生理实验讲义(3)

2019-09-01 13:09

实验五 骨骼肌的单收缩、复合收缩和强直收缩

实验原理 肌肉兴奋表现为收缩。肌肉的收缩有两种形式:等长收缩和等张收缩。骨骼肌受到一个短暂的有效刺激后会发生一次迅速的收缩反应,称为单收缩。单收缩的全过程可分为潜伏期、收缩期和舒张期三个时相,其时间值与动物种类、肌肉类型及肌肉本身的状态有关。如果给肌肉连续两个有效的刺激,当刺激间隔大于单收缩总时程时,肌肉发生两个单收缩;当刺激间隔小于单收缩总时程时,第二个收缩与第一个收缩总和起来,发生复合收缩。如果给肌肉一连续的刺激,则肌肉的收缩反应随刺激频率的变化而改变。当刺激频率较小时,相继两个刺激的间隔大于肌肉单收缩的总时程,则肌肉发生连续的单收缩;当刺激频率逐渐增大,相继两个刺激的间隔小于单收缩的总时程,但大于收缩期,则肌肉发生复合收缩,且收缩波形呈锯齿状,称为不完全强直收缩;当刺激频率增大到一定值时,相继两个刺激的间隔小于单收缩的收缩期,则肌肉一直处于收缩状态,其收缩波形呈现为一个平台,称为完全强直收缩。强直收缩的幅度大于单收缩的幅度,并且在一定范围内,当刺激的强度和作用时间都不变时,肌肉的收缩幅度随刺激频率的增加而增大。

骨骼肌的收缩活动受支配它的神经所控制。当支配骨骼肌的神经纤维只有一部分兴奋时,则它们所支配的那一部分肌纤维发生收缩,肌肉单收缩的幅度较小;当支配骨骼肌的所有神经纤维都兴奋时,则所有肌纤维发生收缩,肌肉单收缩的幅度最大。神经纤维兴奋的数量在一定范围内与刺激强度有关。因此,在一定范围内骨骼肌单收缩的幅度随刺激强度的增加而增大。 实验目的

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⒈观察骨骼肌单收缩幅度与刺激强度的关系。 ⒉了解骨骼肌单收缩过程的时相变化。 ⒊观察骨骼肌收缩的复合现象。

⒋观察骨骼肌的收缩形式与刺激频率之间的关系。 实验对象 蛙或蟾蜍

实验器材和药品 计算机、生理学与神经生物学实验系统、机械换能器、蛙类手术器械、支架、双凹夹、肌槽;任氏液。

实验步骤和观察项目

一、 制备坐骨神经─腓肠肌标本(同实验一)。

二、将标本固定在肌槽上,按图5-1连接装置,并使肌肉处于自然拉长状态。注意接好地线,因市电干扰如果加在标本上会造成标本损伤。

图5-1:

记录骨骼肌收缩曲线的实验装置

三、参数的设置

打开参数详细设置,参数设置分三个部分: 1.刺激器

单脉冲,波宽<0.2ms,频率:1Hz,强度:0.1V开始 2.放大器

首先根据实验选择通道,如图2-1信号输入接入3,通道选3,通道只能选择一个;放大倍数几百倍(根据实验要求选择),时间常数DC,滤波:1KHz。

3.采集卡

用连续模式,采样间隔为12500us。

四、按如下步骤进行实验: ⒈点击

按钮,开始采样,点击刺激控制按钮,开始刺激,如无信号停止刺激,停止采

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样,逐渐增大刺激强度,记录刚能引起肌肉收缩的刺激强度。随后随着刺激强度的增加肌肉收缩幅度也不断增加,直至产生最大单收缩。记录此时的刺激强度,固定此刺激强度进行以下实验。 ⒉改变采样间隔,记录单收缩波形,分辨其三个时相。

⒊改变刺激参数用双脉冲刺激,调节脉冲之间的延时,记录两个收缩分别在舒张期及收缩期的复合收缩曲线。

⒋用复刺激方式,刺激频率从小到大,观察肌肉收缩从连续的单收缩、不完全强直收缩直到完全强直收缩。

五、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项

⒈所有仪器应接地良好。

⒉保持标本湿润,但也要防止刺激电极短路。

⒊刺激肌肉的时间不应过长,在每次刺激之后必须让标本有相同的休息时间,以防肌肉疲劳。 思考题

⒈为什么在一定范围内骨骼肌的单收缩幅度随刺激强度的增加而增大? ⒉为什么骨骼肌会发生复合收缩?

