硫 酸0.1%0.3%0.5%反 射 时123平 均
注意事项
⒈每测一次反射时后,应立即用清水冲洗脚趾并擦干,以保护皮肤感受器,并防止冲淡硫酸溶液。
⒉刺激时硫酸浓度应从低到高,每次刺激时应保持相同的刺激面积,在换另一种浓度的硫酸进行实验时,应先休息3~5分钟。
⒊蟾蜍脑要破坏完全,但不能损伤脊髓,以免破坏反射中枢。
实验十九 反射弧分析
实验原理 在中枢神经系统参与下,机体对刺激所作的规律性应答称为反射。反射活动的结构基础是反射弧,它一般包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五个组成部分。反射的实现必须有完整的反射弧,反射弧的任何一部分受到破坏,都将使反射不能实现。由于脊髓是中枢神经系统的低级部位,机能比较简单,所完成的反射比较容易观察,故常用脊动物进行反射弧分析。
实验目的 通过实验分析反射弧的组成,了解反射弧的完整性与反射活动的关系。 实验对象 蟾蜍或蛙
实验器材和药品 蛙类手术器械、支架、直棒、浸蜡纸片、滤纸、纱布、小烧杯、培养皿;0.5%及1%硫酸、1%普鲁卡因、任氏液。 实验步骤和观察项目
一、制备脊动物 用探针划断蟾蜍脑与脊髓的联系,毁脑保留脊髓。注意用棉花止血。 二、将脊动物俯卧固定在蛙板上。剪开左侧大腿皮肤,分离肌肉和结缔组织,暴露坐骨神经,在神经下穿一条丝线,并垫一浸蜡纸片。 三、用大头针钩住动物的下颌,悬挂在支架上。 四、按以下步骤进行实验观察:
⒈用0.5%硫酸,分别刺激二后肢的中趾趾端,观察两腿有无屈反射发生。立即清洗脚趾,并用纱布擦干。
⒉在右侧膝关节处,将皮肤作一环形切口,剥去下肢皮肤,再用0.5%硫酸刺激右脚趾,观察两腿是否出现屈反射,并立即洗净脚趾。
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⒊将浸过1%硫酸的滤纸片贴在左后肢的皮肤上,观察两腿是否出现屈反射,并立即洗净脚趾。
⒋在左后肢的坐骨神经上放一浸过普鲁卡因的小棉球,每隔1分钟用0.5%硫酸刺激该后肢脚趾,观察两腿是否出现屈反射,并立即洗净脚趾。
⒌当左后肢刚刚不出现反应时,立即将浸过1%硫酸的滤纸片贴在左侧背部,观察两侧肢体是否出现搔扒反射。
⒍每隔1分钟,重复一次步骤5,直到刺激身体任何部位都不能引起左后肢的反应。 ⒎用镊子夹右后肢,观察有无屈反射发生。
⒏用探针捣毁脊髓,观察有无屈反射及搔扒反射发生。 五、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈制备脊动物时不能损伤脊髓。
⒉硫酸刺激时间不能太长,刺激停止后应立即用清水洗去硫酸溶液,以免损伤皮肤感受器。 思考题
⒈分析本实验中屈反射的反射弧包括哪些组成部分。
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实验二十 谢切诺夫抑制和脊髓反射的外周抑制
实验原理 各种脊髓反射的中枢之间可出现相互抑制,也可受神经系统高级中枢的抑制作用。如果除去高级中枢的抑制,则脊髓反射中枢的兴奋性将会提高,反射时缩短。如果同时刺激皮肤的不同部位,由于不同脊髓反射中枢均发生兴奋并产生相互抑制,因而单独刺激时能引起的脊髓反射也会被抑制或反射时延长。
实验目的 观察和了解中枢神经系统各部位间的抑制现象。 实验对象 蟾蜍或蛙
实验器材和药品 蛙类手术器械、手术刀、秒表、支架、直棒、滤纸、纱布、培养皿、小烧杯、盐粒;任氏液,0.3%硫酸。 实验步骤和观察项目 一、谢切诺夫抑制
⒈用纱布将蟾蜍包好,沿颅顶正中线切开皮肤,用手术刀分向两侧。然后从鼻孔向后小心地剖开颅骨,暴露整个脑组织。
