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分析项目SOP文件 编号：LJ-FXXMSOP-07/01 版本：2009-A/0 生效日期：20090220
一、红细胞计数（目视计数法）标准操作规程 第 2 页 共 2 页 6.4 用高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的RBC，。 6.5 操作注意事项
6.5.1 大小方格内压线细胞应按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。 6.5.2 稀释液应过滤，小试管和计数板须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。 6.5.3 计数时，两次重复计数误差不得超过10%。 7 结果计算
计算公式：红细胞数/L＝5个中方格内RBC总数×5×10×201×10
＝5个中方格内RBC总数/100×1012
8 检验结果报告
8.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
8.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
8.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 9 参考范围与医学决定水平
9.1 参考范围：男性：（4.2～6.0）×1012/L； 女性：（3.9～5.3）×1012/L
9.1 医学决定水平：高于6.8×10/L应采取相应的治疗措施；低于3.5×10/L为诊断贫血的界限；低于1.5×1012/L是输血的指标。 10 临床意义
10.1 显微镜RBC计数目前已不常做，本室保留这一方法一般用于对血细胞计数仪分析结果有疑问结果的复查，和某些特殊标本的检查。
10.2 本法另一个重要的用途是用于对血球计数分析仪的校准。严格按本程序操作重复计数10～20次新鲜血液标本的结果可作为血球计数分析仪校准的靶值。 11 有关引用程序与文件 11.1 标本送检和接收程序。 12 参考文献
12.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
12.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
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二、红细胞形态检查标准操作规程 第 1 页 共 3 页
1 检验申请
单独检验项目申请：红细胞形态检查；组合项目申请：血液常规测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 采血前受检者保持安静、放松状态，环境温暖，防止静脉挛缩。一般采用坐姿采血。
2.2 以皮肤采血法从耳垂、指端、(婴幼儿)足跟等处采集末稍血。或用一次性无菌注射器采静脉血2.0ml，置于含EDTA-K2的真空管中，颠倒混匀抗凝，及时送检。 2.3 采集未梢血时，先拭去自然流出(或适当力度挤出)的第一滴血，再按PLT、RBC、HGB、WBC的标本采集顺序采集标本。
2.4 将末稍血一滴滴在玻片上，立即以规范的操作推成血液涂片
2.5 检验申请单和血标本涂片或血标本试管标上统一且唯一的标识符。在检验申请单上填写标本采集时间。 2.6 采血后在4h内完成检测。
2.7 检测后的标本处理：一般的染色血片室温保存24h，有诊断和鉴别诊断价值的阳性血片按编号顺序妥善保存一段时间，以备复查。 3 方法原理
将细胞分布均匀的血涂片，作瑞氏复合染料染色后，由于不同的细胞及其不同成分对酸性及碱性染料的结合的多少不同，从而使各种细胞呈现出各自的染色特点，于显微镜下识别。各种贫血患者的红细胞在体积、形态、结构、着色方面有不同程度的改变。
4 试剂及其他用品
4.1 试剂：快速瑞－姬氏复合染色液，Baso试剂。 5 适用仪器
显微镜。 6 检测步骤
6.1 按规定制备血液涂片。推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。
6.2 推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。天气寒冷或潮湿时，应于37℃温箱 中保温促干，以免细胞变形缩小。
6.3 用蜡笔在血膜两头划线，以防染色液溢出，将血片平放在染色架上。滴加染色液A液2～4滴，盖住血膜，染色30秒。。再滴加B 液，量为A 液的两倍，染色1分钟。
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二、红细胞形态检查标准操作规程 第 2 页 共 3 页
6.4 流水冲去染液，待干备用。
6.5 镜检，选择涂片的体尾交界处染色良好区域，先以低倍镜快速扫描，估计细胞的分布和染色情况，注意血片的边缘和尾部是否有巨大异常细胞和微丝蚴等，选择最佳的细胞在高倍镜和油镜下观察BRC形态。 7 结果计算
可以计算异常RBC占RBC总数百分比。 8 检验结果报告
8.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
8.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