⒊同一块肌肉,其单收缩、复合收缩和强直收缩的高度是否相同?为什么? ⒋不同的骨骼肌,引起完全强直收缩的刺激频率是否相同?为什么? ⒌动作电位会不会有总和现象?为什么?

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实验六 人体血型鉴定与交叉配血

实验原理 血型就是红细胞上特异抗性原(凝集原)的类型。在ABO血型系统,根据红细胞上是否含有A、B凝集原而分为A、B、AB和O型。血清中含有凝集素,且A凝集原只能与抗A凝集素结合,B凝集原只能与抗B凝集素结合。血型鉴定即是将受试者的红细胞加入标准A型血清(抗B血清)及标准B型血清(抗A血清)中,观察有无凝集现象,从而测知受试者红细胞上凝集原的类型。 交叉配血实验是将供血者的红细胞和血清分别和受血者的血清和红细胞混合,观察有无凝集现象。其目的,一是鉴定所测血型是否正确;二是观察是否还有其它不能输血的因素存在,以确保安全输血。

实验目的 学习血型鉴定和交叉配血的方法 实验对象 人

实验器材和药品 显微镜、离心机、采血针、双凹载玻片、滴管、1ml吸管、小试管、试管架、牙签、消毒注射器及针头;标准A、B型血清、生理盐水、75%酒精、碘酒、棉球、消毒棉签。

实验步骤和观察项目

表6-1

凝 集 现 象被检者血型标准A型(抗B)血清标准B型(抗A)血清被红细检胞悬者液--++-+-+O 型A 型B 型AB型

注:+代表凝集,-代表未凝集。

一、血型鉴定:

⒈用75%酒精棉球消毒左手无名指端,用消毒采血针刺破皮肤。用吸管吸1滴血于盛有1ml生理盐水的小试管中,混匀制成红细胞悬液。

⒉取一双凹载玻片,在左上角写A字,右上角写B字,将1滴标准A型(抗B)血清滴在右侧凹内,1滴标准B型(抗A)血清滴在左侧凹内。滴管切勿混用。

⒊用滴管吸取红细胞悬液,分别滴1滴于载玻片两侧的血清上,注意不要使滴管尖端与血清

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接触,用牙签两端分别混匀。

⒋10~30分钟后用肉眼观察有无凝集现象。根据表6-1报告鉴定结果 二、交叉配血:

⒈以碘酒、酒精消毒皮肤后,用消毒的干燥注射器抽取供血者静脉血2ml,取1滴加入盛有生理盐水1ml的小试管中,制成红细胞悬液;其余血液装入另一小试管中,待其凝固后离心分离血清;在试管上分别注明“供红”和“供清”。

⒉同法制成受血者的红细胞悬液及血清,分别注明“受红”和“受清”。

⒊取一双凹载玻片,在左上角写“供红受清”,右上角写“供清受红”。分别用滴管吸取“供红”、“受清”各1滴于左侧凹内,再分别用滴管吸取“供清”、“受红”各1滴于右侧凹内,用牙签两端分别混匀。

⒋10~30分钟后观察结果。如两侧均无凝集现象,表示血型配合,可以输血。 注意事项

⒈操作时各滴管不能混用。

⒉肉眼看不清凝集现象时,应在显微镜下观察。

⒊红细胞悬液不能太浓或太淡,否则可能出现假阴性反应。

⒋必须注意区分红细胞叠连现象与凝集现象。前者经混匀或摇晃,串状的红细胞即可分开,而后者决不会因此而有所变化。

⒌静脉采血必须严格按临床化验要求进行操作。如本实验室不具备条件,可免做交叉配血实验。 思考题

⒈如果有标准A型红细胞和标准B型红细胞,但无标准血清时,能否进行血型鉴定? ⒉为什么血型相同的人之间输血仍要做交叉配血实验?

实验七 心脏起搏点

实验原理 心脏的特殊传导系统具有自动节律性,并且其各部位的自律性高低不同。正常情

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