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分析项目SOP文件 编号：LJ-FXXMSOP-07/16 版本：2009-A/0 生效日期：20090220
十六、血红蛋白氰化高铁法测定标准操作规程 第 2 页 共 3 页 6 检测步骤
6.1 小试管1支，加HiCN试剂 5.0 ml。
6.2 用微量血红蛋白吸管准确吸取抗凝全血(或末梢血)20微升，擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管试剂中，轻轻将血放出，并吸取上层清液，漱洗吸管二次，最后用手摇动试管混和。
6.3 静置5 min，在分光光度计上比色，读取540 nm波长处的吸光度 6.4 用血红蛋白仪可直接读取HGB浓度。 7 结果计算
计算公式：HGB（g/L）＝测定管吸光度×64458/44000×251×367.7
注：64458是国际公认的HGB分子量，44000是1965年ICSH公布的HGB毫摩尔消光素数，251是稀释倍数。 8 检验结果报告
8.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
8.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
8.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 9 参考范围与医学决定水平
9.1 参考范围：男性：120～160 g/L； 女性：110～150 g/L 新生儿：170～200 g/L 10 临床意义
10.1 1996年，ICSH推荐HiCN分光光度法作为HGB测定的国际标准参考方法。其他广泛的HGB测定结果都必须以HiCN法为标准。
10.2 本法另一个重要的用途是用于对血球计数分析仪的校准。严格按本程序操作测定新鲜血液标本的结果可作为血球计数分析仪校准的靶值。 10.3 HGB增高基本与RBC增多一致。
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十六、血红蛋白氰化高铁法测定标准操作规程 第 3 页 共 3 页 10.4 HGB减少基本与RBC减少一致，通常称为贫血。公认贫血的诊断标准为成年男性HGB＜110 g/L，HCT＜41%；成年女性HGB＜110 g/L，HCT＜37%
10.5 HGB浓度作为贫血分级的依据：轻度贫血：HGB 91～120 g/L；中度贫血：HGB 61～90 g/L；重度贫血：HGB 31～60 g/L；极重度贫血：HGB ＜30 g/L 11 有关引用程序与文件 11.1 标本送检和接收程序。 12 参考文献
12.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
12.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
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十七、浆膜腔积液常规检查标准操作规程 第 1 页 共 2 页
1 检验申请
单独检验项目申请：浆膜腔积液常规检查；临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 由穿刺取得的标本为防止细胞变性出现凝块或细菌破坏溶解等，送检及检查必须及时。
2.2 为防止凝固，最好加入100g/L乙二胺四乙酸二钠抗凝，每0.1ml可抗凝6ml浆膜腔积液，及时完成细胞涂片检查。
2.3 检验申请单和标本试管标上统一且唯一的标识符。在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。 3 检测步骤
3.1 理学检查：记录标本颜色、透明度，有无凝固物质或沉淀物，可按浆液性、粘液性、黄色透明、脓样浑浊、乳糜样、血样等报告。 3.2. 浆膜粘蛋白定性试验（Rivalta反应）：
3.2.1 原理：渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。5.2操作：取100ml量筒，加蒸馏水100ml滴入冰醋酸0.1ml(PH3~5),充分混匀，静止数分钟，将穿刺液先靠近量筒液面逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。
3.2.2 结果判断：在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下降，而且形成较长的沉淀物，即Rivalta反应阳性。如产生白色浑浊不明显，下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。[阴性：清晰不显雾状；（±）渐呈白雾状；（+）加后呈白雾状；（2+）白薄云状；3+]白浓云状。] 3.3 细胞学检查：
3.3.1 细胞总数：对澄清的浆膜腔积液可混匀后直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每微升的细胞数。再换算成每升浆膜腔积液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞乘以10，即得每微升浆膜腔积液中细胞总数。如用升表示，则再乘以106。浑浊或带血的浆膜腔积液可用一次性微量吸管吸取混匀的浆膜腔积液20微升，加入含生理盐水0.38ml的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4 个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每微升浆膜腔积液的细胞总数。漏出液中有核细胞数量常在100/ul以下，渗出液中有核细胞数量较多，常在500/ul以上。
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十七、浆膜腔积液常规检查标准操作规程 第 2 页 共 2 页
3.3.2 有核细胞计数：
3.3.2.1 非血性标本：小试管内放入冰乙酸1~2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的浆膜腔积液3~4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。
3.3.2.2 血性标本：将混匀的浆膜腔积液用1%冰醋酸溶液稀释后进行计数。 3.4 细胞分类：穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片后以瑞氏染色法进行分类。必要时制备稍厚涂片，在干燥前放置乙醚乙醇等量混合液中固定30分钟，用苏木素-伊红或巴氏法染色查找癌细胞。 4 检验结果报告
4.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
4.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
4.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 5 有关引用程序与文件 5.1 标本送检和接收程序。 6 参考文献
6.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
6.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
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十八、脑脊液常规检查标准操作规程 第 1 页 共 5 页
1 检验申请
单独检验项目申请：脑脊液常规检查；临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 标本送验必须及时，收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破坏或溶解。
2.2 细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。
2.3 检验申请单和标本试管标上统一且唯一的标识符。在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。 3 检测步骤
3.1 一般性状检查：
3.1.1 主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊。绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰氏染色检查细菌，并应及明接种培养基。
3.1.2 颜色：正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下，脑脊液可呈不同颜色改变。
3.1.3 透明度：正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300×106/L时可变为混浊；蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊；结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混；而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。
3.1.4 凝块或薄膜：正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物，结核性脑膜炎的脑脊液静置12-24小时后，可见表面有纤维的网膜形成，取此膜涂片检查结核杆菌，阳性率较高。蛛网膜下隙梗阻时，由于阻塞，远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L，此时脑脊液呈黄色胶冻状。
3.2 潘氏（Pandy）球蛋白定性试验：
3.2.1 原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。
3.2.2 操作：取潘氏试剂(5%苯酚溶液) 2～3ml,置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1～2滴，衬以黑背景，立即观察结果。