3.采集卡
迭加模式，采样点数：200，间隔：50us.
六、将神经标本用镊子夹其结扎线从培养皿中取出，放入屏蔽盒，近心端置于刺激用电极上，远心端置于引导用电极上，用滤纸吸去多余的液体。将一片滤纸浸些任氏液贴在屏蔽盒盖内表面，使盒内保持一定的湿度，防止标本干燥。 七、进行以下步骤并观察： ⒈点击
按钮，开始采样，首先出现刺激伪迹，增大刺激强度刺激伪迹增大。继续增加刺
激强度至出现动作电位为止。记录此时的刺激参数。
⒉进一步增大刺激强度，可见随着刺激强度的增大，刺激伪迹和动作电位的幅度都在不断地增大，同时由于不同传导速度的神经纤维发生兴奋，总和后的动作电位波形也不断变化，直至动作电位的幅度不再增大为止。记录此时的刺激参数。如果再增大刺激强度，则动作电位的幅度不再增大而刺激伪迹的幅度仍在增大。以此可区别动作电位和刺激伪迹。
⒊调节刺激强度，选择比较典型的双相动作电位波形，分别测出其各相的幅度及时程，按比例绘制出图形，并记录其刺激参数。同时，记录下两个引导电极之间的距离值。
⒋调节两个引导电极之间的距离，分别以上一步骤中所记录的刺激参数进行刺激，引导动作电位，测出其各相的幅度及时程，按比例绘制出图形。记录引导电极之间的距离值及对应的刺激参数。
⒌用镊子夹伤引导电极间的神经，再以同样的刺激参数进行刺激，动作电位由双相变为单相，测出其幅度及时程，按比例绘制出图形。记录引导电极之间的距离值及对应的刺激参数。 八、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈制备标本时应尽量留长。
⒉在制备标本及记录过程中应经常保持神经湿润。 ⒊屏蔽盒内不应有过多的液体，以防止造成短路。
⒋当刺激神经时，刺激电流弥散而通过引导电极记录下来就成刺激伪迹。刺激电极与引导电极之间的距离及刺激脉冲的波宽应合适，否则刺激伪迹会与动作电位的上升相重合而造成波形畸变。
⒌刺激的强度和波宽都不能过大，以免造成刺激器的损坏。 ⒍各仪器地线应接好。 思考题
⒈双相动作电位和单相动作电位产生的机理是什么？ ⒉你记录的双相动作电位的两个相是否对称？为什么？
⒊怎样理解实验中坐骨神经动作电位的幅度在一定范围内随刺激强度的变化而变化？ ⒋为什么坐骨神经动作电位的波形与刺激强度及引导电极之间的距离有关？
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实验三 神经兴奋传导速度的测定
实验原理 神经兴奋后，动作电位可以在神经纤维上传导，但其传导速度远比电传导慢。动作电位的传导速度与神经纤维的粗细、有无髓鞘及神经本身的状态有关。我们可以通过测出动作电位在神经上传导一段距离所需要的时间计算出动作电位的传导速度。
坐骨神经包含有不同传导速度的神经纤维，我们用以上方法测出的动作电位的传导速度实际上是许多神经纤维传导速度的平均值。
实验目的 了解神经兴奋传导速度测定的基本原理和方法，测定坐骨神经兴奋的平均传导速度。
实验对象 蛙或蟾蜍
实验器材和药品 计算机、生理学与神经生物学实验系统、神经标本屏蔽盒、蛙类手术器械、滤纸；任氏液。 实验步骤和观察项目
一、制备坐骨神经─腓神经或坐骨神经─胫神经标本（方法同实验二）。
二、按图2－1连接仪器，注意接好地线，检查各部分是否接通，先打开计算机电源，打开实验系统电源，再运行实验系统软件，输入学号。选择所做实验，进入实验界面。 三、参数的设置
打开参数详细设置，参数设置分三个部分：
1.刺激器 单脉冲，波宽＜0.2ms，频率：15～30Ｈz，强度：微调从０Ｖ开始
2.放大器 首先根据实验选择通道，如图2-1信号输入接入1，通道选1，通道只能选择一个；放大倍数几百倍（根据实验要求选择）,时间常数DC，滤波：10KHz。
3.采集卡 迭加模式，采样点数：200，间隔：50us。
四、将神经标本用镊子夹其结扎线从培养皿中取出，放入屏蔽盒，近心端置于刺激用电极上，远心端置于引导用电极上，用滤纸吸去多余的液体。将一片滤纸浸些任氏液贴在屏蔽盒盖内表面，使盒内保持一定的湿度，防止标本干燥。
五、调节刺激强度，选择比较典型的双相动作电位波形。
六、可以选用如下几种方法测定传导速度：
㈠如图3－1将刺激电极ｓ1、ｓ2与引导电极ｒ1、ｒ2的距离尽量拉开，如果引导的动作电位的起始处与刺激伪迹能够分开，则可测出从刺激伪迹到动作电位起始处的时程（ｔ）及刺激电极负极与ｒ1之间的距离（Ｓ），即可算出平均传导速度Ｖ：V=S/t。
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s1s2r1r2tＡ Ａ：引导装置示意图 Ｂ：动作电位
Ｂ
图3－1：两个引导电极测定动作电位传导速度的方法
㈡如果动作电位的上升相与刺激伪迹重合，则如图3－2使用三个引导电极ｒ1、ｒ2和ｒ3。从ｒ1和ｒ3引导动作电位，测出从刺激伪迹到动作电位峰间的时程ｔ1；然后从ｒ2和ｒ3引导动作电位，测出从刺激伪迹到动作电位峰间的时程ｔ2；测出ｒ1和ｒ2之间的距离Ｓ，即可算出平均传导速度Ｖ：Ｖ＝Ｓ/（ｔ1－ｔ2）。
