1%淀粉（0.3%氯化钠的） 2%蔗糖溶液 蒸馏水 Benedict试剂 记录观察结果 — — 3 2 3 — — 2 — 3 — 2 沸水浴煮沸2～3分钟 取三支试管，按下表操作：
注意：纯净的淀粉和蔗糖遇Benedict试剂不呈阳性反应。 （3）淀粉酶的专一性： 取6支试管，按下表操作：
管号 1%淀粉溶液（滴） 2%蔗糖溶液（滴） 稀释唾液（mL） 煮沸过的稀释唾液（mL） 蒸馏水（mL） 1 4 — — — 1 o2 — 4 — — 1 3 4 — 1 — — 4 — 4 1 — — 5 4 — — 1 — 6 — 4 — 1 — 37C恒温水浴15分钟 Benedict试剂（mL） 1 1 1 1 1 1 沸水浴煮沸2～3分钟 实验现象 实验总结： 淀粉酶的专一性
管 号 1 2 3 4 现 象 解释结果
5 6 二、 影响酶促反应的因素
（一）、温度对酶活力的影响
【实验目的】
了解温度对酶活力的影响素。 【实验原理】
温度对酶的活性有很大的影响。酶促反应开始时，反应速度随着温度的升高而加快，达到最大反应速度时的温度称为某种酶的最适温度。由于绝大多数酶是有活性的蛋白质，当达到最适温度后继续升高温度，可引起蛋白质变性，酶促反应速度下降，以致完全停止。低温能降低酶或抑制酶的活性，但不能使酶失活。酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。测定酶活性均在最适温度下进行。大多数动物酶的最适温度在37～40C范围，植物酶的最适温度在50～60C范围。
【实验器材】
(1) 试管与试管架 （2）恒温水浴 （3）冰浴 （4）沸水浴 （5）移液管（1、2mL）（6）烧杯（500、1000mL） （7）锥形瓶（100mL） （8）玻璃漏斗 （9）滤纸等。 【试剂与材料】
（1）0.2%淀粉的0.3%NaCL溶液（0.2g淀粉溶于100mL0.3%NaCL溶液中煮沸2～3分钟）。 （2）稀释200倍的新鲜唾液。
（3）碘化钾—碘溶液（将碘化钾20g溶于100mL水中，使用前稀释10倍）。 【实验操作】
淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈颜色。在不同的温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。
取3支试管，编号，按下表操作：
管号 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液（mL） 稀释唾液（mL） 1 1.5 1 2 1.5 1 3 1.5 o
o
煮沸过的稀释唾液（mL） o 1 摇匀后，将1号、3号两试管放入37C恒温水浴中，2号试管放入冰浴中，10分钟后取出，（将2号试管内的液体分成两半）用碘化钾—碘溶液来检验，2号试管的另一半继续在37C恒温水浴中保温10分钟后，用碘化钾—碘溶液来检验。 碘化钾—碘溶液（滴） 记录观察结果 1 1 1 o（二）、pH对酶的活力的影响
【实验目的】 了解pH对酶的活力的影响 【实验原理】
酶活力受环境pH的影响，在一定pH下，酶表现最大活力，高于或低于此pH，酶活力降低，通常把表现出酶最大活力的pH称为该酶的最适pH。pH影响酶活力的主要原因有以下几个方面，首先，pH影响酶分子活性部位上有关基团的解离，另外，也影响底物的解离状态，从而影响酶活性中心与底物的结合或催化。其次，有关基团解离状态的改变影响酶的空间构象，甚至会使酶变性。尽管有一些酶能忍受较大的pH的变化，但大多数酶保持活性的pH值范围很窄。正因如此，生物体使用缓冲液调节体内的适宜pH值。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶最适pH为6.8。
【实验器材】 试管及试管架；滴管；恒温水浴锅；温度计；移液管 ；50mL的锥形瓶 【实验试剂】
（1） 新配置的溶于0.3%氯化钠溶液的0.5%淀粉 （2） 稀释200倍的新鲜唾液 （3）0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 （4） 0.1mol/L 柠檬酸溶液 （5）碘化钾—碘溶液 （6）pH试纸 【实验操作】
（1）取4个标有号码的50mL锥形瓶, 按下表加入试剂：
锥形瓶号 1 2 3 4 0.2mol/L磷酸氢二钠（mL） 5.15 6.05 7.72 9.72 0.1mol/L 柠檬酸溶液（mL） 4.85 3.95 2.28 0.28 pH 5.0 5.8 6.8 8.0 （2）取4支试管编号，按下表加入试剂
试管号 各锥形瓶内的缓冲液（mL） 1号锥形瓶缓冲液3 2号锥形瓶缓冲液3 3号锥形瓶缓冲液3 4号锥形瓶缓冲液3 0.5%淀粉（mL） 稀释200倍的新鲜唾液（mL） 1 2 3 4 2 2 2 2 2 2 2 2 注意：向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1分钟。 （3）将各管的内容物混匀，并依次置于37C恒温水浴中保温
（4）待向第4管加入唾液2分钟后，每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化钾—碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向说有试管依次添加1～2滴碘化钾—碘溶液。添加碘化钾—碘溶液的时间间隔，从第1管起，亦为1分钟。观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。
o
（三）、唾液淀粉酶的活化和抑制
【实验目的】 了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
【实验原理】 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。
【实验器材】 (1)恒温水浴 (2)试管及试管架
【试剂和材料】 (1)0．1％淀粉溶液 (2)稀释200倍的新鲜唾液
(3)1％氯化钠溶液 (4)1％硫酸铜溶液 (5)1％硫酸钠溶液 (6)碘化钾―碘溶液
【实验操作】
管 号 0.1%淀粉溶液（mL） 稀释唾液 1%硫酸铜溶液 1%氯化钠溶液 1%硫酸钠溶液 蒸馏水 1 1.5 0.5 0.5 ― ― ― 2 1.5 0.5 ― 0.5 ― ― 3 1.5 0.5 ― ― 0.5 ― 4 1.5 0.5 ― ― ― 0.5 37℃恒温水浴、保温10分钟
碘化钾―碘溶液（滴） 现 象 2~3 2~3 2~3 2~3 解释结果，说明本实验第3管的意义。 【思考题】
1、什么是酶的最适温度及其应用意义?
2、什么是酶反应的最适pH?对酶活性有什么影响? 3、什么是酶的活化剂?
4、什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？ 【实验总结】
（一）、温度对酶活力的影响
管 号 1 2 2号剩一半 3 （二）、PH对酶活性的影响
呈现的颜色 解释结果 管 号 1 2 3 4 呈现的颜色 解释结果 （三）、唾液淀粉酶活化和抑制
管 号 呈现的颜色 解释结果 第3管的意义