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七、白细胞分类计数（目视计数法）标准操作规程 第 2 页 共 3 页 6.3.1 在干燥血片上滴A液0．5～0．8ml，染色30秒。 6.3.2 在血片上滴入B 液，量为A 液的两倍，染色1分钟。 6.3.3 将血片置流水中冲洗。
6.3.4 先用低倍镜观察全片的染色质量和细胞分布情况，注意血片的边缘和尾部是否有巨大异常细胞和微丝蚴等。
6.3.5 选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞扬占比值（百分率）。 6.4 操作注意事项：
6.4.1 要避免重复计数，玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈“弓”字曲线移动。 6.4.2 白细胞总数超过20×10/L，应分类计数200个细胞。白细胞数明显减少的血 片，可检查多张血片。
6.4.3 白细胞形态变化较大，应经常由高年资检验人员进行核实，以减少误差。 6.4.4 禁止在计数池内或涂片下用高倍镜作白细胞分类。 7 检验结果报告
7.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
7.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
7.3 如收到标本的质量可能对结果有影响的也在报告单上指出。 8 参考范围
细胞类别 成 人 中性粒细胞
杆状核 0.01～0.05 分叶核 0.50～0.70 嗜酸性粒细胞 0.005～0.05 嗜碱性粒细胞 0～0.01 淋巴细胞 0.20～0.40 单核细胞 0.03～0.08 9 临床意义 9.1 增多：
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七、白细胞分类计数（目视计数法）标准操作规程 第 3 页 共 3 页 9.1.1 中性粒细胞：见于大多数细菌性感染、急性出血及溶血、手术后、重金属中毒、粒细胞白血病等。
9.1.2 淋巴细胞：百日咳、结核、各种病毒性感染、淋巴细胞白血病等。
9.1.3 单核细胞：结核、伤寒、亚急性细菌性心内膜炎、疟疾、单核细胞白血病。 9.1.4 嗜酸细胞：变态反应、寄生虫病、皮肤病、 烧伤后等。 9.1.5 嗜碱细胞：重金属中毒、霍奇金病、慢粒。 9.2 减少：
9.2.1 中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、各种病毒感染、化学物质中毒、放化疗后、再障。
9.2.2 淋巴细胞：各种感染急性期、细胞免疫缺陷症等。 9.2.3 嗜酸：伤寒、副伤寒、使用肾上腺皮质激素后。 10 有关引用程序与文件 10.1 标本送检和接收程序。 11 参考文献
11.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
11.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
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八、白细胞形态检查标准操作规程 第 1 页 共 3 页
1 检验申请
白细胞形态检查一般不作为单独检验项目，检查内容包含在白细胞分类计数中；组合项目申请：血液常规测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理
2.1 采血前受检者保持安静、放松状态，环境温暖，防止静脉挛缩。一般采用坐姿采血。
2.2 皮肤采血法采取末捎血液标本，立即按规范的血涂片制作方法制备涂片。也可用已采集的静脉抗凝血制备血涂片。
2.3 采集末梢血时，先拭去自然流出(或适当力度挤出)的第一滴血，再按PLT、RBC、HGB、WBC的标本采集顺序采集标本。
2.4 检验申请单和血标本涂片标上统一且唯一的标识符。在检验申请单上填写标本采集时间
2.6 末稍血稀释标本应在30 min内完成检测。已检测的标本血涂片一般保留24h，特殊发现的血片可适当保留一定时间，以备复查。 3 方法原理
将细胞均匀分布的血涂片，作常规染色，由于不同的细胞及其不同成分对酸性及碱性染料的结合的多少不同，而呈现出各自的染色特点。在显微镜下进行形态检查。 4 试剂及其他用品
4.1 试剂：瑞氏染色液、瑞-姬氏染色液。由BASO公司出品。 5 适用仪器
适用显微镜。 6 检测步骤
6.1 规范的操作制备合格的血涂片，自然干燥。
6.2 用蜡笔在血膜两侧划线，以防染液溢出，将血片平放在染色架上，滴加染液盖住血膜染色10～30 s。
6.3 滴加缓冲液，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染色液充分混合。 6.4 用流水冲去染液，待干备用。
6.5 镜检：选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在高倍镜和油镜下观察WBC形态。 7 结果计算
计算异常WBC占100个WBC的百分比。
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8 检验结果报告
8.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。
8.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
8.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
8.4 以异常WBC的百分比报告，也可以极个别、个别、少数、部分、大部分等的描述报告。 9 参考范围
正常WBC形态：经瑞氏染色的正常WBC根据细胞大小、细胞核和细胞质的特征可分为六种类型，分别为中性杆状核、中性分叶核粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。 10 临床意义
10.1 中性粒细胞和毒性变化：在严重传染病、化脓性感染、中毒、恶性肿瘤、大面积烧伤等病理情况下，中性粒细胞可出现大小不均、中毒颗粒、空泡、Dohle小体、退行性变等形态改变，反映细胞操作的程度，可以单独出现，也可同时出现。中性粒细胞的毒性变化，对估计疾病的预后有一定帮助。通过计算含有中毒颗粒的细胞数与所检中性粒细胞数的比例，得出“毒性指数”，大小与病情程度相关。
10.2 巨多分叶核中性粒细胞：这种细胞体积较大，核分叶常多于5叶。常见于MegA、抗代谢药物治疗后。
10.3 棒状小体：WBC胞质中出现紫红色细杆状物质，1条或数条不等。这种细胞只出现在白血病细胞中，见到棒状小体细胞就可确认为急性白血病。棒状小体细胞在急性粒细胞性白血病的幼稚粒细胞胞质中较为多见，呈粗短棒状，常为1～2条；在颗粒增多的早幼粒细胞白血病(M3型)中则可见数条至数十条成束的棒状小体；急性单核细胞白血病的幼稚单核细胞中也可出现，常为1条细而长的棒状小体。
10.4 异型淋巴细胞：在传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎。出血热等病毒性感染时或过敏原刺激下，淋巴细胞增生并出现形态学变化。现在认为异型淋巴细胞多为T淋巴细胞，其形态变异系增生亢进，甚至发生母细胞化的结果。 10.5 淋巴细胞性白血病时形态学变化：在急、慢性淋巴细胞性白血病时，不但出现各阶段的原幼细胞，而且处于各分化阶段的白血病细胞都特殊的形态学变化。 11 有关引用程序与文件
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11.1 标本送检和接收程序。 12 参考文献
12.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社， 2004.
12.2 叶应妩，王毓三，申子瑜主编出版社，2006.
. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学