生理实验讲义(10)

2019-09-01 13:09

实验二十二 去大脑僵直

实验原理 中枢神经系统的较高位中枢对伸肌的紧张性具有易化和抑制两种作用。在正常情况下,通过这两种作用使骨骼肌保持适当的紧张性,以维持机体的正常姿势。如果在动物中脑的上、下丘(四叠体)之间横断脑干,则高位中枢的抑制作用减弱,易化作用相对加强,动物躯体伸肌紧张性亢进,出现四肢僵直、颈部僵硬、头尾角弓反张的去大脑僵直现象。 实验目的 观察去大脑僵直,了解脑干在姿势反射中的作用。 实验对象 家兔

实验器材和药品 哺乳类手术器械、骨钻、咬骨钳、兔手术台、棉花、竹刀、纱布、麻醉瓶;生理盐水、20%氨基甲酸乙酯、骨蜡、乙醚。 实验步骤和观察项目

一、用20%氨基甲酸乙酯或乙醚将动物轻度麻醉,仰卧固定于兔手术台上。 二、切开颈部皮肤,在气管两侧找出并分离颈总动脉,分别穿线备用。

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三、将动物翻转俯卧固定于手术台上,打开颅骨(方法同实验二十一),尽量暴露大脑两半球的后缘。注意不要损伤矢状窦及横窦,以免大量出血。结扎两侧颈总动脉,剪开硬脑膜。 四、松开动物的四肢,左手将动物的头托起,右手用竹刀将大脑两半球轻轻向前拨开,可见到四叠体。在上、下丘之间略向前倾斜以竹刀向颅底切断脑干。

五、将动物侧卧。几分钟后,它的躯干和四肢慢慢变硬伸直,头后仰,尾上翘(如图22-1),形成僵直状态。

六、将动物俯卧于手术台上,它只能被动地改为侧卧,不能翻正。

七、将动物的头扭向左转,左侧前后肢伸直,右侧前后肢屈曲。相反,头向右转,右侧肢体伸直,左侧肢体屈曲。当使它的头后仰时,前肢更向前伸直而后肢屈曲。如头前俯,则前后肢的紧张性变化与头后仰时相反。

图22-1:兔去大脑僵直 八、记录所观察的实验现象并进行讨论。 注意事项

⒈手术中尽量减少出血。

⒉横断脑干时定位要准确,否则不出现去大脑僵直现象。 思考题

⒈去大脑僵直产生的机制是什么?

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附 录

一、生理学实验常用仪器简介 ㈠刺激器及常用电极

能使活组织产生反应的刺激因素很多,如光、声、电、热、机械、化学等。目前应用最多的是电刺激,因为它不易损伤活组织,并且可以进行重复试验,容易控制刺激的强度、时间等参数。当需要进行非电性质的刺激(如光、声刺激)时,可以将电信号转换成光、声等,而且同样能够调节刺激参数。

⒈电刺激器 能产生一定波形的电脉冲仪,多数产生的波形是方波,有的也可产生尖脉冲波,如果要进行声音或图像刺激,则产生的波形更为复杂。在进行刺激时,可以调节刺激的强度、波宽和频率。电刺激器还能输出同步信号,可以将它与示波器的同步输入相连接,触发示波器进行同步扫描;还可利用它来触发计算机进行数据处理。另外,电刺激器一般具有延时输出功能,即在同步信号输出后的一定时间后再输出刺激脉冲。

⒉刺激隔离器 有时为了防止刺激信号弥散到引导电极处而对生物电信号的记录产生影响,常用刺激隔离器将刺激与地隔离。使用刺激隔离器有时会使刺激脉冲产生变形。

⒊锌铜弓 锌铜弓一极为铜丝,一极为锌丝,在一端用焊锡连接起来。使用时将它的两极与神经或肌肉相接触。由于铜锌的电化学势不同,在两极间产生刺激电流。在解剖标本时,常用它来检验神经肌肉的活性。

⒋刺激电极 常用的刺激电极是用金属丝制成的,最好用银丝,也可以用白金丝、不绣钢丝或钨丝制成,但不宜用铜丝。刺激电极有各种形式,如普通电极、保护电极、闭锁电极等。

⒌引导电极 引导电极用于引导生物电流,一般常用金属丝作引导电极。在电生理实验中还常用到甘汞电极(乏极化电极)和微电极。前者不会产生极化作用,对引导的信号影响较小。后者用于记录单细胞的电活动。

㈡换能器 能将生理学实验中的一些机械或容量的变化转换成电变化,此电信号经放大后就

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可进行各种处理。生理学实验中常用的换能器有两类:机械换能器和容量(血压)换能器。 ㈢放大器 生理电信号一般都很微弱,需要经过放大才能进行显示、记录和处理。放大器的种类很多,其重要参数有放大倍数、高通滤波、时间常数,应根据所记录的生理电信号的特点选择合适的放大器及放大器参数。在进行生理电信号的放大时,一般要经过两级放大,即前置放大器和主放大器(后置放大器)的放大。常用的显示和记录装置都带有主放大器。如果要将生理电信号变成声音信号输出,则需在前置放大器后接一音频放大器(功率放大器),再接一扬声器即可。我们所说的放大器常指前置放大器。