⒉用手术刀切去大脑半球及部分(约1/4~1/3)视叶(如图20-1),数分钟后,待动物的脊髓休克现象过去,将动物挂在支架上。
⒊用0.3%硫酸刺激一侧后肢中趾趾端,测其屈反射的反射时,同时注意观察动物的姿态。共测三次(取平均),如反射时比较稳定,即可进行下列实验。
大脑半球 ⒋取一小块盐粒放在视叶断面上,立即用0.3%硫酸刺激同侧后肢中趾趾
谢切诺夫抑制实验切断线小脑谢切诺夫抑制实验切断线小脑端,测屈反射的反射时,并观察动物的姿态。注意与步骤3所测反射时进行比较。
⒌取下盐粒,用任氏液洗断面数次,再用硫酸测反射时,并与步骤3、4所测值进行比较。 二、脊髓反射的外周抑制 ⒈在延脑与脊髓间切断(如图20- 视叶大脑半球延脑视叶延脑脊髓反射外周抑制实验切断线 图20-1:蛙脑脊髓反射外周抑制实验切断线42 1)。待脊髓休克过去后,用0.3%硫酸测定一侧后肢屈反射的反射时。
⒉测定一侧后肢对硫酸刺激的反射时,同时将镊子用力夹另一后肢的脚趾(或用止血钳夹住另一后肢的脚趾),硫酸刺激原应引起的屈反射可被抑制。放松镊子(或止血钳),则受硫酸刺激的后肢立即发生屈反射。
三、对所观察的实验现象进行讨论。 注意事项
⒈剪开颅骨时,要防止损伤脑组织。
⒉暴露脑组织后,用棉花止血时不能重压,以免脑组织发生损伤。
⒊盐粒放在视叶断面上不能超过50秒(不论是否出现反应),否则会损伤脑组织。
⒋夹动物后肢时,用力不能太大,以免损伤脚趾。
实验二十一 大脑皮层运动机能定位
实验原理 大脑皮层运动区是调节躯体运动机能的较高级中枢,它通过锥体系和锥体外系控制脑干和脊髓运动神经元的活动,从而调节肌肉运动。电刺激运动区的不同部位,能引起特定的
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肌肉产生运动。这些不同部位在高等动物的运动区呈有秩序的排列,并与肌肉的分布相对应。在较低等的哺乳动物如兔,其大脑皮层比较光滑,几乎没有沟回,运动区机能定位不太精确。 实验目的 观察电刺激大脑皮层运动区所引起的躯体运动效应,了解皮层运动区对躯体运动调节的定位关系。 实验对象 家兔
实验器材和药品 哺乳类手术器械、骨钻、咬骨钳、骨蜡(或止血海绵)、电刺激器,普通电极、纱布、兔手术台;生理盐水、20%氨基甲酸乙酯、液体石蜡。 实验步骤和观察项目
一、将兔用20%氨基甲酸乙酯耳缘静脉注射(3ml/Kg体重)轻度麻醉,俯卧固定在兔手术台上。
二、剪去头部的毛,从眉间至枕部沿矢状线切开皮肤及骨膜,用刀背将肌肉分向两侧并刮去骨膜。用骨钻钻开颅骨,注意勿伤硬脑膜。用咬骨钳
ba扩大颅骨开口,暴露大脑上侧面,注意勿伤及矢状窦。如出血可用骨蜡或止血海绵止血。用小镊子夹起硬脑膜,仔细剪开,暴露大脑皮层,然后滴上少量温热液体石蜡油,以防皮层干燥。
三、放松动物的头部和四肢,在白纸上画一张家兔大脑半球背面观的轮廓图(如图21-1)。 四、选择适宜的刺激强度,逐点刺激大脑皮层不同部位,观察躯体运动反应,并将观察的反应标记在已画好的轮廓图上(如图21-1)。刺激参数:波宽<0.2ms,强度10~20V,频率20~100Hz,刺激持续时间1~5秒。每次刺激后休息1分钟。
图21-1:兔脑刺激效应示意图 a:感觉运动区 b:下颌运动区 示颜面肌和下颌动 示下颌动 示四肢动 示前肢动 示头动 五、画出家兔大脑皮层运动区机能定位图,并对实验结果进行讨论分析。 注意事项
⒈动物麻醉不宜过深,否则会影响刺激效应。 ⒉开颅时尽量不要把硬脑膜弄破,以免出血过多。
⒊选择合适的刺激参数。刺激强度不能太大,以免损伤脑组织。 ⒋刺激电极间距越小越好,但不能短路。
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