表16 回收率试验结果
组分
取样量/mg 23.30 25.82 23.66
葛根素
27.26 27.48 25.12 23.30 25.82 23.66
大豆苷
27.26 27.48 25.12 23.30 25.82 23.66
染料木苷
27.26 27.48 25.12 23.30 25.82 23.66
大豆素
27.26 27.48 25.12 23.30
染料木素
25.82 23.66
127.02 128.04 117.05 3.11 3.45 3.16
473.60 473.60 473.60 552.00 552.00 552.00
26
样品含量/ug 加入量/ug 2806.86 3110.44 2850.23 3283.91 3310.41 3026.11 595.97 660.43 605.18 697.26 702.89 642.52 46.10 51.09 46.82 53.94 54.37 49.70 108.57 120.31 110.24
1996.80 1996.80 1996.80 1996.80 1996.80 1996.80 1031.20 1031.20 1031.20 1031.20 1031.20 1031.20 505.60 505.60 505.60 505.60 505.60 505.60 473.60 473.60 473.60
测得总量/ug 4832.45 5157.95 4885.20 5290.25 5339.97 5045.34 1651.67 1720.49 1662.80 1753.52 1760.85 1706.85 547.06 550.39 547.06 552.20 553.74 551.64 575.67 589.64 577.95 592.30 594.57 583.90 556.35 556.47 556.81
回收率/% 101.44 102.54 101.91
平均回收率/% RSD/%
101.52
100.48 101.64 101.12 102.38 102.80 102.56
102.66
102.43 102.60 103.21 99.08 98.75 98.94
98.90
98.55 98.77 99.28 98.63 99.10 98.76
98.64
98.24 98.51 98.57 100.23 100.19 100.30
100.16
0.69
0.30
0.26
0.29
0.20
27.26 27.48 25.12
3.64 3.67 3.35
552.00 552.00 552.00
554.64 555.96 557.41
99.82 100.05 100.37
注：测得量=供试液中各组分测得的总量-样品中所含各组分的量
4.9 重复性试验 取同一批号样品(自制-安徽，批号：20100506)的均匀细粉适量（约相当于葛根素5mg），共6份，精密称定，分别置6个25ml量瓶中，照“2.2”项方法制备供试品溶液，照“3”项方法测定，按标准曲线法以峰面积计算含量。结果见表17。
表17 重复性试验结果
序号 1 2 3 4 5 6 平均 RSD（%）
取样量
（mg） 51.32 50.10 49.45 54.92 48.51 52.19
葛根素含量（mg/g） 121.8022 121.0859 121.5911 119.6439 119.1711 119.5030 120.4662 0.96
其它异黄酮含量（mg/g）
大豆苷 25.7153 25.6903 25.5885 25.5271 25.4796 25.4685 25.5782 0.41
染料木苷 1.9791 1.9841 1.9745 1.9733 1.9784 1.9830 1.9787 0.22
大豆素 4.6495 4.6853 4.6415 4.6426 4.6694 4.6689 4.6595 0.38
染料木素 0.1342 0.1340 0.1335 0.1328 0.1336 0.1333 0.1335 0.39
4.10 溶液稳定性试验 取同一供试品溶液分别在不同时间点0h、5h、10h、20h、30h、40h、60h、80h各进样10μl，记录各色谱峰的峰面积，结果表明在80小时内稳定性良好。见表18
27
表18 溶液稳定性试验结果表
时间（h） 0 5 10 20 30 40 60 80 平均 RSD（%）
峰面积
葛根素 175.258 176.508 173.994 173.967 173.979 173.913 174.801 176.588 174.876 0.65
大豆苷 69.742 71.292 70.076 70.787 70.506 70.619 71.626 72.348 70.875 1.20
染料木苷 48.982 49.152 48.935 49.165 48.990 49.092 49.164 49.181 49.083 0.20
大豆素 48.549 48.801 48.729 49.043 48.890 49.042 49.112 49.237 48.925 0.46
