集者识别并确认后，再发送报告。
微生物检验中的质量保证 人员 试剂 培养基 设备 检验过程 试剂
标识：名称、浓度、储存条件、配制日期、 失效期，生物危害性
新批号或同一批号不同货次试剂使用前性能 评估
方法：分析质控物质 新旧批号平行试验 常规质控
培养基
外观良好：表面平滑、水分适宜、无污染、适当的颜色和厚度。 明确标识：能够获得生产日期、保质期、配方（适用时）、质量控制、贮存条件等信息。 自制培养基：检测每批号相应的性能，如无菌试验、生长试验或与旧批号产品平行试验、生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等。
购买的培养基
最好检查并记录每批号和/或批次产品的破损、污染状况，以及外观、冷冻或受热等信息。
遵循一定质量保证标准产品：免除质量控制，保存生产者所遵循的质量保证标准，以及每批号产品完成无菌试验、质量控制性能合格证明等文件。然而，当培养基脱水、溶血、破损、被污染或量不足时，仍应进行质量控制。
不能提供所遵循的质量保证标准的产品：进行质量控制（包括相应的性能检测） 设备
制定并执行标准操作程序
定期实施维护、保养、监测，并记录
新设备或经搬运、维修后的设备：性能评估及功能验证，或确保实验结果的准确性
常用设备
温度依赖检测设备：定时监测温度，使用过程中注意温度变化；存放试剂和标本的冰箱，亦应监测温度。
确保温度计准确、量程适宜并经检定，已保证设备温度符合要求。
定量移液器、微量滴定管或自动分配器：核查并记录使用区间内的准确性和重复性。 定期监测特殊设备性能：CO2孵育箱内CO2浓度；厌氧系统的厌氧条件；生物安全柜内气流、过滤器（必要时）；压力灭菌器灭菌效果等。
检验过程
检验方法的确认和验证 标准化操作程序
生物参考区间：定期评审 测量准确性
内部质量控制体系 标本质量评估
检验方法的选择与确认
通常选择检测方法和程序与所提供的服务相适宜，并且方便操作 公认的、权威的教科书 经同行评议的书刊、杂志
国际、国家、地区法规明确的方法和程序 符合相应用途的内部规程
所有方法和程序检测患者标本之前，评估准确性、精确性、灵敏度、特异性、检出限、可报告范围，与已有方法比对。使用后，需定期评审。
标准化操作程序
StandardOperatingProcedure,SOP
包括实验所有重要信息及技术说明，内容： 实验原理、临床意义 标本类型、容器和添加剂
所需设备、性能参数、校准程序 检测试剂、定标试剂、质量控制程序 操作步骤、干扰和交叉反应、结果计算 生物参考区间
结果可报告区间、警告/危急值（适用时）、结果解释、安全性警告及措施、潜在变异来源。
分析前、后注意事项，特殊操作模式的处理。 测量准确性 溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。
方法：测量系统的校准和验证； 参比到自然常数或规定的参考值 能力验证或实验室间比对计划 定期性能评估 内部质量控制体系
保证检验结果持续满足预期质量标准
质控物质的检测方法、检测次数、操作者与患者标本一致。质控频率遵循有关标准，满足仪器和/或检测系统制造商的要求
缺乏合适校准和质控物质的项目：验证结果的准确性
及时发现并更正重大的文字错误、实验错误以及可能影响患者处理的不寻常的检测结果。
标本质量评估内容 标本量
标本采集次数
标本的质量
血液、体液、尿标本等的污染率 检验后的质量保证
检验后程序也叫分析后期，指检验后的全部过程，包括：
检验结果的评审与报告：制定“警告/危急”范围、标本周转时间；必要时，及时发送分级报告；危急值及时报告并记录
标本的处置：感染性废弃物
葡萄球菌的临床检验程序 标本直接检查
显微镜检查无菌体液如脑脊液和关节穿刺液等可直接涂片、革兰染色后，显微镜检查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌，则具有重要临床价值；其他体液标本查见细菌的同时伴有炎性细胞则也具有参考价值。可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”，并进一步进行分离和鉴定。
分离培养与鉴定 分离培养
脓液、分泌物等临床标本可接种血琼脂平板； 有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板；
血液标本则用肉汤增菌培养基增菌后。 初步鉴定 1）菌落性状平板培养基上孵育24h后，菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实。 2）鉴别试验
触酶试验阳性、溶葡萄球菌素（200μg/ml）和呋喃唑酮100μg敏感，氧化酶试验阴性可以与其他革兰阳性球菌区别。
红霉素（0.4μg/ml）耐药和甘油需氧产酸可以与微球菌区别。 （3）种的鉴定
凝固酶试验玻片法测定结合型凝固酶；试管法测定分泌型凝固酶。金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反应。路邓葡萄球菌产生结合型凝固酶而不分泌游离型凝固酶,因而玻片凝固酶试验阳性、试管凝固酶试验阴性
链球菌的临床检验程序 标本直接检查 显微镜检查 标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断。
抗原检测
