药物化学实验指导
3.仪器组装完成后，各部分应保持在同一平面，以确保各连接部位的气密性较好。 4.适合萃取分离的混合物需满足两个方面的条件：一是两个相互接触的液相完全是不互溶或是部分互溶；二是被萃取的溶质组分和稀释剂在两液相中的分配比不相同。
5.分液漏斗洗涤干净后应把塞子拔出来，不能插在分液漏斗中，分液漏斗长期不使用时，应在活塞面夹一纸条以防止活塞粘连，同时应用橡皮筋套住活塞，防止活塞掉落。 七、思考题
1.抽滤时安全瓶里的玻璃弯管为什么要左高右低？ 2.索氏提取法与回流提取相比有哪些优缺点？ 3.水蒸汽蒸馏适合于什么类型的药物的提纯？
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第三部分 药物化学基本实验项目
实验二 葡萄糖旋光度的测定
前言：当平面偏振光经过含有光学活性的化合物的液体或溶液时，将导致旋光现象的产生，即偏振光在平面向左或向右发生旋转，其旋转的度数，叫旋光度。当偏振光透过长度为1dm且1 ml溶液中含有1g旋光性物质的溶液时，在一定的波长和一定的温度下我们所测得的旋光度叫比旋度。通过测定药物的比旋度（或旋光度）能够检测特定成分的纯度，也可以测定其含量。除有特殊的规定以外，通常是根据药典的规定采用钠光谱的D线（波长为589.3 nm）测定被测物质的旋光度，测定管长度通常为1dm（如是采用其它长度的测定管，必须换算），测定温度为20 ℃。旋光度测定法主要应用于如下几个方面：（1） 进行药物鉴别：通常具有旋光性的药物，在其性状一栏都标写 “比旋度”，通过测定比旋度的值可以用于鉴别药物或判断药物的纯度；（2）进行杂质检测：具有光学异构体的药物，其理化性质基本相同，但它们的旋光性有差异，通常分为左旋体、右旋体和消旋体，我们可以通过测定药物中杂质的旋光度，进行药物纯度的检验；（3） 进行含量测定：有旋光性的药物，在没有其他更好的方法测定该药物含量时，可用测定其旋光度的方法。《药典》中用旋光度法测定含量的药物有葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、右旋糖酐氯化钠注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液等。
一、实验目的和要求
1.了解旋光仪的基本构造与工作原理。
2.熟悉葡萄糖旋光度的测定方法、原理及比旋光度的计算方法。
3.掌握利用测定药物旋光度的方法进行定性、杂质检测和定量分析的方法。 二、实验内容与原理
实验内容：1.测定葡萄糖的旋光度。2.采用标准曲线法测定葡萄糖注射液的含量。 实验原理：葡萄糖分子的结构中有4个手性碳原子，分子有旋光性。其D-（+）-葡萄糖可以供药用，其比旋光度[α]= +52.50°~53.00°。通过测定葡萄糖注射液旋光度可进行葡萄糖定性鉴别与葡萄糖含量测定。
在旋光仪起偏镜与检偏镜之间放入旋光性物质，如果起偏镜与检偏镜允许通过的偏振光的方向相同，在检偏镜后面观察到的视野是明亮的；如果在起偏镜与检偏镜之间放入有旋光性的物质，由于物质的旋光作用，使得原来由起偏镜出来的光的方向旋转了一定的角度α，导致在检偏镜后面进行观察时，视野会变得暗淡一些。如果又把检偏镜旋转一定角度，让其
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恢复原来的亮度，这时检偏镜旋转的角度与方向就是被测试药品的旋光度。
图1 旋光仪示意图
1.钠光源 2.起偏镜 3.半荫片 4.盛液管 5.检偏镜 6.刻度盘 7.目镜 8.固定游标
图2 旋光仪光路图
图3 旋光仪视场变化示意图
三、实验仪器与试剂
葡萄糖颗粒、葡萄糖注射液、氨水、旋光仪、乙酸乙酯。 四、实验步骤
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第三部分 药物化学基本实验项目
1.了解相关概念
①旋光度：当平面偏振光通过含有光学活性的液体化合物或溶液时，能够引起旋光现象的发生，导致偏振光的平面发生向左或向右旋转，其旋转的度数叫旋光度（一般用α表示）。 ②比旋度：当偏振光透过长度为1dm且1 ml溶液中含有1g旋光性物质的溶液时，在一定的波长和一定的温度下我们所测得的旋光度叫比旋度（???D）
t???tD?100?
