定,单次取血测定即可了解GH的功能状况,是其优点。
但恶病质、严重营养不良、严重肝病可使其降低。
四、催乳素瘤
是功能性垂体腺瘤中最常见者,好发于女性,临床表现为泌乳、闭经、多毛等。 男性以性功能减退、阳痿、不育为主。临床生化检查可见血清催乳素明显升高。 多数患者血浆中PRL水平明显高于正常参考值。
第四节 性激素紊乱的临床生化
一、性激素的生理生化
所有性激素都是类固醇激素。 血浆中的性激素90%以上都和血浆蛋白形成可逆结合,在肝中代谢,并由尿和胆汁排泄。 睾酮的主要代谢产物为雄酮,是17-KS的主要来源;
雌二醇和雌酮的主要代谢产物为雌三醇;
孕酮的主要代谢产物为孕烷二醇,测定孕烷二醇尿排泄量可作为黄体功能的指标。
二、性激素的生理功能 1.雄性激素主要为:
①刺激胚胎期及生后男性内、外生殖器的分化、成熟和发育; ②促进蛋白质合成的同化作用;
③促进肾合成红细胞生成素、刺激骨髓的造血功能等。 2.雌激素主要为:
①促进女性内、外生殖器的分化、成熟和发育,并和孕激素协同配合形成月经周期; ②对代谢的影响有促进肝合成多种运转蛋白;降低胆固醇;促进HDL合成等。 孕激素的作用则主要与雌激素协同作用于子宫内膜,形成月经周期等。
三、性腺功能的临床生化检测:
血清性腺激素测定可以测定男性和女性血液中性激素浓度,了解性腺疾病和性功能的变化。 其血液浓度也存在着日内和日间变化,尤其是女性在青春期时变化更大,同时也要了解月经周期中每天的变化。所以一次检查不一定能很好的说明问题,需要连续作动态观察,或者进行必要的动态功能试验。 此外也要注意其他的干扰因素,如有甲亢、肝硬化时肝合成性激素结合球蛋白(SHBG)增多,血中睾酮、雌二醇总浓度升高,但能发挥作用的游离部分变化不大;而甲状腺功能减低症、极度营养不良可减少SHBG的合成,结果相反。
女性用避孕药时也会影响性激素的变化。常用的血清性腺激素测定有: 1.男性睾酮:
20
男性生殖系统功能正常有赖于下丘脑、垂体和睾丸间的相互关系。
睾酮是男性体内主要的和唯一具有临床意义的雄性激素。 在青年男性,睾酮的分泌高峰约在上午8时,测定早晨的睾酮水平可以对男性睾酮水平下降的程度作出最好评价。
血循环中游离睾酮的比例很低,不到血总睾酮的2%。 测定男性体内游离睾酮水平可代表生物活性睾酮水平的高低。 参考值:
男性青春期前 10~20 ng/dl 成年男性 300~1000 ng/dl
睾酮测定可以用做男性性功能减退或睾酮分泌不足的诊断;作为评价男性不育症的方法之一。 2.黄体生成素(LH):
女性在黄体生成素、卵泡刺激素和雌二醇相互作用下,促进卵巢激素的合成。
黄体生成素的测定可用于预测排卵和排卵异常的诊断,但在口服避孕药、超排卵药、激素替代治疗、卵巢切除术等时也可影响黄体生成素水平。 参考值:
青春期前:2~12 mU/mL 成人: 4~20 mU/mL
月经中期:>30~200 mU/mL 绝经后: >40~200 mU/mL 3.卵泡刺激素(FSH):
在妇女中,FSH通过直接作用于颗粒细胞上的受体而刺激卵泡的生长和成熟。
和LH一样,FSH滴度升高预示卵泡即将破裂,可以预测排卵和做排卵异常的诊断以及预测对超排卵药物的反应等。 参考值:
青春期前:2~12mU/mL
成人: 4~20 mU/mL
绝经后: >40~200 mU/mL 4.雌二醇(E2):
E2主要由睾丸、卵巢和胎盘分泌,释放入血循环,是生物活性最强的天然雌激素。
对于排卵的女性,血循环中的E2起初主要来源于一组正在成熟的卵泡,最后则来源于一个完全成熟即将排卵的卵泡,以及由它形成的黄体。
E2的浓度变化很大,视月经周期的时相而定。
