标本的采集与运送是否适当，对厌氧菌培养能否成功至关重要。临床在进行厌氧菌培养前应与实验室联系，以便实验室做好接种培养的准备。
须注意两点：①标本不能被正常菌群所污染； ②应尽量避免接触空气。
某些标本不适合做厌氧菌培养：如鼻咽拭子、痰液、流出的脓液、阴道分泌物、粪便等。 标本的检查方法
实验室收到标本应在20～30min内处理完毕，最迟不超过2h。如不能及时接种，应将标本保存于室温（冷藏对厌氧菌有害）。
直接检查：实验室收到标本应仔细观察其性状，包括气味、是否脓性、带血或黑色坏死组织、硫磺样颗粒及紫外灯下有无荧光等。
除血液外，各种标本均须直接涂片作革兰染色镜检，发现染色不均，形态奇特者常为厌氧菌的表现。
标本的分离培养 初代培养：厌氧菌的初代培养比较困难，不仅要创造无氧环境，还要选择适当的培养基。 在培养基选择上应注意：
1.尽量使用新鲜培养基，2～4ｈ内用完；
2.使用前放入无氧环境，预还原处理24～48ｈ； 3.也可采用预还原灭菌法制备的培养基；
4.液体培养基应煮沸10min，驱除溶解氧，并迅 速冷却，立即接种。 标本的接种
初代培养应同时接种固体、液体两种培养基，且每份标本应同时接种3个平板，分别置有氧、无氧和含5~10%CO2环境培养。
为了便于在混合培养物中发现厌氧菌，一般将标本分3区划线接种于平板上，在1.2区交界处，贴一张含5μg/片的甲硝唑纸片，如纸片周围出现抑菌圈，表明有厌氧菌存在。
结果观察
厌氧菌的初代培养生长较慢，故应在48ｈ后才能初步观察 观察时应注意：
1.厌氧菌在对数生长期对氧非常敏感，故在 培养的48ｈ内不应使细菌暴露于空气中 2.标本镜检阳性，但培养48ｈ却无菌生长， 应继续培养5～7ｄ。 习题：
1.医学微生物包括细菌学、病毒学和其他微生物三大部分
2.原核细胞型微生物包括细菌、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、放线菌共六类微生物
3.病毒必须在活细胞内才能增殖，为非细胞型微生物。
4.正常菌群对人体具有生物拮抗、营养作用、免疫作用和抗衰老作用。 5.测量细菌大小的单位是微米/μm。
6.细菌的基本形态有球菌、杆菌和螺形菌。
7.细菌细胞内的遗传物质有染色体和质粒两种，其中质粒不是细菌生命活动所必需的。 8.细菌的菌毛有普通菌毛和性菌毛两种，前者与细菌粘附有关，后者具有传递遗传物质作用。
9.经革兰染液染色后，被染成紫色的是革兰阳性菌，被染成红色的是革兰阴性菌。
10.细菌的特殊结构有荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。
11.革兰阴性菌细胞壁的脂多糖包括（脂质A、核心多糖和特异多糖3种成分。 12.革兰阴性菌细胞壁的肽聚糖是由聚糖骨架和四肽侧链构成. 13.肥达反应:用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原,检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集实验.
