临床微生物及寄生虫检验
细菌涂片检查
涂片不染色显微镜检查
1. 标本要求:各种标本或细菌培养物。 2. 试验方法:直接涂片法、压滴法或悬滴法。 3. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。 4. 结果观察:观察标本中有无细菌或真菌,如有再观察细菌的形态及运动情况,报告所见。
5. 注意事项:注意微生物操作安全;标本量不宜太多,以免影响观察;涂片制作后立即观察,涂片干涸后应重新制作涂片。
涂片革兰染色显微镜检查
1. 标本要求:各种标本或细菌培养物。 2. 试验方法:常规法、快速法。
3. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。 4. 结果观察:观察染色涂片有无细菌或真菌,如有则进一步观察细菌的染色性、形态、特殊结构及排列方式。涂片中如有细胞,则观察细菌菌体在细胞内或细胞外。报告所见。
5. 注意事项:涂片厚薄适宜均匀;固定及染色不能超时,否则染色变性;只能报告所见细菌的染色性、形态、特殊结构及排列方式,不能直接报告细菌菌种如报告涂片见淋病奈瑟菌、白喉棒状杆菌。
涂片抗酸染色显微镜检查
1. 标本要求:各种标本或细菌培养物。
2. 试验方法:萋尼染色法、快速染色法或荧光(金胺-罗丹)染
色法。
3. 操作方法:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。 4. 结果观察:抗酸菌在萋尼染色法中呈红色,在金胺-罗丹染色法中呈荧光金黄色。
5. 观察染色涂片有无抗酸杆菌,如有则进一步观察细菌数量大致情况。涂片中如有细胞,则观察菌体在细胞内或细胞外。报告所见。 6. 注意事项:涂片厚薄适宜均匀;固定及染色不能超时,否则染色变性;只能报告有无抗酸杆菌,如有,可报告其数量大致情况及是否在细胞内,不能直接报告见分枝杆菌或结核分枝杆菌,因奴卡菌属、放线菌属细菌也可为抗酸阳性菌。
涂片墨汁染色显微镜检查
1. 标本要求:各种标本或细菌培养物。 2. 试验方法:直接染色法。
3. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。 4. 结果观察:涂片背景为黑色,新型隐球菌或细菌荚膜在染色中呈折光环形菌体结构。
5. 观察染色涂片有新型隐球菌或细菌荚膜时为检查阳性。报告所见。
6. 注意事项:染液与标本液的比例为1:1,比例不当影响观察效果;只能报告所见即有无折光性环状样菌体,不能直接报告见新型隐球菌等。
寄生虫检验操作
疟原虫检查
1. 标本要求:间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10小时采
血,恶性疟患者在发作后20小时左右采血。 2. 试验方法:薄血片或厚血片染色镜检。 3. 试验材料:瑞氏-姬姆萨染色液、显微镜等。 4. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。 5. 结果判断:薄片须找100或100以上个视野,厚片须找20个视野或以上才能报告“未找到疟原虫”。 6. 注意事项:见疟原虫时必须进行分类。
微丝蚴检查
1. 标本要求:采血时间以晚上9~12时前后为宜。 2. 试验方法:鲜血片法、厚血片法、试管浓集法。 3. 试验材料:枸橼酸钠等。
4. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。
虫卵及包囊浓缩检查
1. 标本要求:新鲜粪便取蚕豆大小,放于大小与大号青霉素相似的瓶内。
2. 试验方法:漂浮法、清水沉淀法。 3. 试验材料:一般检验常规材料。
4. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。
肛门擦拭子虫卵检查
1. 标本要求:随机取样送检。
2. 试验方法:软透明纸肛门拭子检查法、棉拭子肛门擦拭法等。 3. 试验材料:一般常规实验用品。
4. 操作步骤:见《全国临床检验操作规程》(第二版)。
临床免疫学检查
传染病免疫学检查
乙型肝炎血清标志物(HBV一M)检测
【 方 法 】 ELISA法。 【 试 剂 】
国内有商品化试剂盒供应。但必须按规定使用经中国药品生物制品检定所检定并贴有“中国药品生物制品检定所检定合格”字样的防伪标签的试剂。 【 操 作 】
按试剂盒内说明书书进行。 【 附 注 】
1.试剂盒应臵冰箱中保存,取出后平衡至室温方可使用,未用完的微孔条须密封保存;
2.每次应设空白1孔(不加标本及标酶试剂,其余各步相同),阴性对照3孔,阳性对照2孔;
3.洗涤液须用蒸镏水或去离子水配制,洗涤时各孔均应加满洗液,以防孔口内边缘有游离酶残存不能洗净;
4.用洗板机洗板,每次洗板反复5遍,最后一次要求微孔内不残留洗涤液,如达不到要求,需扣干;
5.洗板机洗板时应设定30~60秒的浸泡时间;
6.滴加试剂前应将滴瓶翻转数次,使液体均匀并弃去一滴。滴加时瓶身应保持垂直,以使滴量 准确,注意勿将试剂滴在孔壁上;
7.37℃温育须采用水浴箱,不可使用37℃干式恒温箱,且微孔条必须接触37℃水浴水面,不可悬空; 8.不同批号试剂不可混合使用。 【 结果判断 】
酶标仪双波长450/630nm比色测定; 1.HBSAg、抗—HBS、HBeAg;
临界值(C.O)=阴性对照孔A值的均值N〓2.1(阴性对照A值<0.05时按0.05计);
标本A值S/C.O≥1为HBsAg,抗—HBs、HBeAg阳性(S/N≥2.1); 标本A值S/C.O<1为HBsAg、抗—HBs、HBeAg阴性(S/N<2.1)。 2.抗—HBe、抗一HBC;
临界值(C.O)=阴性对照孔A值的均值N〓0.5;
标本A值S/C.O≤1者为抗—HBe、抗一HBC阳性(S/N≤0.50); 标本A值S/C.O>1者为抗—HBe、抗一HBC阴性(S/N>0.50)。
抗甲型肝炎病毒免疫球蛋白M(Anti-HAV-IgM)测定
【 方 法 】 ELISA法。 【 试 剂 】
市售合格试剂、要求同HBV两对半; 【 操 作 】
按试剂说明书要求进行,要求可参考HBV两对半; 【 结果判断 】
要求同HBV两对半中HBsAg。