⒏在切断迷走神经后，重复步骤６（向肺内注气或由肺内抽气），观察呼吸运动是否变化，与迷走神经完整时加以比较，并分析哪些是肺牵张反射的效应，哪些是机械因素引起的后果。 ⒐在股部找出一侧坐骨神经，结扎并切断其外周端。以适当的刺激强度刺激其中枢端，观察并记录呼吸运动的变化。
四、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈做气管插管时，在插管前应对气管进行止血和气管内清理，再进行插管。 ⒉在一项实验之后，须待呼吸恢复平稳后再进行下一项实验。 思考题
⒈比较缺Ｏ2和ＣＯ2对呼吸影响的机制有何不同。 ⒉迷走神经在节律性呼吸运动中起什么作用？
实验十四 离体小肠平滑肌生理特性的观察
实验原理 消化道平滑肌具有自动节律性、收缩性和较大的伸展性，对化学物质、神经递质、温度改变及牵拉刺激比较敏感，在这些药物的作用下可表现不同的反应。
实验目的 观察哺乳动物离体肠段的一般生理特性，学习哺乳动物离体器官灌流的一种方法。
实验对象 家兔
实验器材和药品 计算机、生理学与神经生物学实验系统、麦氏浴槽、机械换能器、支架、大铁夹、双凹夹、球囊、酒精灯、火柴、温度计、烧杯、恒温浴槽、大试剂瓶、哺乳类手术器械；台氏液、0.01％肾上腺素、0.01％乙酰胆碱、0.01％阿托品、１ＮＮaＯＨ、１ＮＨＣl、２％ＣaＣl2、１％ＢaＣl2。 实验步骤和观察项目
一、 如图14－1连接实验装置。浴槽内盛台氏液，放于盛水的烧杯内。
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图14－1：记录离体小肠平滑肌生理特性的实验装置示意图
二、用铁锤击兔头枕部致昏，立刻剖开腹腔，找出胃与十二指肠交界处，用线结扎，在结扎处近胃端剪断小肠，将与肠管相连的肠系膜沿肠缘剪开，立即取出长约20～30cm的肠管。将肠管分成２～３cm的肠段，置于４℃左右的台氏液中轻轻漂洗，然后用注射器将台氏液从一端注入，冲洗肠腔，除去肠内容物。再用４℃台氏液浸泡。取一肠段，两端用线结扎，将一端的结扎线系于乙形通气管的弯钩上，另一端的结扎线系在机械换能器的弹簧片上，调节机械换能器的位置，使肠段处于略微拉长的状态。注意连线应该保持垂直，并且不能与浴槽管壁、乙形通气管及温度计接触，以免影响记录。
三、将充满空气的球囊经橡皮管与麦氏浴槽内的乙形通气管相连，调节橡皮管上的螺旋夹，控制气流速度，使气泡一个一个地通至浴槽，起通气及搅拌的作用。选择参数：放大器选通道3，放大倍数400；采样间隔60ms，即可记录小肠运动曲线。注意曲线的基线表示小肠的紧张性。 四、按以下步骤进行实验观察：
⒈记录室温下的小肠运动曲线。
⒉把烧杯内换上37℃的水，用酒精灯加热维持水温。把浴槽内换上37℃的台氏液，待温度稳定于37℃后，记录小肠运动曲线。
⒊向浴槽内加入0.01％ＡＣh溶液１～２滴，记录小肠运动的变化（如不出现明显效应，可以多加几滴，但不可一次补加过多）。当出现明显现象后，立刻放出含有ＡＣh的台氏液，换入37℃的新鲜台氏液，更换２～３次，使肠段活动恢复正常。 ⒋加入0.01％Ｅ１～２滴，重复步骤３。 ⒌加入１ＮＨＣl１～２滴，重复步骤３。
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⒍加入１ＮＮaＯＨ１～２滴，重复步骤３。 ⒎加入２％ＣaＣl2１～２滴，重复步骤３。 ⒏加入１％ＢaＣl2１～２滴，重复步骤３。