14.培养基的种类:1.基础培养基2.营养培养基3.鉴别培养基4.选择培养基5.特殊培养基
1.乙肝病毒的抗原抗体系统的意义:①HBsAg阳性,提示HBV感染,持续6个月以上为携带状态;HbsAb,是一种中和抗体,对同型病毒的再感染具有保护作用,它的出现表示病毒以基本清除,是乙肝痊愈的一个重要指标
;②HbeAg阳性,表示病毒在体内复制,传染性强,病变可持续进展;HbeAb阳性,表示机体传染性减低,但没有保护力;③HbcAg是HBV复制活跃的直接指标之一,但不能再血清中直接检测出,HBcAb是继HBsAg和HbeAg之后就可血清中检出,早期以IgM为主,IgM是急性HBV感染的指标;HBcAb-IgG见于急性感染恢复期和慢性持续性感染,可持续数年
2.染色方法优缺点比较：
H-E染色：优点：染色效果好。操作简易，试剂易配染色透明度好，细胞质呈淡玫瑰红色，细胞核显紫蓝色，红细胞呈朱红色。缺点：不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定/
巴氏染色优点：色彩多样且鲜艳。染色效果好，能观察女性雌激素水平；缺点：染色程序较复杂/
瑞－吉氏染色适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片
3.肺结核，如何进行微生物学检查:（包括标本采集至报告结果的全过程，检查方法应有传统方法和快速检查方法。）1）标本采集：根据感染部位不同，采集不同的标本。2）标本直接检查：①显微镜检查②核酸检测③抗PPDIgG的检测。3）分离培养与鉴定4）药物敏感性试验5）免疫学诊断6）动物接种
4.革兰染色的原理及临床意义:①染色原理:1革兰阳性菌细胞壁结构比较致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易透过;革兰阴性菌细胞壁结构比较疏松,肽聚糖层薄,含大量脂质,乙醇易渗入;2.革兰阳性菌等电点比革兰阴性菌低,在相同pH条件下,革兰阳性菌所带负电荷要多,故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢靠,不易脱色;3.革兰阳性菌菌体含大量核糖核酸镁盐,可与碘,结晶紫牢固结合,使已着色的细菌不被乙醇脱色;革兰阴性菌则易被脱色;②临床意义:1.把细菌分为两大类,即革兰阳性菌和革兰阴性菌,指导临床医生合理使用抗生素;2.了解细菌的致病性,革兰阳性菌可产生外毒素致病,革兰阴性菌主要以内毒素致病.
5.抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。①初染：石炭酸复红加温染5min②脱色：3%的盐酸酒精脱色1min③复染：美兰染1min结果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌.
6.鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌.
7.基础培养基:含有细菌生长所需的基本营养成分,最常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分是牛肉浸液和蛋白胨.
8.结核菌素试验:（1）原理：结核菌素试验属于迟发型超敏反应，用结核菌素试剂作皮肤试验，感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者，一般都出现阳性反应。（2）方法：取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下，经48—72h检查反应情况。应特别注意局部有无硬结，不
能单独以红晕为标准。（3）结果分析：①阳性注射部位硬结、红肿直径0．5—1．5cm之间。这表明机体曾感染过结核，出现超敏反应，但不表示正患结核病；②强阳性硬结直径超过1．5cm以上，表明可能有活动性结核，应进一步检查；③阴性注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于0．5cm，说明无结核感染，但应考虑下述情况：如受试者处于原发感染的早期，或正患有其他传染病（如荨麻疹等）、霍奇金病、结节病、艾滋病.（4）应用：①选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG；②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用；③可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。
9.金黄色葡萄球菌的鉴定:①标本采集:食物或呕吐物;②:直接染色镜检:G＋菌球菌在镜下排列成葡萄串状;③分离培养:接种于高盐甘露醇培养基,再转接至血平板,菌落周围出现β溶血现象,产生金黄色色素;④生化反应:血浆凝固酶,耐热核酸酶,甘露醇发酵试验均为阳性;⑤毒素测定
10.抗菌药物敏感试验的意义（AST）:1.可预测抗菌治疗的效果2.指导抗菌药物的临床应用3.发现或提示细菌耐药机制的存在,避免产生或加重细菌的耐药4.监测细菌的耐药性分析细菌的变迁,以控制和预防耐药菌感染的发生和流行.
11.抗酸染色的步骤及结果，并举出两种抗酸菌。①初染：石炭酸复红加温染5min②脱色：3%的盐酸酒精脱色1min③复染：美兰染1min结果：抗酸菌为红色，非抗酸菌为蓝色。结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌.