咽拭标本的A群链球菌和女性生殖道标本的B群链球菌可用抗原检测 荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌。 分离培养与鉴定
分离培养采用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步鉴定。 初代分离需用5%CO2环境，35~37℃孵育24h，观察菌落性状
菌落周围呈现透明溶血环的为β溶血性链球菌，菌落直径大于0.5mm或小于0.5mm。 草绿色溶血环的为α溶血性链球菌 有些菌落灰白色不出现溶血环。
初步鉴定
取分离平板上生长的菌落周围呈现溶血或不溶血的单个菌落作涂片，革兰染色镜检 革兰阳性球菌，链状或短链状排列 触酶试验阴性，6.5%NaCl不生长者 可确定为链球菌属细菌 β溶血性链球菌鉴定
Lancefield群特异性抗原鉴定
根据Lancefield分群的要求提取各菌落的抗原，与相应的分群血清进行凝集试验。 与B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链菌
与F群抗血清凝集并且菌落直径＜0.5mm可确定为米勒链球菌
与A、C、G群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定。
杆菌肽敏感试验
A群链球菌对0.04U杆菌肽几乎全部敏感。
从临床分离的菌株中有5%~15%非A群链球菌如B、C和G群链球菌等也敏感。 而其他群链球菌绝大多数对其耐药。
可作为A群链球菌的筛选试验。有别于其他PYR阳性的β溶血性细菌（猪链球菌、海豚链球菌）和A群小菌落β溶血性链球菌（米勒链球菌）。
CAMP试验
无乳链球菌能产生CAMP因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验
肠球菌的临床检验程序。 标本直接检查 显微镜检查
涂片染色显微镜检查可见单个、成双或短链排列卵圆形革兰阳性球菌。 分离培养与鉴定
标本接种于含血琼脂平板，
接种标本平板置于35~37℃，孵育24h后形成灰白、不透明、表面光滑、直径0.5~1mm大小的圆形菌落，血平板上为α溶血或不溶血，粪肠球菌的某些菌株在马血、兔血平板上出现β溶血。
初步鉴定
肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。 触酶阴性、胆汁七叶苷和PYR阳性、6.5%NaCl肉汤中能生长。 但粪肠球菌培养于含血的培养基中，可合成细胞色素或触酶或两者皆有，因而某些菌株可表现为触酶弱阳性。
抗体检测（肥达反应）
用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验，称为肥达反应（Widaltest）。
与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下，能辅助诊断伤寒、副伤寒A、B和C引起的肠热症。
志贺菌属分类
志贺菌属分为A、B、C、D4群：A群为痢疾志贺菌（S.dysenteriae），B群为福氏志贺菌（S.flexneri），C群为鲍氏志贺菌（S.boydii），D群为宋内志贺菌（S.sonnei）。
结核分枝杆菌微生物学检验 标本采集
据感染部位的不同采集不同的标本
疑肺结核：收集清晨第一口痰，清洁干燥的容器内送检 疑泌尿系结核：清晨一次全部尿量或24小时尿沉淀10～15ml送检，必要时作无菌导尿送检（诊断泌尿道结核通常需3～5份标本）
采集脓液应直接从溃疡处取脓汁或分泌物,深部脓肿用无菌注射器抽取送检
其他：无菌抽取脑脊液、胸水、腹水及关节液等盛无菌试管送检。脑脊液标本静置后，表面可有细薄凝块，取凝块作涂片或接种培养
标本直接检查
形态学检查-----抗酸染色阳性（显红色） （1）直接涂片染色镜检 （2）浓缩集菌涂片检查法 分离培养
标本接种于选择性培养基中（常用罗氏，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长） 37℃，5％～10％CO2培养8周
结核杆菌出现干燥呈颗粒状、灰白色菌落 涂片染色为抗酸阳性
3.菌种鉴定 （1）生化反应 （2）噬菌体鉴定法
（3）分子生物法菌种鉴定
（4）高效液相色谱（HPLC）检测分枝菌酸
生化反应--烦琐、费时（4～8周）,影响因素多 免疫学诊断 结核菌素试验
针对旧结核菌素（OT）与结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）两种菌体蛋白
原理：当将蛋白注入皮内后，如受试者已感染结核杆菌，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发性超敏反应性炎症，若受试者未感染MTB则无反应。
结核分枝杆菌抗原检测
用ELISA方法在血清中检测结核分枝杆菌抗原-结核菌外分泌特异性抗原（externalsecretedspecificantigen）浓度。
任何体液如血液、痰液、脊髓液、尿液和各式组织萃取液等体液可用于检测特异蛋白抗原。
结核抗体
作为活动性MTB感染的快速诊断方法之一
比传统的痰涂片抗酸染色、MTB培养等方法简便、快速、敏感性高，但存在一定的 药物敏感性试验
将纯培养物菌悬液，接种含各种浓度药物的固体培养基上，同时做不含药物的对照组。 经过培养，含有药物的培养基上菌落数目是对照组的75％以上，则认为该菌对该药物浓度为完全耐药，如无菌落生长则为敏感。
厌氧菌的检验