⒐加入0.01％ＡＣh２～４滴，以引起肠段的明显反应。当其反应达到最大时，加入0.01％阿托品0.4～１毫升，观察并记录肠段活动的变化。再加入0.01％ＡＣh２～４滴，观察肠段活动是否有所改变。
五、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈浴槽内温度应保持在37℃，不能过高或过低。
⒉每加一次药物，在肠段出现效应后，应立即更换台氏液，并冲洗２～３次，以免小肠出现不可逆反应。待肠段活动恢复正常后再进行下一实验。 ⒊加药以前，应先准备好更换用的37℃台氏液。 思考题
⒈试比较维持哺乳动物离体小肠平滑肌活动和维持离体蟾蜍心脏活动所需的条件有何不同？为什么？
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实验十五 影响尿生成的若干因素
实验原理 肾脏的主要功能是泌尿。尿的生成过程包括三个环节：肾小球的滤过；肾小管与集合管的重吸收；肾小管与集合管的分泌。影响这三个环节的因素都可影响尿的生成。 实验目的 观察影响肾小球卢过与肾小管重吸收的若干因素对尿量的影响。 实验对象 家兔
实验器材和药品 计算机、生理学与神经生物学实验系统、记滴器、保护电极、哺乳类手术器械、兔手术台、输尿管插管、注射器、秒表；生理盐水、20％氨基甲酸乙酯、20％葡萄糖、0.01％去甲肾上腺素、速尿、垂体后叶素。 实验步骤和观察项目
一、用20％氨基甲酸乙酯（５ml／Ｋg体重）耳缘静脉注射将兔麻醉，仰卧固定于手术台上。
二、切开颈部皮肤，做气管插管，并分离一侧减压神经（或迷走神经），穿线备用。 三、输尿管插管 在下腹部靠近耻骨联合上缘，沿正中线作约４cm长的皮肤切口，沿腹白线剪开腹壁（注意勿伤腹腔内脏器），暴露膀胱。用手将膀胱轻轻拉出腹腔，翻至体外，在膀胱底部找到一侧输尿管（位于膀胱三角处）。分离输尿管，在靠近膀胱处穿线结扎，于结扎处肾侧向肾方向剪一斜口，插入充满生理盐水的输尿管插管（注意勿插入过深或过浅），穿线将插管与输尿管一起结扎固定。尿液即由插管中慢慢流出。夹合腹壁肌肉及皮肤，用浸有温生理盐水的纱布将腹部手术野覆盖，然后将插管开口连接于记滴器上，记录尿量。也可用秒表记录单位时间的尿生成量。
四、按以下步骤进行实验观察和记录，在每步实验前均应待尿量恢复平稳后再进行，以保证前后均有对照数据，各实验药品均由耳缘静脉注入。 ⒈记录正常尿量（滴／分钟）。
⒉注射38℃生理盐水30毫升，观察并记录尿量的变化。
⒊刺激减压神经中枢端（或迷走神经外周端），维持15～20秒，观察并记录尿量的变化。 ⒋注射20％葡萄糖５毫升，观察并记录尿量的变化。
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⒌注射0.01％去甲肾上腺素0.5毫升，观察并记录尿量的变化。 ⒍注射速尿（５mg／Ｋg体重），观察并记录尿量的变化。 ⒎注射垂体后叶素0.5～１单位，观察并记录尿量的变化。 五、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈实验前给兔子多喂菜叶。
⒉每步实验前后均应有对照记录，应待前一步骤的效应基本消失后再进行下一步实验。 ⒊保护好耳缘静脉，注射时应从耳尖部开始，逐步移向耳根部。 ⒋实验步骤的顺序可按实际情况变动。 思考题
⒈试分析以上各步实验中哪些因素影响肾小球滤过，哪些因素影响肾小管和集合管的重吸收？
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