8.3 检查结果以“异常RBC占RBC总数百分比” 报告，也可用“极个别、个别、少数、部分、大部分”等文字描述报告。 9 参考范围与医学决定水平
参考范围：瑞氏染色血涂片正常成熟RBC形态：双凹圆盘形，细胞大小相似，直径6～9μm，淡粉红色，中央为生理性淡染区，细胞内无异常结构。正常人血液中一般不可见异常形态红细胞。 10 临床意义
10.1 RBC 大小不一：正常红细胞大小较为一致，直径为6～9μm。凡直径大于10μm者为大红细胞，＞15μm为巨红细胞，常见于巨幼细胞性贫血、骨髓增生异常综合征、肝脏疾病等；直径＜6μm为小红细胞，多见于缺铁性贫血。在分析贫血原因时，RBC大小是指细胞体积的大小而不只是直径大小。染色过浅的小RBC提示HGB合成障碍，体积较大的RBC常为未完全成熟的RBC，因残留DNA而呈嗜多色性或有嗜碱性点彩，分别主要见于缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血与恶性贫血等。
10.2 RBC内HGB含量改变(染色异常)：表现为正常色素性、低色素性、高色素性和多色性。
10.3 RBC形状改变：
10.3.1 球形RBC：红细胞直径变小，厚度增加，细胞中心染色较正常RBC深，细胞呈小圆球形。常见于遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病（HbS 和HbC病等）。
10.3.2 椭圆形RBC：红细胞呈椭圆形，横径缩短，长径增大，有时可呈畸形。正常人也可见到，但最多不15超过%。多见于遗传性椭圆形红细胞增多症，大细胞性贫血等。
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二、红细胞形态检查标准操作规程 第 3 页 共 3 页
10.3.3 靶形RBC：比正常红细胞扁薄，中心有少许血红蛋白，部分可与周围的血红蛋白连接，边缘部染色较中央深，故呈靶状。主要见于：珠蛋白生成障碍性贫血，严重缺铁性贫血，一些血红蛋白病，肝病、脾切除术后及阻塞性黄疸等。
10.3.4 口形RBC：红细胞淡染区呈口状狭孔，主要见于口形红细胞增多症，与急性酒精中毒。
10.3.5 镰形RBC：细胞狭长似镰刀，也可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症。
10.3.6 棘形RBC：棘形红细胞是一种带刺状的红细胞，刺呈针刺状或尖刺状，见于棘形红细胞增多症，严重肝病或制片不当时。
10.3.7 其他如泪滴形RBC、锯齿细胞、裂红细胞、缗钱状形成、有核RBC等。 10.4 RBC内出现异常结构：包括嗜碱性点彩红细胞，卡玻环、染色质小体和有核红细胞等。
10.5 RBC内发现寄生虫如疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等。 11 有关引用程序与文件 11.1 标本送检和接收程序。 12 参考文献
12.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
12.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
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三、红细胞比积测定标准操作规程 第 1 页 共 2 页
1 检验申请
单独检验项目申请：红细胞比积测定（缩写HCT）；组合项目申请：血液常规测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 采血前受检者保持安静、放松状态，环境温暖，防止静脉挛缩。一般采用坐姿采血。
2.2 用一次性无菌注射器采静脉血2.0ml，置于含EDTA-K2的真空管中，颠倒混匀抗凝，及时送检。也可用双草酸盐或肝素作抗凝剂，视同时作其他检查的项目而定。 2.3 采血时压脉带绑扎时间不能超过1min，顺利采血，血液与抗凝剂混匀要充分，不能产生气泡，避免溶血，否则均影响测定结果的准确性。
2.4 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。
2.5 采血后在4h内完成检测。检测前标本置室温即可，不能放置4～8℃环境（否则血小板易被激活发生聚集）。
2.6 检测后的标本处理：EDTA-K2抗凝血标本保持完整的编号，加盖后于室温中保存2天，以备复查。 3 方法原理
离心法。将一定量抗凝血标本置于孔径统一的温氏管，以规定转速和规定的时间离心，读取RBC细胞层占全血的体积比。 4 试剂及其他用品 4.1 试剂：抗凝剂。 5 适用仪器
水平离心机，温氏管。 6 检测步骤
6.1 用长毛细吸管吸取混匀的。抗凝血，插入温氏管底部，将血液缓慢注入至刻度“100”处。注意不能有气泡。用小橡皮塞塞紧管口。
6.2 将灌好血的温氏管置水平离心机中，以相对离心力2264×g水平离心30min。 6.3 记录RBC层高度，再离10min，至RBC层不再下降，RBC细胞层高度比全血高度（100）即为HCT。
6.4 以微量法操作时，以毛细管替代温氏管实验。 7 结果计算
7.1 直接读取结果：离心后血液分为五层，从上至下依次为血浆、PLT、WBC、紫黑红色氧合HGB被WBC代谢还原的RBC层、和最下层的含氧RBC层，读RBC柱高度以紫