对于绝经后的女性,E2来源于雄激素在性腺外的转化,循环中的浓度低且不呈现出周期性。对于青春期前的儿童以及男性,循环中的浓度亦低和不呈现出周期性。 参考值:
青春期前:≤40pg/mL 卵泡期: 40~500pg/mL 黄体期: 120~350pg/mL
E2测定可以作为女性早熟诊断指标之一,有助于男性乳房发育分析,评定女性雌激素减少症和过量产生的情况等。
此外服用避孕药,超排卵药物和雌激素替代疗法等都会有影响。
5.孕酮(P):
孕酮是由正常月经周期后半期的黄体分泌的,月经周期不同时相的浓度变化很大。
21
怀孕后其浓度则又受胎盘合成的影响。
孕激素的生理功能是保证受精卵着床和维持妊娠. 孕酮检测用做确证排卵,以及对妊娠头三个月的妊娠意外如先兆流产、异位妊娠的处理参考。 参考值:
卵泡期:0.2~O.9ng/ml 黄体期:3.0~35ng/ml 绝经后:0.03~0.3ng/ml 妊娠: 20~400ng/ml 6.催乳素:
人催乳素的主要生理功能是维系产后泌乳,同时还与卵巢激素共同作用促进分娩前乳房导管和腺体的发育。
催乳素的合成和释放过多将导致性腺功能低下综合征,在女性非常多见。
女性催乳素水平升高可引起泌乳、原因不明的不育症、无排卵伴闭经,最严重者可出现重度雌激素降低。
高催乳素血症是导致女性不育的常见原因。因此测定催乳素对于诊断累及女性生殖系统的疾病具有重要的意义。 参考值:
排卵的妇女:5~25ng/ml
当有异常泌乳、原因不明的不育症、垂体腺瘤等时,是检查催乳素的适应证。
四、性激素紊乱疾病的有关临床生化诊断 1.性发育异常:
是指各种原因所致出生后性腺、第二性征及性功能发育异样的统称,包括性早熟、青春期迟缓和性幼稚病。 性早熟者,检查血中性激素水平均远超出同龄、同性别的正常值,达到青春期或成人水平或更高。
青春期迟缓和性幼稚病的病因不同,两者的性腺激素检查和LH、FSH结果不易加以鉴别,但利用性腺内分泌功能的动态试验如GnRH兴奋试验可以帮助鉴别。 2.性激素合成酶缺陷性性功能紊乱:
可以引起性功能紊乱的性激素合成酶有C-17,20裂链酶缺陷、17-β羟类固醇脱氢酶、5α-还原酶缺陷。
3.青春期后性功能减退症及继发性闭经: 青春期后性功能减退症指男性性成熟后,由于各种原因导致雄性激素分泌不足产生的综合征;继发性闭经指生育期女性,已有月经,出现闭经者。此类患者可检查血清性激素、LH、FSH,再配合动态功能试验,结合临床情况作出诊断
第十四章 临床化学常用分析技术
本章考点
1.临床化学常用分析方法
光谱分析、电泳技术、离心技术、层析技术、电化学分析技术的基本原理和应用 2.临床化学方法的建立 (1)方法建立的根据
22
(2)方法建立的过程
(3)方法的评价
(4)方法建立后的临床观察
第一节 临床化学常用分析方法
一、光谱分析(分光光度技术) 定义:
利用物质具有发射、吸收或散射光谱谱系的特征,以此来确定物质性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术。
它具有灵敏、快速、简便等特点,是生物化学分析中最常用的分析技术。 分类:
(一)可见及紫外分光光度法
分光光度法的理论基础是朗伯-比尔定律。 1.Lamber-Beer定律: A = k·b·c A为吸光度
k——吸光系数
b——光径,单位:cm。
c——溶液浓度,单位:g/L
在可见-紫外分光光度法中,通常在测定未知样品浓度的同时,与同一个已知浓度的标准物作比较,可以利用以下公式计算而求出其浓度,即比较法。
其中Cx和Ax为标本管浓度和吸光度,Cs和As分别为标准管浓度和吸光度。
2.摩尔吸光系数:在公式“A=k·b·c”中,当c=1 mol/L,b=1cm时,则常数k可用ε表示称摩尔吸光系数。