s1s2r1r2r3t1Ａt2Ｂ
图3－2：三个引导电极测定动作电位传导速度的方法
Ａ：引导装置示意图 Ｂ：动作电位
注意事项 同实验二。 思考题
⒈你测出的传导速度与其他同学测出的是否相同？为什么？
⒉用上面所介绍的三种方法测出的传导速度是否相同？那一种测出的数据更准确？为什么
实验四 神经兴奋不应期的测定
实验原理 神经在产生一次兴奋后，其兴奋性要经历一个规律性的时相变化，即依次经历绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，而后再恢复到正常的兴奋性水平。如果我们用双刺激法引导动作电位，以第一个刺激作为条件刺激兴奋神经，第二个刺激作为测试刺激。当两个刺
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激之间的延迟较大时，可记录到两个独立的动作电位；当刺激之间的延迟逐渐减小，可观察到第二个动作电位逐渐靠近第一个动作电位，越靠近其幅值越低，直至消失。这表明第一个刺激引起动作电位后，第二个刺激处于此次兴奋后不同的兴奋性时相中。记录两个刺激之间的延迟即可得到不应期的近似值。
实验目的 观察神经在一次兴奋后兴奋性的变化，学习测定不应期的方法。 实验对象 蛙或蟾蜍
实验器材和药品 计算机、生理学与神经生物学实验系统、神经标本屏蔽盒、蛙类手术器械、滤纸；任氏液。 实验步骤和观察项目
一、制备坐骨神经─腓神经或坐骨神经─胫神经标本（方法同实验二）。
二、按图2－1连接仪器，注意接好地线，检查各部分是否接通，先打开计算机电源，打开实验系统电源，再运行实验系统软件，输入学号。选择所做实验，进入实验界面。 三、参数的设置
打开参数详细设置，参数设置分三个部分：
1.刺激器 单脉冲，波宽＜0.2ms，频率：15～30Ｈz，强度：微调从０Ｖ开始
2.放大器 首先根据实验选择通道，如图2-1信号输入接入1，通道选1，通道只能选择一个；放大倍数几百倍（根据实验要求选择）,时间常数DC，滤波：10KHz。
3.采集卡 迭加模式，采样点数：200，间隔：50us.
四、将神经标本用镊子夹其结扎线从培养皿中取出，放入屏蔽盒，近心端置于刺激用电极上，远心端置于引导用电极上，用滤纸吸去多余的液体。将一片滤纸浸些任氏液贴在屏蔽盒盖内表面，使盒内保持一定的湿度，防止标本干燥。
五、调节刺激强度，选择比较典型的双相动作电位波形。引导单相动作电位。 六、可选用以下两种方法进行实验：
㈠改变刺激参数，选择双脉冲输出，脉冲之间的延时为最大。 ⒈调节刺激强度从最小开始增加，直至引导的动作电位幅度不再增大。
⒉逐渐减小双脉冲之间的延时，使两个动作电位逐渐靠拢。当延时较大时，两个动作电位的波形和幅度相同；当延时减小到某一值时，第二个动作电位的幅度开始变小；当延时进一步减小，第二个动作电位的幅度也进一步降低，直至消失。按表4－１记录两刺激间隔的时间及两动作电位的幅值，并按比例绘制动作电位的波形。
⒊重复以上实验。当第二个动作电位幅度减小时，增大刺激强度可以使之恢复到原来的幅值，表明此时测试刺激落在第一个动作电位的相对不应期；当第二个动作电位消失时，则再增大刺激强度也不能引起第二个动作电位，表明测试刺激已经落在第一个动作电位的绝对不应期。 ㈡采用两个刺激器，选择单脉冲输出。
⒈调节条件刺激强度从最小开始增加，直至引导的动作电位幅度不再增大。将测试刺激的延时调至最大处，其它参数与条件刺激相同。
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⒉逐渐减小两个刺激脉冲之间的延时，使两个动作电位逐渐靠拢。当延时较大时，两个动作电位的波形和幅度相同；当延时减小到某一值时，第二个动作电位的幅度开始变小；当延时进一步减小，第二个动作电位的幅度也进一步降低，直至消失。按表4-１记录两刺激间隔的时间及两动作电位的幅值，并按比例绘制动作电位的波形。
⒊重复以上实验。当第二个动作电位幅度减小时，增大测试刺激强度可以使之恢复到原来的幅值，表明此时测试刺激落在第一个动作电位的相对不应期；当第二个动作电位消失时，则再增大测试刺激强度也不能引起第二个动作电位，表明测试刺激已经落在第一个动作电位的绝对不应期。 表4－１ 两刺激间的时间间隔（ms） 七、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项 同实验二。 思考题
⒈绝对不应期是等于前后两刺激的间隔时间，还是第一个动作电位的起始处到第二个刺激之间的间隔时间？为什么？
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第一个动作电位的幅值（mv） 第二个动作电位的幅（mv）