3. 结果
3.1. 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清TNF-α水平的变化：
（1）毛细支气管炎患者急性发作期治疗前血清TNF-α水平为
（310.25+224.69）ng/L，明显高于治疗后（125.42+45.39）ng/L，差异有显著性（图值为5.886，P＜0.05）。见表2。
（2）毛细支气管炎合并心力衰竭发作期患者血清TNF-α浓度为（58.38+13.28），明显高于健康对照组（15.20+4.99）。差异具有统计学意义（t值为5.01，P＜0.05）。
3.2. 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清VEGF水平的变化： （1）毛细支气管炎合并心力衰竭发作期患者治疗前血清VEGF水平明显高于治疗后，差异具有统计学意义（t值为2.07，P＜0.05）。 （2）毛细支气管炎合并心力衰竭发作期患者血清VEGF浓度为（58.38+13.28），明显高于健康对照组15.20+4.99差异具有统计学意义（t值为2.32，P＜0.05）
3.3 毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前后血清TNF-α和VEGF水平的相关性：
毛细支气管炎合并心力衰竭患儿治疗前血清TNF-α高于治疗之后，毛细支气管炎合并心力衰竭治疗前VEGF血清高于治疗后，50位研究对象血清TNF-α水平和VEGF水平存在直线关系，呈现出正相关性（r=0.779，P＜0.01）。（见图3）
图3
4. 分析与讨论：
近年来流行病学调查研究发现[37]：毛细支气管炎合并心里衰竭是儿科常见的高发病率疾病。大部分毛细支气管炎的患儿会在病后出现反复喘息，进而转化为支气管哮喘。在急性发作期严重时合并心力衰竭，形成毛细支气管炎合并心里衰竭。有研究结果显示：细胞因子及炎性介质存在于毛细支气管炎和哮喘急性期中，因而毛细支气管炎的
临床表现过程与哮喘极为相似。有研究者认为[38]毛细支气管炎可以视为哮喘的第一次发作。两者可能存在相似的发病机制。机体的免疫系统包括免疫器官、免疫细胞和免疫分子，是一个复杂的网络系统。各种免疫细胞、免疫分子互相影响、互相制约，影响着疾病的转归。细胞因子具有强大的生物学效应，在毛细支气管炎发病中有着重要作用。本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immuneosorbentassay，ELISA)法检测毛细支气管合并心力衰竭患儿TNF-α和VEGF的水平变化，进一步揭示毛细支气管炎的发病机理。 4.1. TNF-α与毛细支气管炎合并心力衰竭治疗： 4.1.1 TNF-α的基因和结构特点：
人类TNF-α基因长约3.6 kbp，定位于6p21.4，在1985年克隆成功。其包含3个内含子和4个外显子。与主要组织相容性复合体（MHC）基因紧密连锁位于HLA-B 和 HLA-C2 位点之间的 MHC3 类基因区内。
有研究者认为它可调节TNF的转录水平，与慢性乙肝、胰岛素抵抗以及肿瘤等多种疾病的易感性有关[39]。 TNFA和TNFB组成了人类TNF-α基因，分别编码为TNF-α和TNF-β。TNF基因编码的mRNA约1.7 kbp，在其3`非翻译区有一段许多细胞因子都具有的保守TTATTTAT序列（AU富含元件，ARE）。 TNF的诱导剂是佛波酯是，能通过靠近启动子区TATAA框的一小段序列诱导TNF的转录。
4.1.2 TNF-α的受体：
人TNF-α前体由233个氨基酸组成（26 kDa），其包含76个信号肽，由氨基酸残基组成。在转化酶TACE的作用下，切除信号肽，形成157个成熟的氨基酸残基的TNF-α（17 kDa）。TNF-α没有蛋氨酸残基，所以不存在糖基化位点，其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。
近年来，有研究者证明[40]通过基因工程技术表达了N端少2个氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具有更好的生物学活性和抗肿瘤效应。除此之外，运用基因工程的方法改造TNF-α分子。将其氨基端7个氨基酸残基缺失，再将8Pro、9Ser和10Asp改为8Arg、9Lys和10Arg，经改造后的TNF-α比天然TNF杀伤L929细胞的活性增强1000倍左右。
4.1.3 患者血清TNF-α浓度与毛细支气管炎合并心力衰竭临床病例参数之间的关系：
TNF-α是与肿瘤细胞代谢有关的细胞抑制因子，主要由单核细胞或者巨噬细胞产生，是一种有着多种生物学活性的细胞因子[1]。TNF-α作为一种重要的炎症因子，可参与气道炎症病理机制中的多个环节。TNF-α是毛细支气管炎发病过程中的重要启动因子：在毛细支气管炎早期，巨噬细胞摄取并加工变应原，随后释放出的TNF-α与第一信号一起激活CD4+T细胞，并且通过细胞因子间的相互诱生启动炎症过程。 同时 TNF-α能诱导血管内皮细胞表达黏附分子，促
进炎症细胞（包括 EOS）的浸润和活化，活化的炎症细胞释放 TNF-α、IL-1、及前列腺素类、氧自由基、、血小板活化因子等，从而引起炎症介质的瀑布样连锁反应，最终导致气道痉挛，血管通透性增加，微血栓形成，气道粘膜水肿，导致毛细支气管炎发作；因此TNF-α在毛细支气管炎的发病过程中有具有广泛的病理生理作用。 本研究结果显示急性发作期毛细支气管炎患者诱导痰和血清 TNF-α质量浓度均高与健康对照组，这说明 TNF-α在炎症过程中表达增加，在炎症细胞的激活和浸润中其重要作用。且痰 TNF-α质量浓度高于血清 TNF-α质量浓度，但二者并无明显相关性，表明毛细支气管炎发作期全身炎症反应与局部炎症反应增强，但是二者并不一致，可能因二者具有不同的调节途径。而通过静脉注射或者吸入 TNF-α可能导致气道阻力延迟性增高，并伴有 EOS 浸润毛细支气管，以此判断其具有诱喘作用，说明TNF-α在毛细支气管炎的持续存在中起关键作用。 4.1.4 TNF-α检测的临床意义：
TNF-a 作为一种具有广泛活性的前炎症细胞因子，是毛细支气管炎发病过程中的重要因素。TNF-a 可由T 淋巴细胞、肥大细胞、巨噬细胞等细胞释放，在毛细支气管炎发病时促进内皮细胞粘附分子表达，而这些粘附分子与炎症细胞上相应受体结合，进一步促进炎症细胞跨内皮向气道活化和聚集，而活化的炎症细胞可以再释放 TNF-a 等炎症细胞因子，从而引起炎症介质的瀑布样连锁反应，最后导致毛