毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后患儿血清TNF-α（肿瘤坏
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死因子）、VEGF（血管内皮生长因子）的检测及临床意义
The detection of TNF alpha (tumor necrosis factor) and VEGF (vascular
endothelial growth factor) in serum of capillary bronchitis with heart failure
in children before and after the treatment and the clinical significance.
作者:[请输入作者]
指导教师：[请输入指导教师]
专业名称：[请输入专业]
2015年3月17日
目录
目录.............................................................................................................................. １ 英文缩略词表.............................................................................................................. ２ 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后患儿血清TNF-α（肿瘤坏死因子）、VEGF（血管内皮生长因子）的检测及临床意义.............................................................. ３ 中文摘要...................................................................................................................... ３ 英文摘要...................................................................................................................... ６ 前言.......................................................................................................................... １０ 1. 临床资料：.................................................................................................. １０ 1.研究对象：.................................................................................................... １２
1.1 病例选择：......................................................................................... １２ 1.2分组：.................................................................................................. １２
2. 方法：................................................................................................................. １３
2.1标本采集：................................................................................................. １３ 2.2 试剂仪器：................................................................................................ １３
2.2.1 血清TNF-α检测： ........................................................................ １３ 2.2.2血清VEGF检测： .......................................................................... １４ 2.3测定方法：................................................................................................. １５ 2.3.1 血清TNF-α水平检测原理： ........................................................ １５ 2.3.2 血清VEGF水平检测原理： ......................................................... １６ 2.4 血清TNF-α和VEGF水平测定步骤： ................................................. １６
2.4.1血清TNF-α水平测定步骤： ......................................................... １６ 2.4.2血清VEGF水平测定步骤： .......................................................... １７ 2.5结果计算：................................................................................................. １８
2.5.1血清TNF-α水平的结果计算： ..................................................... １８ 2.5.2血清VEGF水平的结果计算： ...................................................... １９ 2.6. 统计学处理：........................................................................................... １９ 3. 结果..................................................................................................................... ２０ 3.1. 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清TNF-α水平的变化： ..... ２０ 3.2. 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清VEGF水平的变化： ...... ２０ 3.3 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清TNF-α和VEGF水平的相关性：................................................................................................................... ２１ 4. 分析与讨论：..................................................................................................... ２１
4.1. TNF-α与毛细支气管炎合并心力衰竭治疗： ....................................... ２２
4.1.1 TNF-α的基因和结构特点： .......................................................... ２２ 4.1.2 TNF-α的受体： .............................................................................. ２３
4.1.3 患者血清TNF-α浓度与毛细支气管炎合并心力衰竭临床病例参数之间的关系：............................................................................................ ２３ 4.1.4 TNF-α检测的临床意义： .............................................................. ２４ 4.2.VEGF与毛细支气管炎合并心力衰竭治疗： ......................................... ２６
4.2.1 VEGF的基因和结构特点： ........................................................... ２６ 4.2.2 VEGF的受体： ............................................................................... ２６ 4.2.3 患者血清VEGF浓度与毛细支气管炎合并心力衰竭： ............. ２７ 4.2.4 VEGF检测的临床意义： ............................................................... ２７
5. 结论：................................................................................................................. ２８ 参考文献：.............................................................................................................. ２８ 综述：...................................................................................................................... ３３
英文缩略词表
TNF-a Tumor necrosis factor-a 肿瘤坏死因子 a VEGF Vascular endothelial growth
factor 血管内皮生长因子 RSV Respiratory syncytial virus 呼吸道合胞病毒 EC Endothlial cell 内皮细胞
ELISA Enzyme-linked immuneosorbentassay 酶联免疫双抗体夹心 CK Cytokine 细胞因子 OPD O-phenylendiamine 邻苯二胺 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate buffer 磷酸盐缓冲液 TMB Tetramethyl 四甲基联苯胺 MHC Ｍajor histocompatibility complex 主要组织相容性复合体
mRNA messenger RibonucleicAcid 信使核糖核酸 EOS Inflammatory cell 炎症细胞 NO Nitrous oxide 一氧化氮 NGF Nerve growth factor 神经生长因子 IgG IgG Immunoglobulin G 免疫球蛋白 G
毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后患儿血清TNF-α（肿瘤坏死因子）、VEGF（血管内皮生长因子）的检测及临床意义
中文摘要
目的：毛细支气管炎是婴幼儿常见的一种下呼吸道感染性疾病，主要由呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus, RSV ）引起。仅见于2岁以前婴幼儿，多发病于6个月以前的婴儿。患儿易在患病后半年内反复咳喘发作。此病常发生在冬春季节，病情多在咳嗽发生后的2-3天逐渐加重，呼吸短促且增快，伴有鼻煽，胸凹陷等症状，严重者可出现紫绀，喘憋严重时可能合并心力衰竭。毛细支气管炎的临床表现与一般感染性炎症不同，与哮喘的临床表现具有许多相似之处，且病后哮喘发生率较高。目前，国内外对于该病的发病机制还没有确切阐述。因此，对毛细支气管炎合并心力衰竭患儿给予早期治疗显得尤为重要，TNF-α及VEGF作为炎症介质参与了毛细支气管炎的发病过
程。肿瘤坏死因子（TNF）是单核巨噬细胞系统产生的一种蛋白质，它是一种有效的肿瘤杀伤因子，也是机体炎症和免疫应答的重要调节因子。TNF-α是由呼吸道上皮细胞，外周血的中性粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及血管内皮细胞产生释放，TNF-α的作用与在机体组织中水平有相关性，低水平的TNF-α在组织修复、炎症应答中对机体具有积极作用；而TNF-α的大量释放则可能引起组织的免疫病理损伤。VEGF是血管内皮细胞（endothlial cell,EC）特异性促有丝分裂原，能够有效促进内皮细胞增殖，改善内皮细胞功能，诱导血管生成以及增加微血管通透性。VEGF是诊断早期心肌缺血极为敏感而特异的指标。当机体处于缺血、缺氧状态时，VEGF的水平明显升高，可促进心肌侧枝循环的建立，增加心肌供血。本文主要探讨TNF-α及VEGF在毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后患儿血清中的变化，探讨它们对毛细支气管炎合并心力衰竭患儿治疗和预后的临床意义。
方法：随机选取2014年1月至12月就诊于解放军251医院儿科门诊及住院病房的66例确诊为毛细支气管炎患儿为研究对象。其收治的年龄≥28天，≤24月，确诊为毛细支气管炎，并且入院时或入院后合并心力衰竭诊断。所有研究对象诊断标准均符合《实用儿科学》第7版。并剔除呼吸系统畸形、先天性心脏病，支气管肺发育不良，合并中毒性脑病，病程中出现抽搐的患儿，临床状况不稳定，患儿家长中途退出治疗或转院治疗的患儿。其中毛细支气管炎合并心里衰竭的患儿30例，另随机选取同时期同年龄组20例健康体检儿童作为对照，对照组