㈣计算机数据采集系统

是集生物信号放大、采集、显示、储存众多功能与一体化仪器,代替了传统的刺激器、生物信号放大器、示波器,一机多用;整个系统分两大部分:硬件部分、软件部分;所有的硬件部分都是通过计算机软件系统来控制的;参数设置分三部分:刺激设置、放大器设置、采集卡设置。选择参数为:

1.刺激器:输出电压0--40伏,脉冲波宽0.1us—5ms,最大刺激频率100Hz,可以产生单脉冲和双脉冲。

2.放大器:四通道程控,放大倍数10---80000倍(16挡),频响范围DC—10KHz,最大采样频率20KHz。

3.数据采集:四路,分辨率12位,最大连续采样频率4KHz,最大叠加采样频率20KHz。

二、生理学实验常用手术器械的简介及使用

㈠、手术刀 用于切开皮肤和脏器。根据手术部位和性质的不同,可更换大小不同的刀片。手术刀片有不同的形状及大小,手术刀柄也有大小之分,使用时应视具体情况选择合适的刀片安装到刀柄上。还有一类手术刀其刀柄和刀片连在一起,也有不同的类型。 正确的执刀方法有四种:

⒈执弓式 动作广泛而灵活,用于各种腹部皮肤切口等。 ⒉执笔式 用于切割短小的切口,用力轻柔而操作精细。 ⒊握持式 用于切割范围较广,用力较大的切口。 ⒋反挑式 用于向上挑开,以免损伤深部组织。

㈡、手术剪 手术剪有弯、直两型,各型又有长、短的不同。手术剪的尖端有尖头和钝圆头两种,因此称为尖头剪和钝头剪。手术剪主要有两种作用:一是剪断软组织;二是利用剪刀的尖端插入组织间隙,做钝性分离。

正确的执剪姿势:将拇指和无名指套入手术剪的环口内,中指扣住环口,食指顶住手术剪的转轴。

㈢、手术镊 手术镊分有齿和无齿两种,并有大小之分,也有直头和弯头的不同。手术镊主

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要用于夹住或提起组织,以便于剥离、剪断或缝合。

正确的执镊方法:用拇指、食指和中指执手术镊中部有齿的部位即可。

㈣、止血钳(血管钳) 止血钳也有直、弯和长、短之分,并有大、小不同的类型,有些止血钳还带有齿。止血钳常用于夹住出血点以止血,也可用于做钝性分离、穿线等。 执止血钳的姿势与执手术剪的姿势相同。

㈤、持针钳 上端较短,口内有槽,以区别于直止血钳。持针钳用于夹持缝合针,缝合各种组织。使用方法是用持针钳的尖端夹持缝合针近尾端的1/3处。执持针钳的方法与执手术剪姿势相同,但为了缝合的方便,可不必将拇指和无名指套入环口中。

㈥、缝合针 用于缝合各种组织。根据缝合组织的不同,可选用不同大小和形状的缝合针。三棱针前半部分呈三棱形,比较锐利,能穿透较硬的组织,但损伤较大,留下的针眼也大。圆针较光滑,用于缝合一般软组织,针眼较小。两种缝合针均有直、弯两种类型。缝合针的针孔有穿线孔和弹机孔两种。

㈦、骨钳 用以咬切骨头。有剪刀式与小碟式两类:前者适用于剪切骨头,故又称切骨钳;后者适用于咬切骨头,故又称咬骨钳。骨钳有不同大小,可根据手术需要加以选用。 三、动物实验的基本操作

㈠、动物的准备 生理学实验主要以活的动物为实验材料,如猫、狗、兔、大鼠、小鼠、豚鼠、鸽子、蟾蜍和青蛙等。除特殊要求的以外,应选用健康的成年动物作实验材料,一般可不考虑性别。健康的哺乳类动物表现为皮毛有光泽,两眼明亮,鼻端潮而凉,喜活动,反应灵活,眼角和鼻部无分泌物,食欲良好等。健康的蛙或蟾蜍表现为皮肤湿润,后肢蹲坐,前肢撑地,头和躯干挺起,喜爱活动等。

急性实验和一般手术时,麻醉前12小时左右不喂食。腹部手术时,应饥饿约24小时。 ㈡、动物的麻醉 麻醉是使动物在实验或手术过程中安静,不挣扎,并减少痛苦。麻醉药的种类繁多,作用原理不尽相同,应用时需根据动物的种类以及实验或手术的性质,慎重选择。麻醉的深浅可以从呼吸的速度、深度、角膜反射的有无、四肢和腹壁肌肉的紧张程度、以及皮肤对夹捏的反应等进行判断。适合于进行实验或手术的麻醉状态应该是:呼吸深而平稳,角膜反射消失,运动反应消失,肌肉松驰。实验中动物如果逐渐醒来,可补注麻醉药,但一次不能超过原剂量的1/5。

⒈常用麻醉药的种类

麻醉药有局部麻醉药和全身麻醉药。局部麻醉药适用于浅表的局部小手术,生理实验中不常用。常用的是全身性麻醉药,有挥发性的(如乙醚)和非挥发性的(如巴比妥类)两类。前者容易麻醉也容易苏醒,麻醉深度容易掌握,应随时注意动物的反应,以防过早苏醒或麻醉过量。后者作用时间较长,麻醉后苏醒较慢,也不大容易掌握麻醉的深度。常用的麻醉药有以下几种: ①乙醚 一种呼吸性麻醉药,有强烈的刺激性气味,是一种易燃易爆的液体。适用于时间短

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