L?CD代表钠光谱D线； t代表测试时的温度；α代表测得的旋光度； L代表测定管长度（dm）； C代表每100 ml溶液中含被测物质的质量（g），该质量通常按干燥品或无水物计算。 ③ 旋光度不仅与药物化学结构有关，还与测试时溶液浓度、液层厚度、测试时温度，以及光波波长、溶剂性质等有关，通常溶液浓度越大，旋光度相应较大；在一定浓度范围内，药物溶液浓度和药物旋光度呈线性关系；在测比旋度时，必须在一定浓度的溶液中进行；光波波长越短，旋光度越大。通常情况下，室内温度影响较小。对于大多数的药物，在黄色钠光下，温度升高1 ℃，比旋度约减少1 ‰。
2.供试液的配制：精确称取葡萄糖粉末10 g，放于l00 ml容量瓶中，加10%或l0%以下的氨试液0.2 ml，用蒸馏水稀释到标准刻度，混摇均匀，静置l0 min。
3.熟悉角度游标尺的读数方法：游标卡尺分20格，相当于度盘19格，度盘每格为1°，相当于游标卡尺把1°分成了20份，则游标直接读数到0.05°，例如，当游标0刻度指在度盘7和8格之间，且游标第7格与度盘某一格完全对齐，则其计数为α=7.00°+0.05°×7=7.35°。
4.采用半荫式（或三荫式）旋光仪测定溶液旋光度
打开电源开关，等发出的黄色钠光稳定15 min后，校准目镜焦距，调整界限至清晰。取出测定管，装满蒸馏水（切勿产生气泡，如有气泡，应使气泡浮在凸出处），盖上玻璃片、橡胶垫和螺旋盖（注意螺帽不能旋得太紧，否则将产生应力），用软布或擦镜纸揩干，盖好样品管盖。缓缓旋转检偏镜，转至刚好三分视界消失（零度视场），记下读数，如此反复操作三次，得平均值，即为零点读数。取出旋光仪的测定管，用供试液洗涤多次，按同样的方式测定供试液旋光度。能使偏振光向右旋转者（或是顺时针方向旋转）为右旋，用符号“+”表示，使偏振光向左旋转者（或是逆时针方向）为左旋，用符号“－”表示，如此反复测定三次，得平均值，用平均值减去零点读效，就得供试样品的旋光度。 五、注意事项
1.溶液必须装满样品管，切不可有气泡，若样品管中有气泡，应使旋转让气泡处于样品
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管的凸起处。
2.样品管及其两端的透明窗应擦拭干净后才可装入旋光仪。样品管用完后应及时将溶液倒出来，用蒸馏水将其洗涤干净，擦拭并干燥后保藏，实验用的所有镜片均应注意保护，切不可直接用手去擦拭，必须用柔软的擦镜纸擦拭。
3.测试之前用溶剂做空白校正，测定后，再次校正，必须确定测定时零点没有变动；如果在第2次校正时零点有变动，应该重新再次测定药物旋光度。
4.在配制溶液以及测试时，应调节测试温度为20 ± 0.5 ℃（或为药品项特定的温度）。 5.供测试的药物必须不显现浑浊，如有浑浊现象，应先过滤，初滤渣弃去。
6.旋光仪连续使用的时间不得超过4 h。如果使用时间较长，中间要关闭10～15 min，必须等待钠光灯完全冷却后才能再次使用，或者用电风扇吹风冷却，防止亮度变暗以及缩短使用寿命。仪器的电源开关不能反复开关，如果钠光灯关熄，应停止2～3 min后再打开。
7.在测定仪器零点时，应多次按动复测按纽，让检偏镜向左或向右偏离光学零位，以减少仪器机械误差。通过观察仪器左右测定数次的停点，检验仪器重复性与稳定性，也可以用旋光标准石英管来进行仪器准确度的校正。
8.有些药物在见光后，其旋光度变化较大，应该严格避光操作，有些药物对放置的时间要求较严格，必须严格按规定时间进行测定。 六、思考题
1.进行药物旋光度测定时，影响测定结果的因素主要有哪些？
2.有一精制葡萄糖注射液经测定其旋光度是+4.9°，空白试验结果为0，此葡萄糖液射液中葡萄糖（C6H12O6·H2O）的含量是多少？（已知2005年版中国药典规定：无水葡萄糖在25 ℃时其比旋度为+52.5°~ +53.0°）。
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