中介是介于敏感和耐药之间的一个实验缓种区域,有二层意义;一是反映在操作中可能因控制不好出现的结果有误,应重复试验或改做MIC。二是提示高于正常给药或在某些生理药物浓集的部位(如尿液中喹诺酮类)时细菌可被抑制
7. 简述用细菌制片和进行革兰染色的基本步骤。
制片: 取生理盐水一滴,置玻片上,用接种环挑取菌落,将细菌放在生理盐水内研匀成薄的菌膜后,自然干燥,并经火焰固定。
染色: (1)初染 加结晶紫染于涂片上,染1min后,用水洗去染液。(2)媒染 加碘液染1min,水洗。(3)脱色 加95%乙醇,不时摇动约30s,至无紫色脱落为止,水洗。(4)复染 加稀释石炭酸复红染30s,水洗,干后镜检
8. 简述甲基红试验的原理。
某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸, 并进一步分解丙酮酸产生甲酸、乙酸、乳酸等使PH下降至4.5以下, 加入甲基红试剂后呈红色, 为阳性。若分解葡萄糖产酸量少, 或产生的酸进一步分解为其他非酸性物质, 则PH在6.2以上, 加入甲基红试剂后呈黄色, 为阴性。
9. 简述金黄色葡萄球菌的最低鉴定特征。 (1)革兰阳性球菌, 呈葡萄串状排列;
(2)血平板上产生透明溶血环; (3)触酶试验阳性; (4)血浆凝固酶试验阳性; 10. 简述细菌鉴定的基本思路。
细菌鉴定的基本思路是首先进行革兰染色以区分细菌的基本形态和革兰染色性。根据形态和染色性的不同做一些大的分类试验,如革兰阴性杆菌做氧化酶试验,革兰阳性球菌做触酶试验,其后再进行不同的生化试验,必要时进一步进行血清学试验。
11. 请叙述血液感染的细菌学检验程序。
无菌采集血液标本→增菌培养(需氧或厌氧培养)→有菌生长取其菌落
具体步骤:(1)涂片、染色、镜检 (2)直接药敏试验→初级报告
(3)分离培养→观察菌落,取菌落涂片、染色、镜检。纯培养→血清学鉴定、生化鉴定、药敏
试验→出示报告。 第七章 免疫学检验
1. 比较补体两条主要激活途径的不同点。 答案: 表1 两条激活途径的主要不同点 2. 补体的生物学活性是什么?
答案:补体的生物学活性是指补体活化过程的产物表现出的具有扩大免疫效应的多项生
物学活性,根据这些产物的活性特点可分为五类。
(1) 细胞溶解作用即膜攻击作用 新生的C5b可插入就近的细胞膜上,进而有C6、C7、
和C9与膜上有C5b组成膜攻击单位C5b·6·7·8·9n,构成可让细胞膜内外物质自由出入的通道壁,造成细胞或细菌的破裂死亡。
(2) 调理作用 与病原体或免疫复合物共价键结合的C3b,还可与吞噬细胞表面的C3b受体(CR1)结
合,以促进其吞噬过程,成为补体的调理作用。
(3) 引起炎症反应 引起炎症反应(的物质),C3a、C4a、C5a有过敏毒素作用,C5a有对粒细胞趋
化作用,其综合作用效果是导致组织充血、水肿及渗出等炎症表现。
(4) 清除免疫复合物即补体(C3b)的免疫粘连作用 在替代活化途径和经典活化途径
新产生的C3b,都可以借其不稳定的硫酯键断裂,直接与病原体(或其成分)或免疫复合物中的抗原成分共价性结合。和病原体或免疫复合物共价结合的C3b,可再与血小板或人红细胞表面的C3b受体(CR1)结合,使这些病原体或免疫复合物粘附于血小板或人的红细胞上,成为免疫粘连作用。免疫粘连作用不仅可减少血液中游离的免疫复合物及病原体,而且被粘附于血小板或红细胞表面的免疫复合物或病原体易被吞噬细胞捕捉吞噬,消除它们对机体的危害。
(5) 免疫调节作用 补体可对免疫应答的各个环节发挥调节作用:① C3可参与捕捉、
固定抗原,使抗原被APC处理与提呈;②补体成分可与多种免疫细胞相互作用,调节细胞的增殖分化,例如C3b与B细胞表面CR1结合,可使B细胞增殖分化为浆细胞。CR2能结合C3d,iC3b及C3dg,助B细胞活化;③补体参与调节多种免疫细胞效应功能,如杀伤细胞结合C3b后可增强对靶细胞的ADCC作用。
3. 细胞因子的生物学作用特点是什么? 答案:
(1) 细胞因子的作用有高效性 极微量(pg水平)即可发挥生物学效应。
(2) 细胞因子的旁泌和自泌作用 自产生分泌出来后作用于附近的细胞或自身产生细胞。
(3) 细胞因子作用的一时性 只在局部短时间发挥作用,临床上细胞因子作为药物治疗时,在药理剂
量下也可随血流分部全身发挥作用。
(4) 细胞因子作用的多效性 一种细胞因子可作用于多种靶细胞,发挥多种生物学效应如促进靶细胞
增殖分化,增强抗感染和杀伤效应,促进或抑制其他细胞因子的产生和细胞膜表面分子的表达。
(5) 细胞因子作用的网络性 不同的细胞因子之间有相互协同或相互制约的作用,由此构成了复杂的
细胞因子免疫调节网络,如IL-1又到产生IL-2,IL-10抑制γ干扰素产生。
4. 试论MHC在医学上的意义。
(1)器官移植:移植排斥反应的实质是免疫应答,故移植成败的关键是供受者间MHC的相容程度。