第四部分 临床生物化学与生物化学检验
自动生物化学分析仪的定义
automaticbiochemicalanalyzer：
是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温反应、自动监测、数据处理、打印报告及实验后的清洗等步骤进行自动化操作的仪器。
试剂自动检测：借助条码技术识别种类及效期等。
样本自动识别：量多少，有无溶血、脂血、黄疸、血球、凝块等。 自动加样：试剂、样本、稀释液等。 自动检测：样本杯、试剂架、反应杯。 自动报警：
自动生物化学分析仪的特点
精密度高，功能齐全：配有完善的计算机控制系统，具备程序控制、自动调节、自动报警、误差校正、指示判断、数据处理、质量管理及故障诊断等功能。；
可进行吸光度、浓度和酶活力的测定，能使用终点法和连续监测法、比浊法和均相酶免疫分析法进行分析。
具有快速、简便、微量、标准化、样品和试剂用量低等优点。 自动生物化学分析仪的类型
基本原理：是基于光电比色法原理进行工作的。
分类
①按反应装置的结构可分为连续流动式、离心式、分立式和干片式四类。（最常用的分类法）
②按自动化程度可分为全自动和半自动型二类。 ③按同时可测定项目可分为单通道和多通道两类，单通道每次只能检测一个项目，但项目可以更换。多通道每次同时可以测多个项目。
④按仪器的复杂程度及功能可分为小型、中型和大型三类。
一、连续流动式自动生物化学分析仪
是第一代自动分析仪，在测定过程中各待测样品与试剂混合后的化学反应均在同一管道内连续流动的过程中完成的。
二、离心式自动生物化学分析仪
加样部分：包括样品盘、试剂盘、吸样臂、试剂臂和电子控制部等。
分析部分：除安装有特殊的离心转盘外，还有温控和光学检测系统，以及微机信息处理和显示系统。
（二）工作原理
先将样品和试剂分别置于转盘相应的凹槽内，当离心机开动后，受离心力的作用，试剂和样品相互混合发生反应，经适当的时间后，各样品最后流入转盘外圈的比色凹槽内，通过比色计检测。
三、分立式自动生物化学分析仪
是按人工操作的方式编排程序，并以有序的机械动作代替人工，按程序依次完成各项操作的自动分析仪器。
仪器操作过程中的各环节用传送带连接，按程序依次操作，它与流动式分析仪结构上的区别在于该类仪器的样品和试剂在各自的试管（或反应杯）中独立进行。
常测项目，简要讲述测这些指标的临床意义： ALT BUN AMY TBIL CREA HBDH DBIL UA LDH IBIL GLU CK TP TG CK-MB ALB T-CHOL K+ GLO HDL-C Na+ ALB/GLO LDL-C Cl- ALP APO-B P GGT APO-A1 Ca AST APO-A1/APO-B Mg AST/ALT
一、总胆红素T-BIL2.0－20.0cmol／2
1.增高见于
（1）肝细胞性疾病：如急性黄疽性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化、肝坏死等。
（2）阻塞性疾病：如胆石症、胰头癌等。
（3）其他：如新生儿黄疽、败血症、溶血性贫血、严重大面积烧伤、溶血等。 2.减低无临床意义
二、直接胆红素D-BIL0.0-6.0umol/L
增高常见于阻塞性黄疽、肝癌、胰头癌、胆石症等。 减少：无临床意义
三、间接胆红素IBIL1.7-13.0umol/L
增高常见于溶血性黄疽、先天性黄疽、肝细胞性（肝炎）或混合性黄疽，也于见阻塞性黄疽。
注：总胆红素，直接胆红素、间接胆红素的辩证关系：
1.三者均高，属肝细胞性黄疽、如急性重症肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、肝癌等。
2.总胆红素和直接胆红素升高，属阻塞性黄疽，如胆道结石、胆道阻塞、肝癌、胰头癌等。
3.总胆红素和间接胆红素升高，属于溶血性黄，如溶血性盆血、血型不合输血、恶性症疾、新生儿黄疽等。
四、丙氨酸氨基转移酶ALT0-40u／L
增高：
1.肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、肝硬化活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆石症、胆管炎、胆囊炎。
2.心血重疾病：心肌梗死、心肌炎、心功能不全的肝淤血、脑出血等。 3.骨骼肌病：多发性肌炎、肌营养不良等。
4.其他：某些药物和毒物引起ALT活性升高，如氨丙嗪、异烟肼、水杨酸制剂、乙醇、铅、汞、四氯化碳或有机磷等。
减少：无临床意义
五、门冬氨酸氨基转移酶AST0-37u/L
增高：
1.肝脏疾患:肝炎、脂肪肝、肝硬化等。 2.胆道疾患：胆囊炎、胆石症急性发作。
3.心脏疾患：急性心肌梗塞，心肌炎，心力衰竭等。
4.一些感染性疾患：如肺炎、伤塞、结核病、传染性单核细胞增多症等。 减少：无临床意义
六、总蛋白TP60.0-80.0g／L
1.增高
（1）常见于高度脱水症（腹泻、呕吐等）。 （2）多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。 （3）系统性红斑狼疮、多发性硬化病等。 2.减少：
（1）营养不良和消耗增加:如肾病综合症、结核、甲状腺功能亢、进、恶性肿瘤、溃疡性结肠炎、烧伤、失血等。