染料木素 56.091 56.461 56.327 56.426 56.293 56.369 56.507 56.756 56.404 0.34
4.11 样品含量测定：精密称取本品适量，照“2.2”项方法制备供试品溶液，同时照“2.1”项方法制备对照品溶液，照“3”项方法测定，记录各色谱峰的峰面积，按标准曲线法以峰面积计算含量。结果见表19：
28
表19 含量测定结果表
其它异黄酮含量（mg/g） 葛根素含量生产厂家 批号 （mg/g） 厂家A 厂家A 厂家B 厂家B 厂家B 厂家C 厂家C 厂家C 厂家C 厂家D A-1 A-2 B-1 B-2 B-3 C-1 C-2 C-3 C-4 D-1 0.87 153.46 418.05 223.61 959.40 427.14 824.22 922.26 264.56 96.18 8.23 136.32 130.39 134.07 146.15 18.73 20.36 83.67 84.49 77.01 大豆苷 未检出 38.82 51.25 59.42 2.33 52.51 2.76 2.31 67.88 14.58 1.74 34.52 27.69 33.05 36.87 2.37 2.59 25.38 25.34 23.12 染料木苷 未检出 3.42 2.22 5.29 1.57 2.27 1.67 1.57 6.99 1.26 0.16 2.50 2.14 2.57 3.08 0.14 0.21 2.37 2.36 2.13 大豆素 未检出 4.25 1.67 7.83 0.37 1.70 0.46 0.37 9.70 3.66 0.89 3.11 5.04 4.04 3.28 6.14 6.97 1.85 1.84 1.67 染料木素 未检出 0.20 未检出 0.27 未检出 未检出 未检出 未检出 0.31 0.19 0.05 未检出 0.14 0.18 0.17 0.15 0.18 0.06 未检出 0.05 总量 总量的比值 它异黄酮的葛根素与其未检出 46.69 55.14 72.82 4.27 56.47 4.88 4.26 84.89 19.70 2.83 40.13 35.01 39.84 43.40 8.80 9.95 29.66 29.54 26.97 3.29 7.58 3.07 224.68 7.56 168.90 216.49 3.12 4.88 2.91 3.40 3.72 3.37 3.37 2.13 2.05 2.82 2.86 2.86 自制（广西药材） 20100503 自制（四川药材） 20100504 自制（安徽药材） 20100506 自制（四川药材） 20100601-2 自制（河南药材） 20100601-3 自制（广西药材） 20100601-1 自制（安徽药材） 20100601-4 厂家E 厂家E 厂家E 0901 0902 0903 样品稳定性试验 取葛根提取物一批(自制-四川，批号：20100504)，按《中国药典》2010年版二部附录ⅩⅨ C的方法进行稳定性研究—影响因素试验，包括高温、高湿及强光照射试验。
重点考察的项目有性状（外观）、吸湿性及含量。结果见表20
29
表20 样品稳定性试验-影响因素试验结果
时间影响因素 （天） 高温 10 5 高湿（75%） 10 高湿（92.5%） 强光 10 5 10 5 性状 （外观） 棕黄色粉末 棕色粉末 棕黑色粉末 膏状、棕黄色 稀膏状、棕黄色 稀膏状、棕黄色 溶液状、霉变 棕色粉末 棕黑色粉末 其它异黄酮含量（mg/g） 吸湿性葛根素含（%）（增、染料木染料木量（mg/g） 大豆苷 大豆素 减重） 苷 素 -3.81 -4.35 23.29 25.62 总量 0 5 136.32 136.18 135.92 135.98 136.39 135.16 136.03 135.77 136.15 34.52 33.87 33.59 34.16 34.61 33.96 34.87 33.91 33.19 2.50 2.45 2.45 2.47 2.52 2.45 2.53 2.44 2.41 3.11 3.06 3.04 3.10 3.14 3.09 3.15 3.05 2.99 未检出 40.13 未检出 39.38 未检出 39.07 未检出 39.73 未检出 40.27 未检出 39.50 未检出 40.56 未检出 39.41 未检出 38.59 48.00 56.90 2.36 3.48 结果表明：本品极易吸潮，同时在高温及强光照射下，性状-外观易发生改变。因此本品应密封，置凉暗干燥处。
葛根提取物技术要求的讨论
葛根素的含量及其它异黄酮总量的限度、葛根素与其它异黄酮总量的比值 所测样品结果表明：自制样品的葛根素与其它异黄酮总量的比值均在2～4之间；购买样品的葛根素与其它异黄酮总量的比值大部分在8以下，但有的葛根素的含量高达96%，而其它异黄酮的总量最低只有0.4%左右，且葛根素与其它异黄酮总量的比值最高达225。据了解，目前市场上已有葛根素的化学合成原料购买。
为了防止不法生产厂家进行葛根素的化学合成原料的非法添加，本技术要求中一方面规定葛根素与其它异黄酮总量的限度，还对葛根素与其它异黄酮总量的比值进行了控制。但自制样品量有限，葛根素含量与其它异黄酮的总量没有充足的数据量。
30