ε的意义是:当液层厚度为1cm,物质浓度为1mol/L时在特定波长下的吸光度值。 ε是物质的特征性常数。
不同物质的摩尔吸光系数不同
3.比吸光系数:在公式“A=k·b·c”中,当c为百分浓度(w/v),b为cm时,则常数k可用E%表示,称为比吸光系数或百分吸光系数。
(二)原子吸收分光光度法
根据待测元素的气态原子能吸收相同原子所发射的特定波长的光,其吸收特性遵循Lambert-Beer定律,即在一定条件下,原子的吸光度同原子蒸气中待测元素基态原子的浓度成正比。
23
常用的定量方法有:
1.标准曲线法: 将一系列浓度不同的标准溶液按照一定操作过程分别进行测定,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。在相同条件下处理待测物质并测定其吸光度,即可从标准曲线上找出对应的浓度。由于影响因素较多,每次实验都要重新制作标准曲线。
2.标准加入法: 把待测样本分成体积相同的若干份,分别加入不同量的标准品,然后测定各溶液的吸光度,以吸光度为纵坐标,标准品加入量为横坐标,绘制标准曲线,用直线外推法使工作曲线延长交横轴,找出组分的对应浓度。
本法的优点是能够更好地消除样品基质效应的影响。 3.内标法: 在系列标准品和未知样品中加入一定量样本中不存在的元素(内标元素),分别进行测定。以标准品与内标元素的比值为纵坐标,标准品浓度为横坐标绘制标准曲线,再根据未知样品与内标元素的比值依曲线计算出未知样品的浓度。
本法要求内标元素应与待测元素有相近的物理和化学性质。只适用于双通道型原子吸收分光光度计。
(三)荧光分析法
有些物质物质受到有较高能量的光(如紫外光)照射时,在吸收了某些波长的光后,会发射出不同波长和不同强度的光(光致发光),照射停止,发光亦随之消失,这种光称为荧光。
利用荧光强度进行分析的方法,称为荧光法。
在荧光分析中,待测物质分子成为激发态时所吸收的光称为激发光,处于激发态的分子回到基态时所产生的荧光称为发射光。
荧光分析法测定的是受光激发后所发射的荧光强弱。
在一定条件下,荧光物质的浓度愈大,发射的荧光强度也愈强。 (四)火焰光度法(火焰发射光谱法)
是待测元素利用火焰作为激发源,成为激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析的方法,属于原子发射光谱分析的一种。
样品中待测元素激发态原子的发射光强度I与该元素浓度C呈正比关系,即I=aC,式中a为常数,与样品组成、蒸发和激发过程有关。
火焰光度法通常采用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和内标法。 临床工作中,火焰光度法主要用于体液中的钠、钾测定,钠的特征谱线为589nm(黄色),钾的特征谱线为767nm(深红色)。 (五)透射和散射光谱分析法
主要测定光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度,常用法为比浊法,又可称为透射比浊法和散射比浊法。
临床上多用于对抗原或抗体的定量分析。
二、电泳分析
在直流电场中,带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳。 常用的电泳分析方法: 1.醋酸纤维素薄膜电泳: 醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯,由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。
24