白有亲和力的表面活性剂)在复合体表面形成遮蔽体,可抑制复合体与胆固醇酶试剂反应。试剂Ⅱ为胆固醇氧化酶法测定试剂,加到反应混合物中后,HDL被裂解,HDL中的胆固醇与酶试剂反应并经Trinder反应显色。测定波长500nm。 4 试剂及其他用品

4.1 试剂:直接法测定高密度脂蛋白胆固醇试剂盒,由美国Dade Behring公司

出品,试剂盒产品号DF48。

4.2 试剂盒保存于2~8℃,不开盖情况下至标签的失效期。密封试剂放于仪器

中稳定。1~3孔启用后稳定30d,第4孔启用后稳定10d,5~6孔启用后稳定15d。

4.3 试剂盒准备:1~3孔为片状试剂,临用时由仪器自动水化、混匀,其余无

特殊准备。

4.4 试剂盒主要成份:聚阴离子,4-氨基安替比林,MES缓冲液,胆固醇氧化

酶,胆固醇酯酶,过氧化物酶,NaOH。

5

校准品与校准模式

5.1 校准品:与试剂盒配套的Dade Behring校准液,产品号DC48。

5.2 校准类型和校准点数目:线性模式,3个校准点。由此建立校准曲线并自

动得出C0与C1参数。


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